PRÁCTICA N° 8

DETERMINACION DE CREATININA EN SUERO, PLASMA Y ORINA (VALTEK)

1. OBJETIVOS

 Determinar las concentraciones de Creatinina en Suero o Plasma.

 Interpretar las diferentes alteraciones que pueden presentarse en el Dosaje de
Creatinina en Suero y Plasma.

2. FUNDAMENTO

La Creatinina es un producto final del Metabolismo Muscular. Es un Anhídrido de la

Creatina que se forma mediante una reacción espontánea e irreversible y su formación
tiene una reacción directa con la Masa Muscular.
Cuando esta libre, no se utiliza en el Metabolismo del Cuerpo y, por tanto funciona
únicamente como producto de excreción de la Creatina como de la Fosfocreatina.

Tras pasar a la Sangre, se elimina en su mayoría vía a Renal mediante Filtración

Glomerular y solo una pequeña cantidad Su Nivel Plasmático es bastante constante,
de manera que no se modifica ni con ejercicios ni con las variaciones del
Catabolisismo.

Además, es mucho menos dependiente del aporte dietético que la Urea (la cantidad
de Creatinina ingerida con la Dieta Exógena es insignificante). La Producción
Endógena, de Creatinina se mantendrá constante, tanto Tiempo como la Masa
Muscular se mantenga constante.

La Creatinina, en presencia de Picrato Alcalino produce un Color Anaranjado

(Reacción de Joffe) que se mide a 505 nm en cantidad proporcional a su
concentración en la muestra.

3. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

3.1. DETERMINACIÓN DE CREATININA

a. Reactivos:

 COMPOSICIÓN:
Buffer Alcalino 50 mL
Ac. Picrico 250 mL
SOLUCIÓN STANDARD
Solución de Creatinina estandarizada y estabilizada

b. Equipos
  Espectrofotómetro o fotocolorímetro de filtros capaz de leer absorbencias
a 505 nm (Rango 490 a 520 nm).
 Pipetas

c. Muestra

De preferencia utilizar Suero Libre de Hemolisis o Plasma Heparinizado

d. Procedimiento

Técnica para suero

Desproteinización: A 0.30 ml de Suero agregar 1.50 ml de Reactivo Picrico,

mezclar vigorosamente, dejar reposar 10 minutos y centrifugar a 3000 R.P.M.
por a lo menos 5 minutos.
Colorimetría:
Blanco Estándar Desconocido
Desproteinizado -- -- 1.20
(mL)
Standard (mL) -- 0.20 --
Agua (mL) 0.40 0.20 --
R. pícrico 0.80 0.80 --
Buffer alcalino 0.20 0.20 0.20

 Mezclar e Incubar 20 minutos a Temperatura Ambiente (20° a 25° C).

 Leer las absorbancias a 505 nm (rango 490 - 520 nm) llevando a Cero el
Instrumento con el Blanco Reactivo.

Técnica para orina

Diluir orina 1:10 con agua destilada.

Blanco Estándar Desconocido

Orina diluida -- -- 0.20
(mL)
Standard (mL) -- 0.20 --
Agua (mL) 0.40 0.20 0.40
R. pícrico 0.80 0.80 0.30
Buffer alcalino 0.20 0.20 0.20

 Mezclar e Incubar 20 minutos a Temperatura Ambiente (20° a 25° C).

 Leer las absorbancias a 505 nm (rango 490 - 520 nm) llevando a cero el
Instrumento con el Blanco Reactivo.

e. Cálculos
 𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐶𝑅𝐸𝐴𝑇𝐼𝑁𝐼𝑁𝐴 𝐸𝑁 𝑆𝑈𝐸𝑅𝑂 (𝑚𝑔/𝑑𝐿) = 𝑋 1.50
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟𝑑

𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
𝐶𝑅𝐸𝐴𝑇𝐼𝑁𝐼𝑁𝐴 𝐸𝑁 𝑂𝑅𝐼𝑁𝐴 (𝑚𝑔/𝑑𝐿) = 𝑋 1.50
𝐴𝑏𝑠𝑜𝑟𝑏𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟𝑑
𝐶𝑅𝐸𝐴𝑇𝐼𝑁𝐼𝑁𝐴 𝐸𝑁 𝑂𝑅𝐼𝑁𝐴 (𝑚𝑔/24ℎ)
𝑚𝑔 ℎ
= (𝑐𝑟𝑒𝑎𝑡𝑖𝑛𝑖𝑛𝑎 𝑜𝑟𝑖𝑛𝑎 ( ) 𝑋 𝑉𝑂𝐿. 24 ) 𝑥10
𝑑𝐿 𝐿

f. Rango de referencia

SUERO ORINA
Hombres 0.7 – 1.4 mg/dL 1.3 – 2.6 g/24h
Mujeres 0.6 – 1.2 mg/dL 0.9 – 1.8 g/24h

Clearence 80 – 160 mg/dL

4. RESULTADOS
4.1. DETERMINACIÓN DE ÁCIDO ÚRICO
Tubo Abs. Concent. Ác.
urico
Calibrador 0.18
Muestra 1 (M1) 0.280 2.33
Muestra 2 (M2) 0.110 0.92

Cálculos

0.280
𝐶𝑅𝐸𝐴𝑇𝐼𝑁𝐼𝑁𝐴 𝐸𝑁 𝑆𝑈𝐸𝑅𝑂 (𝑚𝑔/𝑑𝐿) 𝑴𝟏 = 𝑋 1.50 = 2.33
0.18

0.110
𝐶𝑅𝐸𝐴𝑇𝐼𝑁𝐼𝑁𝐴 𝐸𝑁 𝑆𝑈𝐸𝑅𝑂 (𝑚𝑔/𝑑𝐿) 𝑴𝟐 = 𝑋 1.50 = 0.92
0.18

5. CONCLUSIONES
 Los valors creatinina en Suero son de 0.7 a 1.4 mg/dl
 En el caso de hombres y 0.6 a 1.2 mg/dl, dentro del rango
 en el caso de mujeres valores determinados fueron 2.33 mg/dL Y 0.99
mg/dL esto nos indica que no están funcionando bien los riñones.
 La muestra 2 se encuentra dentro de los valores normales, tanto para
hombres y mujeres, lo que indica buen funcionamiento renal.
6. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

 Henry, R.J. Ed., Clinical Chemistry: Principles and Technics (2°Ed). Harper
and Row, 1974.

CUESTIONARIO
1. Definir creatinina y describir su composición química.
La creatinina es un compuesto orgánico generado a partir de la degradación de la
creatina (que es un nutriente útil para los músculos). Se trata de un producto de desecho
del metabolismo normal de los músculos que habitualmente produce el cuerpo en una
tasa muy constante (dependiendo de la masa de los músculos), y que normalmente
filtran los riñones excretándola en la orina. La medición de la creatinina es el modo más
simple de evaluar el funcionamiento de los riñones.
2. Describir la secuencia de formación de la creatinina.
La formación de creatinina es razonablemente constante, transformándose cada 24 horas
una cantidad aproximada de un 2% de creatina en creatinina. En consecuencia, la cantidad
producida diariamente esta también relacionada con la masa muscular. La creatinina filtra
libremente por el glomérulo (pequeñas cantidades son reabsorbidas y también secretadas
por los túbulos renales). Finalmente es excretada de forma principal por los riñones,
aunque una pequeña parte con las heces.
Se sintetiza de forma natural en el hígado, el páncreas y en los riñones a partir de
aminoácidos como la arginina, la glicina y la metionina a razón de un gramo de creatina
por día
3. Qué enfermedades alteran los valores normales de la Hemoglobina.
 Deshidratación
 Tabaquismo agudo
 Policitemia vera.
 Enfermedad pulmonar
4. Definir la creatinuria.
creatinina mide la cantidad de creatinina en la orina. Este examen se hace para ver qué
tan bien están funcionando sus riñones. Cantidad excesiva de creatina presente en orina.
5. ¿Por qué la diabetes mellitus mal controlada incrementa los valores de
Creatinina?
Si no se consigue detener la evolución, se irá produciendo un aumento de la cantidad de
albumina en orina, de forma que se habrá dado paso a una fase posterior que será cuando
la cantidad de albumina en orina supere los 300 mg/d (albuminuria o proteinuria). En este
momento, la posibilidad de detener la posterior aparición de la insuficiencia renal
(aumento de Urea y Creatinina) es cada vez menor a medida de que la albumina aumenta
y nula una vez que ésta se produce.
6. ¿Es normal valores elevados de creatinina en fisiculturistas?
Si, atletas y fisicoculturistas también pueden tener la creatinina alta debido a la elevada
actividad muscular y no debido a una lesión a nivel renal.