Confirmación bioquímica de Salmonella spp

Partiendo del crecimiento obtenido en Agar nutritivo XDL y Hecktoen

Siembra en TSI: Se utilizo en el Agar tres azucares de hierro sembrando por picadura e incubando
a 37°C por 24-48 horas, la reacción típica de salmonella en este medio es producción o no de H 2 S,
pico alcalino y fondo acido.

Siembra en Agar LIA: Emplear el Agar Lisina Hierro, sembrando por picadura e incubando a 37°C
por 24 a 48horas. La reacción típica de Salmonella es fondo alcalino (Purpura) con o sin producción
de H2 S.

Siembra en caldo/Agar Urea: Tomar una Asada a partir de las cepas crecida en Agar selectivo
empleando el caldo Urea – rojo de fenol. Incubación a 37°C por 18 – 24 horas, transcurrido el
tiempo de incubación los tubos que no manifiestan un cambio de color se consideran presuntos de
Salmonella ya que esta bacteria es urea negativa.

Confirmación bioquímica para Listeria spp

Partiendo del crecimiento obtenido en Agar nutritivo Palcam y Oxford

Test de Camp: Tomar una azada a partir de las cepas crecidas, utiliza cultivos de 24 h a 37°C para
Listeria Monocytogena, empleando como medio de cultivo Agar Base Columbia al 5% de glóbulos
rojos de oveja, transcurrido el tiempo se observa una Beta-Hemolisis, se observa una zona clara
que confirma la presencia de listeria spp.
Movilidad: Utilizando agar GI que es un medio solido o semisólido en los cuales incubamos por
punción, incubando a 25ºC durante siete días, y haciendo lecturas diarias del crecimiento se
observa una zona difusa y opaca en forma de sombrilla, típico de la mayoría de las especies de
Listeria.
Fermentación de carbohidratos: Se emplearán soluciones de D-manitol, ramnosa, y xilosa,
esterilizadas por filtración y añadidas hasta una concentración del 1%, al Caldo Púrpura.Tras la
inoculación de las cepas e incubación a 37ºC, se hará la lectura a las 24 y a las 48 horas. Las cepas
capaces de producir ácido a partir del carbohidrato respectivo virarán el color del indicador hacia
amarillo. Las distintas especies de Listeria, dan resultados variados frente a estas pruebas.
Prueba del rojo de metilo y Voges-Proskauer: Incubando a 37ºC por 24-48 horas. La mayoría de
las cepas de Listeria son rojo de metilo y VogesProskauer positivas. Producción de β-hemólisis: Se
estudiará la actividad β-hemolítica en placas de Agar Base Columbia suplementado con sangre de
oveja al 5%, incubando a 37°C por 24-48 horas. Se considerarán positivas aquellas cepas que
presenten un halo de aclaramiento alrededor de la zona de siembra, como resultado de la lisis
total de los eritrocitos presentes en el medio. Se obtienen reacciones variadas para las especies de
Listeria.
Confirmaciones bioquímicas para Vibrio spp
 Tomar de cada uno de los medios selectivos tres colonias típicas de Vibrio spp y sembrar
por punción y estría sobre la superficie de tubos que con tengan agarTSI,LIA, SIM y por
suspensión los Caldos RM-VP.
  Incubar a35°C+/-2°Cpor 24 h.
 Realizarla debida lectura e interpretación de las pruebas
Medio TSI: Se observo que no hubo fermentación de Sacarosa

Medio LIA: Se observo que el indicador es purpura de bromocresol y no producen acido sulfidrico
entonces no hay una coloracion negra.

Medio SIM: No se hidrolizo el triptófano, no hay producción de indol, ni motilidad, ni forma de

sombrilla alrededor por lo tanto no hay aparición de un anillo rojo por lo tanto la prueba es
negativa.

Medio RM-VP: