FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICAS Y BIOQUÍMICAS

CARRERA DE QUÍMICA FARMACÉUTICA

CATEDRA DE ANATOMIA Y FISIOLOGÍA – GESTIÓN 2023
LABORATORIO PRESENCIAL NUMERO VEINTISIETE
DOCENTE: Dr. Bernardo Nicolás TORRICO ARZADY, Esp., M.Sc.

APARATO URINARIO
EXAMEN FÍSICO, QUÍMICO Y ANÁLISIS DE SEDIMENTO DE LA ORINA
MODALIDAD: PRÁCTICA PRESENCIAL

OBJETIVO GENERAL:

Realizar un examen general de orina e interpretar aspectos normales y alterados de la misma.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

1. Identificar las características físicas y químicas de la orina de un sujeto normal.

2. Explicar las variaciones de los caracteres físicos, químicos y sedimento de la orina, de sujetos
normales en comparación con muestras de orinas patológicas más frecuentes (que cursan con
proteinuria, glucosuria, hematuria, coluria o infección urinaria).

COMPETENCIAS A SER LOGRADAS:

1. El estudiante a la conclusión de la práctica será capaz de discriminar una orina normal y

patológica.

2. Identificar a través de los valores físicos y químicos, orinas normales y alteradas.

3. Realizar e interpretar el estudio de los sedimentos de muestras de orina normales y

patológicas.

MATERIALES:
 Dos vasos de precipitado de 500 ml
 Dos probetas de 100 ml.
 Una probeta de 50 ml.
 Centrifugadora
 Microscopio
 10 tubos de ensayo de 20 ml.
 Dos tubos de ensayo pequeños de 5 ml.
 Urodensímetro
 Tiras reactivas de análisis múltiple de orina

MUESTRAS:

Los estudiantes deberán traer las siguientes muestras por subgrupo:

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  Una muestra de orina, de un sujeto normal en condiciones basales (primera orina de la
mañana).
 Una muestra de orina patológica (que cursan con proteinuria, glucosuria, hematuria,
ictericia o infección urinaria)*.

*Las muestras patológicas pueden ser obtenidas en el laboratorio del Hospital de Clínicas u
otros Centros Hospitalarios.

*Las muestras normales y patológicas deben ser recolectadas en recipientes para toma de
muestra de orina (frascos con boca ancha y tapa de rosca).

PROCEDIMIENTO

EXAMEN FÍSICO

1. Obtenidas todas las muestras, las mismas serán sometidas a identificar las características
físicas de la orina (volumen, color, olor, etc.)

2. Dejar reposar toda la primera orina de la mañana, para obtener el sedimento (o centrifugar
parte de la muestra). Opcionalmente se podrá observar sedimento en las muestras que presenten
sedimento.

3. Espuma, colocar 5 ml de cada muestra en un tubo de ensayo grande respectivo, ocluyendo el

orificio, agitar con energía por 5 veces, observar la magnitud, color de la espuma, registrar el
tiempo en el que desaparece.

4. Densidad, colocar en una probeta pequeña, una muestra que llegue hasta 2 cm. del borde libre
de la misma, retirando la espuma que se forme; introducir el urodensímetro tomándolo entre los
dedos índice y pulgar, haciéndolo girar soltarlo en la orina. La densidad se la obtiene haciendo
coincidir la escala del urodensímetro con el menisco de la superficie de la orina, durante las
últimas vueltas del urodensímetro en la orina. Repetir esta operación, luego del secado de la
probeta y el urodensímetro, con cada muestra.

EXAMEN QUÍMICO

La orina sobrelleva muchos cambios durante periodos de enfermedad o disfunción corporal

antes que la composición de la sangre sea alterada en una extensión significativa. El Urianálisis
es un procedimiento útil indicador de Salud o Enfermedad, y por lo tanto, es una parte de
despistaje rutinario para la salud. Las tiras reactivas de Urianálisis (orina) pueden ser usadas para
una evaluación general de la salud, y como ayuda en el diagnóstico y monitoreo de enfermedades
metabólicas o sistémicas que afectan la función renal, desordenes del sistema endocrino y
enfermedades o desordenes del tracto urinario.

2
PROCEDIMIENTO
Obtención y Preparación de la Muestra:
La muestra debe ser colectada en un recipiente limpio y seco y examinado lo antes posible. No
centrifugue. No se recomienda utilizar preservativos para orina. Si la prueba no se puede hacer
en el transcurso de una hora después de haber sido coleccionada, refrigere la muestra
inmediatamente y permita que regrese a temperatura ambiente antes de examinarla.

El almacenamiento prolongado de orina a temperatura ambiente puede resultar en una

proliferación microbial con resultados de cambios en el pH. Un desvió hacia la alcalinidad puede
resultar en un falso positivo con el parámetro de lectura de la proteína. La orina conteniendo
glucosa puede decrecer en su pH cuando el organismo metabolice la glucosa.

Realización del Urianálisis:

Permita que, la tira, la muestra, y/o controles se encuentren a temperatura ambiente (15-30oC)
antes de realizar la prueba.

1. Retire la tira del tubo cerrado y utilícela lo antes posible. De inmediato cierre el tubo
ajustadamente una vez que haya retirado el número de tiras necesarias, inmersa por completo el
área reactiva de la tira en el recipiente conteniendo la orina fresca bien mezclada e
inmediatamente sáquela del recipiente para evitar que los reactivos se disuelvan.

2. Al remover la tira de la orina, corra el filo de la tira contra el borde del recipiente de la orina
para desechar el exceso de orina. Sostenga la tira en una posición horizontal y contacte el filo de
la tira con un material absorbente (ej. Toalla de papel) para evitar que los químicos se mezclen
con reactivos de áreas adyacentes y/o las manos con la orina.

3. Compare las áreas reactivas con la correspondiente tabla de colores que se encuentra en el
rotulado del tubo en el tiempo especificado. Sostenga la tira cerca de la tabla de color y compare
cuidadosamente. Reporte los resultados.

Los resultados se pueden leer hasta 2 minutos después del tiempo especificado.

TIRAS REACTIVAS PARA URIANÁLISIS

Las tiras reactivas de urianálisis (orina) son tiras de plástico en las cuales se han fijado
parámetros en áreas separadas de reactivos. El examen sirve para la detección cualitativa y
semicuantitativa de uno o más de los siguientes analitos en orina:

REACTIVO TIEMPO COMPOSICIÓN DESCRIPCIÓN

DE
LECTURA
Acido Ascórbico 30 Segundos 2,6 Diclorofenolindofenol, Detecta ácido ascórbico tan
(ASC) tampón e ingredientes no bajo como 5-10 mg/dL (0,28-
activos. 0,56 mmol/L).
Glucosa (GLU) 30 Segundos Glucosa oxidasa, peroxidasa, Detecta glucosa tan bajo como
ioduro potasio, tampón e 50-100 mg/dL (2,5-5 mmol/L).
ingredientes no activos.

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Bilirrubina (BIL) 30 Segundos Sal de diazonio
2,4-dicloroanilina, tampón e
ingredientes no activos.
Cuerpos Cetónicos 40 Segundos Sodio nitroprusiano, tampón.
(KET)
Gravedad Específica 45 Segundos Indicador de azul de
(SG) bromtimol, tampón e
ingredientes no-activos. Poli
(anhídrido metil vinil
ester/maleico anhídrido),
hidróxido sódico.
Sangre (BLO), 60 Segundos 3,3’,5,5’-Tetrametilbenzidina
Hemoglobina (TMB); disopropilbenzeno
dihidroperóxido.
pH 60 Segundos Rojo metilo, sal sódica, azul
de bromtimol, tampón e
ingredientes no-activos.
Proteínas (PRO) 60 Segundos Azul de tetrabromofenol,
tampón e ingredientes no-
activos.
Urobilinógeno 60 Segundos p-dietilaminobenzaldehida,
(URO) tampón e ingredientes no-
activos.
Nitritos (NIT) 60 Segundos Ácido p-arsanílico; N-(1-
naftil) etilenediamina,
tampón e ingredientes no-
activos.
Leucocitos (LEU) 120 Ácido pirrol amino ester
Segundos derivado, sal de diazonio,
tampón e ingredientes no-
activos.
Detecta bilirrubina desde 0,4-
1,0 mg/dL (6,8 mg/dL (6,8-17
umol/L)
Detecta ácido acetoacético
desde 2,5-5 mg/dL (0,25-0,5
mmol/L).
Determina la gravedad
Especifica entre 1,000-1,030.
Los resultados correlativos con
los valores obtenidos por el
método del index refractario
entre +/- 0,005.
Detecta hemoglobina libre
desde 0,018-0,060 mg/dL o 5-
10 Ery/uL en muestras de orina
con, contenido de Ácido
Ascórbico de < 50 mg/dL.
Permite la diferenciación
cuantitativa de valores de pH
entre el Rango de 5-9.
Detecta albúmina desde 7,5-15
mg/dL (0,075-0,15 g/L).
Detecta el Urobilinógeno desde
0,2-1,0 mg/dL (3,5-17 umol/L).
Detecta el nitrilo de sodio
desde 0,05-0,1 mg/dL en orina
con una gravedad Específica
baja y con menos de 30 mg/dL
de Ácido Ascórbico.
Detecta leucocitos tan bajo
como 9-15 glóbulos blancos
Leu/uL en orinas clínicas.

SEDIMENTOS URINARIOS:

Principio.- La orina contiene elementos microscópicos en suspensión (células, cristales, etc.)

Estos elementos se recogen por centrifugación y para examinarlos se coloca una gota de
sedimento formado entre un portaobjetos y un cubreobjetos.

Como todos estos elementos en suspensión se sedimentan en la orina, si ésta se deja en reposo
durante algunas horas, se les llama sedimentos urinarios.

Para la obtención de los sedimentos urinarios se deben tener en cuenta los siguientes pasos:

Volumen de orina.- 10 – 12 ml de muestra bien homogenizada y atemperada.

Tubos de centrífuga.- de un solo uso y con capacidad para algo más de 10 – 12 ml., de plástico

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inerte y transparente, con fondo cónico o cóncavo y preferiblemente graduados, para facilitar un
volumen fijo en la decantación de la muestra. En la práctica se utilizan de preferencia tubos con
tapón, que se identifican con códigos de barras, y en los que se debe comprobar el aspecto y el
volumen de la muestra antes de su análisis.

Centrifugación.- en general se recomienda un tiempo de centrifugado de unos 3 a 5 minutos, a

una velocidad de 1.500 – 2.000 revoluciones por minuto (rpm). En realidad se recomienda unja
fuerza centrífuga relativa (FCR) de 400g (veces la gravedad). La centrífuga del laboratorio
permite seleccionar ambos parámetros (rpm y FCR) independientemente. Utilizar más velocidad
o mayor tiempo de centrifugado conduce al deterioro de la muestra y la pérdida de elementos
formes.

Concentración del sedimento.- 1/10 o 1/20, lo que corresponde a 1 ml, o 0,5 ml si se ha partido
de un volumen inicial de 10 ml. Se debe dejar un volumen fijo de sedimento y decantar el
sobrenadante por aspiración, con pipetas de un solo uso. El sedimento que se obtiene se debe
suspender homogenizándolo bien, antes de montarlo para su posterior visualización en el
microscopio.

Volumen de sedimento que se va a examinar al microscopio.- se utiliza para el examen del

sedimento, portaobjetos y cubreobjetos y se emplea una gota se sedimento (20 µl).

Examen microscópico del sedimento.- se debe realizar la visualización al microscopio primero

a baja resolución, 10x (aumentos), para comprobar la distribución homogénea de la muestra,
tener una idea de los elementos presentes y contar los elementos escasos, como cilindros o
células de vías altas. Después se selecciona el objetivo fuerte seco 40x, donde se cuentan
hematíes, leucocitos, cristales, células de vías bajas, etc. Es importante recordar que las
preparaciones en fresco se ven al microscopio con el condensador bajo.

Elementos formes que se identifican en el sedimento:

-Hematíes y su morfología: valoración de dismorfias.

-Leucocitos: diferenciando polimorfo nucleares, neutrófilos y eosinófilos, linfocitos y
macrófagos.
-Células epiteliales: de epitelio renal, de transición, escamosas y otras, como células intestinales,
de espermiogénesis y atípicas.
-Cilindros: hialinos, eritrocitarios, leucocitarios, epiteliales, granulosos, lipídicos, céreos,
bacterianos, cristalinos, de hemoglobina, mioglobina y bilirrubina.
-Microorganismos: bacterias, levaduras, parásitos como Trichomonas, huevos de algunas
especies y otros agentes infecciosos.
-Espermatozoides.
-Cristales: ácido úrico y uratos, oxalato cálcico monohidratado y dihidratado, fosfato cálcico y
otros fosfatos, cistina, leucina, tirosina, xantina, 2,8 dihidroxiadenina, fármacos (indavir,
sulfamidas, etc.
-Artefactos: pelos, fibras naturales y sintéticas, filamentos de mucina, etc.

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RESULTADOS

1. Todos los datos deben ser registrados en la tabla siguiente. Comparar, analizar y discutir los
resultados de las muestras de cada una de las pruebas realizadas.

2. Los resultados obtenidos, deben correlacionarse con la teoría y establecer los mecanismos por
los que se producen.

TABLA DE RESULTADOS

EXAMEN FISICO EXAMEN QUÍMICO SEDIMENTO

Volumen Acido Leucocitos
Ascórbico
(ASC)
Densidad Glucosa Eritrocitos
(GLU)
Color Bilirrubina Levaduras
(BIL)
Olor Cuerpos Trichomonas
Cetónicos
(KET)
Aspecto Gravedad Bacterias
Específica
(SG)
Espuma Sangre Espermatozoides
(BLO),
Hemoglobina
pH Células
Epiteliales
Proteínas Cilindros
(PRO)
Urobilinógeno Huevos y Larvas
(URO) de Parásitos
Nitritos (NIT) Cristales
Frecuentes:
Leucocitos Oxalato Cálcico
(LEU)
Acido Úrico
Fosfatos Triples
Uratos
Cristales menos
Frecuentes:
Fosfato Cálcico
Carbonato
Cálcico
Sulfato Cálcico

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 CONCLUSIONES:

Analice y comente los resultados obtenidos en la presente práctica de laboratorio.

BIBLIOGRAFIA: Anotar la bibliografía consultada en formato APA.