Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
AREQUIPA
Nombre:
LARICO MAMANI, ALEX ROBERTO
AREQUIPA- PERÚ
2021
PRACTICA 3: PROTEÍNAS TOTALES Y ALBUMINA
INTRODUCCIÓN
Las Proteínas son Compuestos Nitrogenados, estructurados según un patrón común en los que entran a formar
parte, además del Nitrógeno, el Carbono, el Oxígeno, el Hidrogeno y en ocasiones también el Azufre, el Fosforo y
el Yodo. Son constituyentes principales del Protoplasma de todas las Células, son de elevado Peso Molecular y
consisten en combinaciones de Aminoácidos unidos por Enlaces Peptídicos. Se encuentran comúnmente 20
Aminoácidos diferentes de la que dependen su Forma y Función Especificas. Entre sus funciones figuran: Catálisis
Enzimática, Transporte y Almacenamiento, Movimiento coordinado, generación de Impulsos Nerviosos, Control
de Crecimiento, Inmunidad y Soporte mecánico.
Las Proteínas Plasmáticas por su fácil accesibilidad de Análisis son importantes: las Inmunoglobulinas, la Albúmina,
el Complemento, los Factores de Coagulación y las Enzimas. Donde la Albúmina es la principal Proteína Plasmática,
responsable de gran parte de la Presión Osmótica Coloidal del Plasma, y que sirve como Proteína de Transporte
para Aniones Orgánicos Grandes (por ejemplo, Ácidos Grasos, Bilirrubina, ciertos Fármacos), y para algunas
Hormonas cuando sus Globulinas Especificas de unión están Saturadas.
OBJETIVOS
Para la determinación de niveles de Proteína Total se utilizan variados métodos, entre ellos la Densidad, el Índice
de Refracción, Absorbancia de la Muestra en el Rango Ultravioleta, y por la Técnica de Folin-Ciocalteau.
Originalmente se medía por el método de Kjeldahl, que actualmente se utiliza como método de referencia.
El Método utilizado se basa en la reacción de Biuret, en la cual los Enlaces Peptídicos reaccionan en Medio Alcalino
con Sulfato de Cobre para formar un Complejo Coloreado Azul-violeta. El Color formado se Mide
Colorimétricamente, siendo proporcional a la cantidad de Proteína presente en la Muestra
𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 + 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑜 𝑎𝑙𝑐𝑎𝑙𝑖𝑛𝑜 𝑐𝑜𝑛 𝑆𝑢𝑙𝑓𝑎𝑡𝑜 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑏𝑟𝑒 → 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑙𝑒𝑗𝑜 𝑐𝑜𝑙𝑜𝑟𝑒𝑎𝑑𝑜 (𝑎𝑧𝑢𝑙 𝑣𝑖𝑜𝑙𝑒𝑡𝑎)
REACTIVOS
• Sulfato de cobre II 15 m M
• Tartrato de sodio y potasio 70 mM
• Ioduro de potasio 10 mM
• Hidróxido de sodio 200 mM
• Preservantes y surfactantes c.s.
MUESTRAS
Utilizar de preferencia Suero Libre de Hemolisis. Si se utiliza Plasma, se obtienen Valores Elevados por la presencia
del Fibrinógeno.
EQUIPO REQUERIDO
Espectrofotómetro o Fotocolorímetro de Ffiltros capaz de medir Absorbancias a 540 nm (rango 520 - 560
-
nm)
- Baño Termorregulador
- Pipetas.
PROCESAMIENTO
TÉCNICA
Mezclar e incubar 10 Minutos a 37°C, o 20 Minutos a Temperatura Ambiente (20° a 25° C). Leer las Absorbancias
a 540 nm., llevando a cero el Espectrofotómetro con el Blanco de Reactivo. El Color resultante es estable por a lo
menos treinta Minutos.
RESULTADOS
CÁLCULOS
CONCENTRACIÓN CALIBRADOR
FACTOR =
ABS. CALIBRADOR
4.7
FACTOR = = 23.5
0.200
Para determinar la concentración de proteína total se utilizará la siguiente formula en cada muestra
𝑔
PROTEÍNA TOTAL ( ) = FACTOR X ABS. MUESTRA
𝑑𝐿
𝑔
M1: 𝑃𝑟𝑜𝑡𝑒í𝑛𝑎 𝑇𝑜𝑡𝑎𝑙 ( 𝑑𝐿 ) = 23.5 𝑥 0.280 = 6.9 𝑔/𝑑𝐿
6.0 a 8.0 g/ d l
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Observando los resultados obtenidos, donde M1 y M3 tienen valores de proteína total normales
indicando un estado un buen estado de salud.
En M2 tiene un resultado que indica una hipoproteinemia, siendo el único paciente con esta condición
pues su valor de proteína total es menor a 6.0 g/dl este paciente puede tener insuficiencia hepática,
malnutrición, anemia grave y otras afecciones que podrían explicar su condición.
Para M4 el nivel de proteína total es superior a 8.0 g/dl, se puede considerar que tiene una
hiperproteinemia, el paciente puede padecer de mieloma múltiple, endocarditis bacteriana o
hemoconcentraciones de diversos orígenes que puedan explicar su estado.
DETERMINACIÓN DE ALBÚMINA
La albúmina reacciona con el reactivo verde de bromocresol y se obtiene como producto un compuesto coloreado
que es proporcional a la cantidad de proteína presente en la muestra.
REACTIVOS
Conservar entre 4 y 25°C. y protegido de la luz; estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. La
absorbancia del reactivo contra Blanco de Agua a 620 nm., debe ser del orden de 0.150 D.O.
Preparación: El reactivo se provee listo para su uso.
Componentes del reactivo:
- Verde de bromocresosi 0.20 mM
- Buffer succinate pH 3.80 mM
- Preservantes y surfactantes c.s.
- Solución Standard
Albúmina Bovina, ver concentración en la etiqueta del frasco. (Conservar entre 2° y 8°C.)
MUESTRA.
La Muestra a utilizar puede ser tanto Suero como Plasma. La Albúmina es estable en Suero o Plasma una Semana
a Temperatura Ambiente y 1 Mes a 4o C.
EQUIPO REQUERIDO.
- Espectrofotómetro o Fotocolorímetro de Filtros capaz de medir Absorbancias a 620 nm. (rango 570 - 640 nm.)
- Baño Termorregulador
- Cronómetro y Pipetas.
PROCESAMIENTO
En tres tubos de ensayo marcados B (blanco) S (estándar) y D (desconocido), colocar:
BLANCO ESTÁNDAR DESCONOCIDO
MUESTRA (ml) --- 0.01
ESTÁNDAR (ml) --- 0.01 ---
REACTIVO DE TRABAJO (ml) 1.00 1.00 1.00
Mezclar e Incubar 10 minutos a 37°C, o 20 Minutos a Temperatura Ambiente (20° a 25° C). Leer las Absorbancias
a 540 nm., llevando a cero el Espectrofotómetro con el Blanco de Reactivo. El Color resultante es estable por a lo
menos treinta Minutos.
RESULTADOS
CÁLCULOS
CONCENTRACIÓN CALIBRADOR
FACTOR =
ABS. CALIBRADOR
𝑔
ALBÚMINA ( ) = FACTOR X ABS. MUESTRA
𝑑𝐿
M1:
𝑔
𝐴𝑙𝑏ú𝑚𝑖𝑛𝑎 ( ) = 8.9 𝑥 0.490 = 4.4 𝑔/𝑑𝐿
𝑑𝐿
ALBÚMINA (g/dL)
6
0
0.49 0.305 0.64 0.185
INTERPRETACIÓN
▪ Si el nivel de albumina en plasma está en el intervalo de 3.5 a 5.0 g/dl se considera normal.
▪ Si el nivel de albumina en plasma es inferior a 3.5 g/dl se considera Hipoalbuminemia.
▪ Si el nivel de albumina en plasma es superior a 5.0 g/dl se considera Hiperalbuminemia.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Según los resultados obtenidos en la M1 los valores de albumina en plasma son normales. En caso de la
M3 el nivel de albumina en plasma es superior a 5.0 g/dl por lo que se considera con Hiperalbuminemia
por lo que el paciente podría tener un caso de Deshidratación que produce el consecuente aumento en
el contenido proteico del plasma.
En la M2 y M4 el nivel de albumina en plasma es inferior a 3.5 g/dl por lo que se considera
Hipoalbuminemia por lo que el paciente podría tener un caso Sobrehidratación, perdida de proteínas,
disminución en la síntesis, o aumento en el catabolismo o degradación.
DETERMINACIÓN DE GLOBULINA
CÁLCULOS
Concentración de globulinas. Globulinas = PT-Alb
M1 Globulinas (g/dL) = 6.9 – 4.4 = 2.5 g/dL
M2 Globulinas (g/dL) = 3.4 – 2.7 = 0.7 g/dL
M3 Globulinas (g/dL) = 7.9 – 5.7 = 2.2 g/dL
M4 Globulinas (g/dL) = 11.3 – 1.6 = 9.7 g/dL
El nivel de globulina en la M1 es normal ya que está dentro de los rangos de referencia, en M2 y M3 el nivel de
globulina es menor a 2.6 g/dl encontrándose menor al rango de referencia. En M4 presenta un nivel mayor a 3.1
g/dl que excede el rango de referencia. Analizando los niveles bajos de globulinas pueden ser un signo de
enfermedad del hígado o de los riñones. Los niveles altos podrían indicar infección, enfermedad inflamatoria,
enfermedades del sistema inmunitario o ciertos tipos de cáncer, como mieloma múltiple. Sin embargo, las causas
de los resultados normales también pueden estar ligadas ciertos medicamentos, deshidratación u otros factores.
En el caso de los índices albumina/globulina, en M1 está dentro del rango referencial 1.2 - 2.2, teniendo un
resultado normal. En M2 y M3 ambas superan el límite del rango referencial, ambas tienen resultados mayores a
2.2, indicando un valor superior al normal. En M4 se observa un índice albumina/globulina muy inferior al rango
de referencia de 1.2.
CONCLUSIONES
Se puede concluir que se alcanzó el objetivo de determinar las concentraciones de proteínas totales y albuminas
en suero o plasma en las distintas muestras. Se alcanzó interpretar las diferentes variaciones que pueden
presentarse en el dosaje de proteínas totales y albuminas en suero o plasma. El análisis de proteína total mide la
cantidad total de dos tipos de proteínas en el organismo: la albúmina y la globulina. Se utiliza como parte del
control de salud de rutina y también puede resultar útil si padece síntomas inesperados, tales como pérdida de
peso, fatiga o síntomas de una enfermedad renal o hepática.
La sangre contiene dos clases de proteínas: la albúmina y la globulina. La albúmina evita la pérdida de líquido de
los vasos sanguíneos y la globulina desempeña un papel importante en el sistema inmunitario. Generalmente, la
relación a/g (albúmina y globulina) es un valor ligeramente superior a uno. Si la relación es demasiado baja o
demasiado alta, deben realizarse análisis complementarios para determinar la causa y el diagnóstico. Es usual, si
la relación es baja, sugiere una enfermedad autoinmunitaria, mieloma múltiple, enfermedad renal. Una relación
alta indica deficiencias genéticas o leucemia.
Para las muestras siguientes M1, M2, M3 y M4, se pudieron registrar valores bajos, normales y altos en cada
determinación de proteínas y albuminas, contrastando los resultados obtenidos con los valores referenciales.
RESUMEN DEL VIDEO
https://www.youtube.com/watch?v=lgVUE86hg6A
TUBOS DE ANALÍTICA
Son dispositivos de plástico o vidrio con o sin aditivos para el procesamiento de la sangre y su posterior
analizado. El color del tapón varía dependiendo de la finalidad de la muestra, están provistos de vacío
para evitar contaminaciones durante su llenado.
CÓDIGO DE COLOR
• Sin medio de cultivo compuesto por tubo y varilla moldeable. FRASCOS PARA RECOGIDA DE
MUESTRAS
CUESTIONARIO
Se conoce como síntesis de proteínas al proceso por el cual se componen nuevas proteínas a partir de
los veinte aminoácidos esenciales. En estre proceso, se transcribe el ADN en ARN. La síntesis de proteínas
se realiza en los ribosomas situados en el citoplasma celular. En el proceso de síntesis, los aminoácidos
son transportados por ARN de transferencia correspondiente para cada aminoácido hasta el ARN
mensajero donde se unen en la posición adecuada para formar las nuevas proteínas. Al finalizar la
síntesis de una proteína, se libera el ARN mensajero y puede volver a ser leido, incluso antes de que la
síntesis de una proteína termine, ya puede comenzar la siguiente.
Fases de las síntesis de proteínas
• La realización de la biosíntesis de las proteínas, se divide en las siguientes fases:
• Fase de activación de los aminoácidos.
Fase de traducción que comprende
• Inicio de la síntesis proteica.
• Elongación de la cadena polipeptídica.
• Finalización de la síntesis de proteínas.
• Asociación de cadenas polipeptídicas y, en algunos casos, grupos prostésicos para la constitución
de las proteínas.
Fase de activación de los aminoácidos
Mediante la enzima aminoacil-ARNt-sintetasa y de ATP, los aminoácidos pueden unirse ARN específico
de transferencia, dando lugar a un aminoacil-ARNt. En este proceso se libera AMP y fosfato y tras él, se
libera la enzima, que vuelve a actuar.
Inicio de la síntesis proteica
En esta primera etapa de síntesis de proteínas, el ARN se une a la subunidad menor de los ribosomas, a
los que se asocia el aminoacil-ARNt.
Elongación de la cadena polipeptídica
El complejo ribosomal tiene dos centros o puntos de unión. El centro P o centro peptidil y el centro A. El
radical amino del aminoácido inciado y el radical carboxilo anterior se unen mediante un enlace
peptídico y se cataliza esta unión mediante la enzima peptidil-transferasa.
Finalización de la síntesis de proteínas
En la finalización de la síntesis de proteínas, aparecen los llamados tripletes sin sentido, también
conocidos como codones stop. Estos tripletes son tres: UGA, UAG y UAA. No existe ARNt tal que su
anticodón sea complementario.
La mayor parte de los productos de la digestión de las proteínas se absorben en el intestino delgado. Al
intestino grueso sólo llegan pequeñas cantidades que serán catabolizadas por la flora intestinal. Es
importante señalar que, aunque en proporciones muy pequeñas, también es posible la absorción
intestinal de proteínas por mecanismos de pinocitosis. La importancia nutritiva es mínima, pero sí puede
tener interés al desencadenar una respuesta inmunológica.
Las proteínas de la dieta estimulan la secreción de las proenzimas pancreáticas. El tripsinógeno se divide
para formar tripsina y ésta se une a las proteínas de la dieta para comenzar la hidrólisis. Cuando ésta
termina, aumenta el contenido de tripsina libre en el intestino, lo que constituye una señal para cesar la
secreción de tripsinógeno. Posteriormente, las oligopeptidasas y aminopeptidasas del borde epitelial del
enterocito completan la digestión; cada una de estas enzimas tiene una acción específica.
7. PORQUE ES IMPORTANTE LA ALBÚMINA EN EL PLASMA
La albumina es una proteína que se encuentra en gran proporción en los linfocitos, siendo la principal
proteína de la sangre, la albúmina ayuda a mantener el líquido dentro del torrente sanguíneo sin que se
filtre a otros tejidos y funciona como un transportador de la sangre. También transporta varias sustancias
por el cuerpo, por ejemplo, hormonas, vitaminas y enzimas.
8. QUE ENFERMEDADES O TRASTORNOS SON CAUSALES DE HIPERPROTEINEMIA E HIPOPROTEINEMIA
Estas pueden ser algunas de las posibles causas de los niveles elevados de proteínas en la sangre o
hiperproteinemia:
• Hepatitis C
• VIH/sida
• Amiloidosis
• Hepatitis B
Estas pueden ser las causas de cantidades anormalmente pequeñas de proteína total en el plasma
sanguíneo circulante conocida como hiperproteinemia:
• Síndromes de malabsorción
• Pérdidas renales como
síndrome nefrótico
• Enfermedad celiaca
La hipoalbuminemia es un déficit de albúmina en la sangre que puede ser causada por las siguientes
enfermedades:
El mieloma múltiple es un cáncer de células plasmáticas. Las células plasmáticas normales se encuentran
en la médula ósea y son un componente importante del sistema inmunitario. En general, cuando las
células plasmáticas se vuelven cancerosas y crecen fuera de control, esto se denomina mieloma múltiple.
Las células plasmáticas producen una proteína anormal (anticuerpo) que se conoce por varios nombres
diferentes, entre los que se incluyen inmunoglobulina monoclonal, proteína monoclonal (proteína M),
pico M o paraproteína.