Determinacin de creatinina en orina mediante espectrometra de absorcin molecular

Leidy Yulieth Lpez Quintero 1640172, Andrs Felipe Franco Herrera 1645395
Universidad del Valle, Departamento de qumica
Laboratorio de Qumica Analtica General
Abril 17 de 2017

Resumen: Por medio de la espectroscopia de Absorcin atmica visible se determin la

concentracin de creatinina en orina, utilizando adems una solucin de trabajo de cido pcrico y
NaOH y una solucin estndar de creatinina. Con los valores obtenidos se pudo establecer un
promedio de la concentracin de creatinina que fue de 39,82 6,25 mmol /L y 450 70,71 mg /dL
respectivamente.

DATOS, CLCULOS Y RESULTADOS

Las soluciones preparadas fueron NaOH al 0,32 mol /L, cido pcrico al 35 mmol /L y solucin
estndar de creatinina 177 mol /L (2 mg /L).

Se mezclaron volmenes iguales de la solucin de Acido picrico e Hidrxido de sodio, a esta

solucin se le llam solucin de trabajo. El espectrofotmetro se encendi y se ubic en longitud de
onda 505 nm, se calibro el cero de absorbancia con una celda vaca. En una cubeta se adicionaron 3
mL de la solucin de trabajo y 0,3 mL de la solucin estndar de creatinina, y se ubic en el
espectrofotmetro se midi su absorbancia a los 30 segundos (A1) y despus a los 2 minutos (A2), se
realiz este procedimiento con la solucin del estndar y luego dos veces con la muestra de orina 24
horas.

Muestra Absorbancia

30 segundos 2 minutos

Solucion trabajo junto con 0,374 0,387

solucin estndar

Solucin estndar 0,061 0,062

Muestra de orina 0,164 0,168

Duplicado 0.144 0.149

*A2-A1= A estndar

0.062 - 0.061 = 1 x 10-3

*A2-A1= A muestra

0,168 - 0,164 = 4 x 10-3

0.149 - 0.144 = 5 x 10-3
Concentracin de Creatinina en orina

* A muestra x 8.85= mmol/L

A estndar

4x10-3 x 8.85 =35,4 mmol /L

1x10-3

A muestra x 100= mg/dL

A estndar

4x10-3 x 100 =400 mg /dL

1x10-3
Duplicado

5 x 10-3 x 8.85 = 44,25 mmol /L

1x10-3

5 x 10-3 x 100 = 500 mg /dL

1x10-3
[1]

Promedio

35,4 + 44,25 = 39,82 mmol /L

2
400 + 500 = 450 mg /dL
2
Desviacin estndar

mmol /L
= (35,439,82)2+(44,2539,82)2 = 6,25
1
mg /dL
= (400450)2+(500450)2 = 70,71
1
Valores Normales

8.84 - 13,3 mmol/ 24 horas

1-1.5 g / 24 horas [1]

PREGUNTAS

1)Qu sucede en el organismo si el nivel de creatinina est por encima o por debajo de los niveles
normales?
Un nivel superior a lo normal puede deberse a:
*Obstruccin de las vas urinarias.
*Problemas renales, como insuficiencia o dao en el rin, infeccion o reduccin del flujo de sangre.
*Prdida de lquido corporal (deshidratacin).
*Problemas musculares, como descomposicin de las fibras musculares (rabdomilisis).
*Problemas durante el embarazo, como convulsiones (causadas por la eclampsia) o hipertensin
arterial causada por preeclampsia.

Un nivel inferior a lo normal puede deberse a:

*Afecciones que comprometen los msculos y nervios que llevan a una reduccin de la masa
muscular.
*Malnutricin.

DISCUSIN

La creatinina es un producto de desecho que fabrican los msculos a un ritmo constante como parte de
la actividad diaria normal. El torrente sanguneo lleva la creatinina hacia los riones, que se encargan
de extraerla de la sangre durante el proceso de filtracin y de eliminarla a travs de la orina. Debido a
que hubo errores en la recoleccin de la muestra no podemos discutir su significado clinico-
patologico, pero con valores tan altos de creatinina en orina lo mas seguro seria una insuficiencia
renal.[2]

La espectrofotometra es el mtodo de anlisis ptico ms usado en las investigaciones qumicas y

biolgicas. El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o
transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una
cantidad conocida de la misma sustancia, en esto radica su importancia en los anlisis clnicos, ya que
conocemos los valores normales de absorcin para compararlos con cada muestra y as hacer un
anlisis de resultados para llegar a un diagnstico.Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un
haz de luz monocromtica a travs de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por
dicha muestra. Esto nos permite realizar dos funciones : dar informacin sobre la naturaleza de la
sustancia en la muestra e indicar indirectamente que cantidad de la sustancia que nos interesa est
presente en la muestra.[3]

Las aplicaciones principales son:

*Determinar la cantidad de concentracin en una solucin de algn compuesto utilizando las frmulas
ya mencionadas.
*Para la determinacin de estructuras moleculares.
*La identificacin de unidades estructurales especficas ya que estas tienen distintos tipos de
absorbencia (grupos funcionales o isomeras).

La creatinina reacciona con el cido pcrico en medio alcalino formando un complejo de color rojo a
una longitud de onda entre 510- 520 nm. La creatinina no es la nica que reacciona, por eso es que
tiene baja especificidad. Existen interferentes positivos, entre ellos las protenas, glucosa,
acetoacetato, cido ascrbico y cido rico, e interferentes negativos, y de ellos el ms importante es
la bilirrubina. Frente a muestras con bilirrubinas elevadas, los valores de creatinina se ven
disminuidos porque la bilirrubina en el medio alcalino se oxida a biliverdina formando un compuesto
incoloro que disminuye el color de la reaccin. Otra interferencia negativa, pero que adquiere ms
relevancia en neonatologa es la hemoglobina de origen fetal, que a diferencia de la hemoglobina del
adulto, es resistente al lcali; de esta manera, hace que cambie lentamente el color a lo largo del curso
de la reaccin, alterando y disminuyendo la coloracin de la reaccin. Basado en la reaccin de Jaff,
en los mtodos colorimtricos, existen dos formas de efectuar la lectura: Punto final y cintico. El
punto final en sus dos variantes, con o sin desproteinizacin. La desproteinizacin es til para
eliminar la interferencia por protenas, utilizando como desproteinizante el cido tricloroactico
(TCA) al 10%, u otros como el cido fosfotngstico. El cintico es til para minimizar las
interferencias positivas. Al efectuar la lectura en autoanalizadores, se permiten mltiples puntos de
lectura. Las interferencias positivas se logran minimizar ya que poseen distinta velocidad de reaccin.
Hay algunos interferentes positivos de reaccin muy rpida, con los cuales en los primeros 10
segundos se considera que ya se produjo su reaccin, como, por ejemplo, el acetoacetato. La gran
mayora son productos de reaccin ms lenta, reaccionan entre 3 a 5 minutos, tales como las
protenas, glucosa, cido ascrbico y cido rico. [5]
Con esto se puede explicar el porqu de la necesidad de agregar NaOH a la solucin de cido pcrico,
sin el NaOH el cido pcrico no reaccionaria con la creatinina ya que no estara en medio alcalino. Y
se puede mencionar que el mtodo usado para la reaccin de Jaff en la prctica fue el del punto
cintico, ya que con este se intent eliminar las interferencias positivas al poseer distintas velocidades
de reaccin, se realiz en puntos de 30 segundos y 2 minutos respectivamente.

CONCLUSIN

Debido a una mala recoleccin de la orina, como no haber desechado la primera miccin del da o no
haber agregado la cantidad correcta de cido brico a la orina, hubo un error bastante alto, por tanto
los valores dieron muy distintos a los normales, as que podemos concluir que la prctica no fue
satisfactoria debido a la cantidad de error que se dio, esto es algo que no puede suceder en
condiciones normales, ya que se podra dar un dato errneo al paciente llevando a un mal
diagnstico, lo cual puede poner en riesgo la vida del paciente. Todo esto sumado al hecho de nuestra
inexperiencia manejando muestras biolgicas conllev a que los resultados fueran incorrectos.

BIBLIOGRAFA

[1] Gua de laboratorio: Qumica Analtica General, Universidad del Valle

[2] http://kidshealth.org/es/parents/test-creatinine-esp.html
[3] http://analisisbachillerato.blogspot.com.co/2011/12/la-espectrofotometria.html
[4] Douglas A. Skoog, Donald M. West, F. James Holler Fundamentos de qumica analtica
[5] Bioquimica Clinica. Creatinina en Sangre. http://www.scielo.org.ar/scielo.php?
script=sci_arttext&pid=S0325-29572011000200003. Revisado el 19 de mayo de 2015.