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CRECIMIENTO MICROBIANO Y

CÁLCULO DE RENDIMIENTOS
RENDIMIENTOS DE CRECIMIENTO

 Crecimiento microbiano
✓ Un microorg. en un medio de cultivo adecuado, produce nuevos
microorgs. usando los nutrientes del medio →  número de
células

✓ El crecimiento se detiene cuando:

➢ Se agota algún nutriente del medio (sustrato limitante)

➢ Se acumulan productos microbianos que lo inhiben

✓ La cantidad final de microorg. (biomasa) depende de la concen-


tración y composición del medio de cultivo → estequiometría
del crecimiento (necesario conocer rendimientos)
Un rendimiento (Y) se define como la relación entre el
PRODUCTO obtenido y el SUSTRATO consumido
(fuente de C)

➢ Rendimiento celular:

ΔX Biomasa producida [g BM]


YX/S = =
ΔS Sustrato consumido [g S]

X: biomasa S: sustrato

➢ Si además de biomasa (microorganismos) se forma un


producto, el rendimiento de producto está dado por:

YP/S = ΔP = Producto formado [g]


ΔS Sustrato consumido [g]
Productos
YP/S
Metabolitos +
50% CO2 + H2O + …

Sustrato
(fuente de C)

50% Biomasa
+ N + O2 +
CnHxOyNz
micronutrientes + YX/S
factores de
crecimiento

~50% del ~10% del


sustrato sustrato
carbonado carbonado
Aerobio Anaerobio
✓ El rendimiento celular (YX/S) solo se usa para la fuente
de carbono y no para las fuentes de otros elementos.

➢ En el metabolismo común, solo la fuente de carbono es


utilizada para la producción de biomasa + metabolitos

YX/S Biomasa
50% CnHxOyNz

Fuente
de C
Producto

50% Metabsolitos +
CO2 + H2O + …
YP/S

➢ En general, el resto de los elementos solamente se utiliza para


producción de biomasa

~100
Fuente Biomasa
%
de N CnH xO yN z
CONSIDERACIONES BÁSICAS

 Composición elemental (C, N, H, O) de la 50


C
biomasa microbiana → punto de partida
para los cálculos estequiométricos N 10
P 5
Por cada 100 g de biomasa seca (%) S 3
H 8
O 20

ΔX X prod
 Rendimiento celular (biomasa) YX/S = =
ΔS S cons

YX/S Aerobio → 0.5 ? 50% del S consumido se convierte en BM


YX/S Anaerobio → 0.1 10% del S consumido se convierte en BM

 Otro elemento fundamental → análisis dimensional


EJEMPLO 1

Se desea producir 800 Kg de biomasa. Considerando que se


consume todo el sustrato carbonado y que el rendimiento
celular (YX/S) es de 0.47 [kg X/kg S], estime la cantidad de
glucosa que se debe adicionar al medio

1. Datos necesarios

YX/S = 0.47 X prod. (ΔX) = 800 kg Sustrato cons. (ΔS) = ?

2. ¿Cuánta glucosa necesitamos? (PM = 180 g/mol)

BM producida (ΔX) kg X 800 kg X


YX/S = 0.47 =
S consumido (ΔS) kg S ΔS (kg S)

800 kg BM
ΔS = S cons (ΔS) = 1702.1 kg S
0.47 kg BM/kg S
EJEMPLO 2

Se desea producir biomasa en condiciones aerobias utilizando


un medio con 30 g/L de glucosa. Calcule: (a) ¿Cuánta biomasa
se produce si se consume toda la glucosa?, (b) ¿Cuánto C
aporta la glucosa consumida?, (c) ¿Cuánto N, P y S debe
adicionarse?, (d) ¿Cuál es la relación C/N del medio?

ΔX BM prod
1. Datos necesarios YX/S = =
ΔS S cons
➢ Rendimientos:
◼ YX/S = 0.5 g X/g S, donde S → glucosa (PM = 180 g/mol)
◼ C = 50%; N = 10%; P = 5%

2. Calculamos la BM que se produce a partir de 30 g de Glucosa (a):

ΔX gS gX
YX/S = ΔX = ΔS * Y X/S = (30 – 0) * 0.5
ΔS L gS

ΔX = 15 gX/ L
b) ¿Cuánto C aporta la glucosa consumida?

Glucosa → C6H12O6 (PM = 180 g/mol)


6 moles de C (PM = 12 g/mol)
Entonces, en 180 g de glucosa (1 mol), 72 g son de C

Tenemos 30 g/L de glucosa → cuantos g de C?

30 g Glu 72 g C
C (g) = = 12 g/L de C
1L 180 g Glu
c) Calcular qué cantidad de N, P y S debe adicionarse para
producir 15 g/L de biomasa

C 50%
15 g X 10 g N N 10%
N (g) = = 1.5 g/L de N
1L 100 g X P 5%
S 3%

15 g X 5gP
P (g) = = 0.75 g/L de P
1L 100 g X

15 g X 3gS
S (g) = = 0.45 g/L de S
1L 100 g X
d) ¿Cuál es la relación C/N del medio?

30 g Glu 72 g C
C (g) = = 12 g/L de C
1L 180 g Glu

15 g X 10 g N
N (g) = = 1.5 g/L de N
1L 100 g X

Entonces, para calcular la relación C/N se divide el la


cantidad de C entre la cantidad de N en el medio:

12 g C
C/N = = 8 gC/gN
1.5 g N
EJEMPLO 2A

A partir de los requerimientos de N, S y P calculados, calcula la


cantidad de fuente de cada elemento que se requiere

1. Fuentes de cada elemento:


N → (NH4)2SO4 (PM = 132 g/mol)
◼ Cont. de N = 14 (x 2) g/mol

1.5 g N 132 g (NH4)2SO4


(NH4)2SO4 (g) = = 7.1 g/L de (NH4)2SO4
1L 28 g N

S → (NH4)2SO4 (PM = 132 g/mol)


◼ Cont. de S = 32 g/mol

0.45 g S 132 g (NH4)2SO4


(NH4)2SO4 (g) = = 1.9 g/L de (NH4)2SO4
1L 32 g S
P → KH2PO4 (PM = 136 g/mol)
◼ Cont. de P = 31 g/mol

0.75 g P 136 g KH2PO4


KH2PO4 (g) = = 3.3 g/L de KH 2PO 4
1L 31 g P

2. Unavez que calculamos la cantidad de BM producida, podemos


determinar la cantidad de la fuente de cada elemento en un solo
paso (p.ej.):
BM Contenido de
producida P en BM P en KH2PO4

15 g BM 5gP 136 g KH2PO4


KH2PO4 (g) = = 3.3 g/L de KH2PO4
1L 100 g BM 31 g P

0.75 g de P
EJEMPLO 3
Se cultivó Candida utilis en un medio con 15.2 g/L de glucosa (S0).
La concentración inicial de células (X0) fue de 0.5 g/L. Después de
9.5 h, se consumió toda la glucosa (Sf = 0), se produjeron 0.18
mol/L de CO2 y la BM alcanzó un valor de 6.1 g/L (Xf). Calcule:
(a) La biomasa producida
(b) El rendimiento celular del cultivo (YX/S)
(c) El rendimiento para la producción de CO2 (YCO2/S)
(d) La cantidad de (NH4)2SO4 para producir la BM calculada en (a)
(e) La relación C/N del medio

1. Datos necesarios para (a)-(c):

S0 = 15.2 g/L X0 = 0.53 g/L


ΔX Xf - X0
Sf = 0 g/L Xf = 6.07 g/L YX/S = =
ΔS S0 - S f
CO2 prod = 0.179 mol/L (PM = 44 g/mol)
ΔX = Xf - X0
(a) Biomasa producida → ???
ΔX = 6.07 [g/L] - 0.53 [g/L] ΔX = 5.54 g X/L

ΔX Xf - X0
(b) Y X/S YX/S = =
ΔS S0 - S f

Xf - X0 5.54 [gX/L]
YX/S = = YX/S = 0.36 g X/g S
S0 - S f 15.2 - 0 [gS/L]
El 36% del sustrato consumido (DS)
se usó para producir BM

(c) YCO2/S (YP/S): ΔP Pf - P 0


YP/S = =
ΔS S0 - S f
Primero hay que convertir el CO2 de [mol] a [g]:
0.179 mol 44 g
CO2 (g) = = 7.88 g CO2/L
1L 1 mol
CO2(f) - CO2(0) 7.88 - 0 [gCO2/L]
YCO2/S = = = 0.52 gCO2/gS
S0 - S f 15.2 - 0 [gS/L]

El 52% del sustrato consumido (ΔS)


se uso para CO2 (producto)

(d) (NH4)2SO4 necesario para producir la BMproducida?

Datos necesarios para resolver (d)

Fuente de N y S: (NH4)2SO4 → PM = 132 g/mol


◼ N = 28 g/mol
◼ S = 32 g/mol
BM producida (ΔX) = 5.54 g
Composición de la BM (%): C, 50; N, 10; P, 5; S, 3
BM Contenido de
producida N en BM N en (NH4)2SO4

5.54 g X 10 g N 132 g (NH4)2SO4


(NH4)2SO4 (g) = = 2.61 g/L
1L 100 g X 28 g N
(NH4)2SO4
0.55 g de N para N

(NH4)2SO4
para S

5.54 g X 3gS 132 g (NH4)2SO4


(NH4)2SO4 (g) = = 0.68 g/L
100 g X 32 g S
(e) Relación C/N

Necesitamos saber cuánto C y cuánto N contienen las fuentes


de C y N adicionadas
En 132 g de (NH4)2SO4 (1 mol) hay 28 g de N (2 moles)

2.61 g (NH4)2SO4 28 g N
gN= = 0.55 g N/L
1L 132 g (NH4)2SO4

En 180 g de C6H12O6 (1 mol) hay 72 g de C (6 moles)

15.2 g C6H12O6 72 g C
gC= = 6.08 g C/L
1L 180 g C6H12O6

Entonces la relación C/N del medio es:


6.08 g C 1L
C/N = = 11.1 gC/gN
1L 0.55 g N

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