TECNOLÓGICO NACIONAL DE MÉXICO

INSTITUTO TECNOLÓGICO DE LA PAZ.

Problemas
SERIE 2

DEPARTAMENTO DE INGENIERÍAS
INGENIERÍA BIOQUÍMICA
Ingenería de Biorreactores
7° “J”

Sánchez Angulo Leonardo 17310325

Villavicencio Ceseña Iridian J. C16310679
Villavicencio Zuñiga Sofia 17310381

Profesor. Jorge Humberto Silva Ojeda

La Paz, B.C.S. A 26 de octubre del 2020.

EJERCICIOS
EN CLASE
Ejemplo 1

Pseudomonas putida sigue una cinética tipo Monod cuando se hace crecer sobre lactosa, su
velocidad especifica de crecimiento máxima es de 0.80 /h y su K s es de 0.24 g/L. Si es cultivada
en un quimiostato bajo condiciones aerobias y la fuente de carbono en la alimentación tiene una
concentración de So = 1 g/L y Yx/s = 0.55

a) ¿Cuál es la concentración de biomasa en el efluente cuando se opera a D = 0 y a D=

47/h?

Utilizando las ecuaciones de balance de materia para sustrato, y suponiendo que se trata de un
estado estacionario con una cinética de Monod, se utiliza la siguiente ecuación:

M
KsD
X = Yx/s (Si − )
μmáx − D

Y sustituyendo los valores proporcionados por el problema

g
0.24 l ∗ 0
X = 0.55 (1 g/L − ) = 𝟎. 𝟓𝟓 𝐠/𝐋
0.80
− 0
h
g
0.24 l ∗ 0.47 /h
X = 0.55 (1 g/L − ) = 𝟎. 𝟑𝟔𝟐 𝐠/𝐋
0.80 0.47
−
h h

b) Determine la velocidad de dilución a la cuál sucede el wash out.

Utilizando ecuaciones del balance para biomasa en la condición de wash out y en estado
estacionario, se establece que la concentración del sustrato a la salida es igual a la concentración
del sustrato a la entrada. También se considera una cinética de Monod:
μmáx S
D=
Ks + S

0.80 g
∗1
D= h L = 𝟎. 𝟔𝟒𝟓𝟐
g g 𝐡
0.24 L + 1 L
Ejemplo 2

Se estudió la producción de ácido acético y ácido butírico por Clostridium acetobutylicum

utilizando glucosa como fuente de carbono y energía en cultivos de tipo continuo. Al trabajar a
diferentes velocidades de dilución (D), se obtuvieron los siguientes resultados para el
rendimiento de biomasa en función del sustrato (Y x/s).

D (h -1) Yx/s (g peso seco / mol glucosa)

0.14 40
0.236 42.5
0.332 43.9
0.426 44.8
0.475 45
0.6 46
0.72 46.5

a) Estimar el coeficiente de mantenimiento (ms) y el rendimiento máximo.

Considerando que un gráfico de los inversos del rendimiento aparente y los inversos del factor de
dilución generan una línea recta con pendiente ms, se utilizan los datos de la tabla proporcionados
para graficar:

1 1 ms kd
app = M + → ms = M
Yx/s Yx/s D Yx/s

De modo que el valor de la pendiente es el valor del mantenimiento

ms = 0.0006 g glucosa /L*h

 M 1
Yx/s = = 𝟒𝟕. 𝟖𝟒𝟔𝟗 𝐠 𝐩𝐞𝐬𝐨 𝐬𝐞𝐜𝐨 /𝐦𝐨𝐥 𝐠𝐥𝐮𝐜𝐨𝐬𝐚
0.0209

Ejemplo 4

El ácido cítrico se produce vía fermentativa usando melazas de caña (conteniendo 48% m/m de
sacarosa), la fermentación es en cultivo por lotes y se utiliza A. niger. La capacidad del
fermentador es de 100 m3. El tiempo promedio de fermentación es de 148 h y el rendimiento de
ácido cítrico es de 80%. Calcule:

a) Cantidad de melazas requerida para la fermentación suponiendo que la concentración

inicial de azúcar es de 225 g/L

Se necesitan unificar las unidades utilizando kg/m3 de modo que

g kg
225 = 225 3
L m
Debido a que solo el 48% de melaza es sacarosa

100 kg melaza → 48 kg sacarosa

kg
x → 225 3 sacarosa
m
x = 468.75 kg melaza

Pero esta cantidad de melaza es por m3, de modo que se necesita calcular el total del volumen

468.75kg melaza → 1 m3
x → 100m3
x = 𝟒𝟔, 𝟖𝟕𝟓 𝐤𝐠 𝐦𝐞𝐥𝐚𝐳𝐚/𝟏𝟎𝟎 𝐦𝟑

b) Productividad del fermentador asumiendo un tiempo muerto de 12 horas

Se necesita saber la cantidad de sacarosa que se utiliza para la producción de ácido cítrico
kg kg
225 3
(0.8) = 180 3
m m
180 kg → m3
x → 100m3
kg
x = 18,000 de ácido cítrico en el fermentador
m3
La productividad se obtiene dividiendo entre el tiempo total de fermentación

kg
18,000
3 𝐤𝐠
Productividad = m = 𝟏𝟏𝟐. 𝟓 𝟑
(148 + 12 )h 𝐦 𝐡
c) Porcentaje de utilización de azúcar

Balance

Sacarosa  fructosa + glucosa  2 ácido cítrico

Peso molecular de sacarosa = 342 g/ mol

Peso molecular de ácido cítrico = 192 g/ mol  2 mol  384 g/ mol

Para determinar el porcentaje utilizado en el fermentador se utiliza una regla de 3

kg kg
384 de ác. cítrico → 342 de sacarosa
kmol kmol
18,000 kg de ác. cítrico → x
x = 16,031.25 kg de sacarosa

Sacarosa inicial en el fermentador

225 kg de sacarosa (100 m3) = 22,500 kg de sacarosa total

Porcentaje

22,500 kg de sacarosa inicial → 100%

16,031.25 kg de sacarosa utilizada → x
x = 𝟕𝟏. 𝟐𝟓%
Ejercicio 6.7 del libro

Los siguientes datos se obtuvieron en un quimiostato para el crecimiento de E. aerogenes en un

medio de crecimiento limitado en glicerol.

Para este sistema, estime los valores de:

a) Ks, mg de glicerol / mL

b) μmáx, h-1

c)YX / S, mg de células / mg de glicerol

d) ms, mg glicerol / mg célula-h

Considerando que un gráfico de los inversos del rendimiento aparente y los inversos del factor de
dilución generan una línea recta con pendiente ms, se utilizan los datos de la tabla proporcionados
para graficar
1 1 ms kd
app = M + D → ms = M
Yx/s Yx/s Yx/s
De modo que el valor de la pendiente es el valor del mantenimiento y el inverso de la ordenada al
origen es el rendimiento máximo

ms = 0.0578 mg glicerol / mg célula-h

M 1
Yx/s = = 𝟎. 𝟒𝟗𝟎𝟔 𝐦𝐠 𝐝𝐞 𝐜é𝐥𝐮𝐥𝐚𝐬 / 𝐦𝐠 𝐝𝐞 𝐠𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐨𝐥
2.0381

Considerando que sigue una cinética de Monod, se linealiza la ecuación de Monod y se obtiene
que la pendiente de la recta es el inverso de la velocidad de crecimiento máxima y que la
constante de saturación se obtiene multiplicando la pendiente de la recta por la μmáx obtenida
μmáx S 1 Ks 1 1
D=μ= − Kd → = ∗ +
Ks + S D + Kd μmáx S μmáx
kd
Para obtener Kd se despeja la formula ms = y se obtiene
YM
x/s

Kd = ms ∗ YxM
s
𝟎. 𝟎𝟐𝟖𝟑𝟓
Kd = 0.0578 ∗ 0.4906 =
𝐡
1 1
Entonces se realiza una gráfica de vs
D+Kd S

1 𝟎. 𝟗𝟑𝟑𝟔
μmáx = =
1.0711 𝐡
0.9336
Ks = pendiente (μmáx ) = ∗ 0.1476 = 𝟎. 𝟏𝟑𝟕𝟕𝐦𝐠 𝐝𝐞 𝐠𝐥𝐢𝐜𝐞𝐫𝐨𝐥 / 𝐦𝐋
h
Ejercicio 5

Los datos que se muestran en la tabla representan la tasa especifica de consumo de glucosa para
un microorganismo a diferentes velocidades específicas de crecimiento. Si suponemos que el
coeficiente de rendimiento en biomasa es constante. ¿Cuáles son los valores del coeficiente de
rendimiento y el coeficiente de mantenimiento?

Cuando el producto es asociado al metabolismo energético

dS μX
= + mX
dt Y x/s

μ
qs = Y x/s + m

Obteniendo la gráfica de qs vs μ

De modo que el coeficiente de rendimiento es

1
= 𝟓 𝐠 𝐛𝐢𝐨𝐦𝐚𝐬𝐚/𝐠 𝐠𝐥𝐮𝐜𝐨𝐬𝐚
0.2
Y el coeficiente de mantenimiento es

0.1 g glucosa / g biomasa peso seco

Ejercicio 6

Una cepa de levadura que crece en glucosa tiene una velocidad especifica de crecimiento
máxima de 0.45/h. El coeficiente de rendimiento es de 0.4 g de células en peso seco / g de
glucosa. Utilizando una corriente de alimentación 80 g/L de glucosa, se establecerá un cultivo
continuo para producir 40,000 kg al año de células de levadura secas. La planta será operada 340
días del año. ¿Cuál es el tamaño del reactor necesario? Haga las suposiciones necesarias y diga
claramente cuáles son sus suposiciones.

Datos proporcionados:

μmáx = 0.45/h

YX/S = 0.4

Si = 80 g glucosa / L

Días de operación 340 días

La cantidad de células generadas por día son

40,000 kg
= 4.9 kg células/hora
24 h
340 días ( )
1 día
La cantidad de células en el efluente se obtiene con la formula y suponiendo que S << Si

X = Yx (Si − S)
s

g cel kg
X = 0.4 (80) = 32 = 0.032
L L
El volumen del fermentador puede ser obtenido por la formula
masa masa
V= =
P DX

4.9 kg cel /h
V= = 𝟑𝟒𝟎 𝐋
0.45 kg
(0.032 )
h L
Ejercicio 7

Un fermentador de 5m3 se opera continuamente en un quimiostato, la concentración de

sustrato en la alimentación es de 20 kg/m3. El microorganismo cultivado en el biorreactor tiene
las siguientes características:

μmáx = 0.45/h

Ks = 0.8 kg/m3

YX/S = 0.55 kg/kg

V= 5m3

a) ¿Cuál será el flujo volumétrico en la alimentación que se requiere para obtener una
conversión de sustrato del 90%?

Si existe el 90% de conversión de sustrato, el sustrato de salida se da por la formula

S = (1 − 0.9)Si

kg kg
S = (0.1) (20 3
)=2 3
m m
Se obtiene el factor de dilución
μmáx S
D=
Ks + S

0.45 kg
(2 3 ) 0.32
h m
D= =
kg kg h
0.8 3 + 2 3
m m
F
Y como D = entonces el flujo volumétrico F es
V

F = D(V)
0.32 𝐦𝟑
F= (5m3 ) = 𝟎. 𝟏𝟔
h 𝐡

b) ¿Cómo se compara la productividad de la biomasa al 90% de conversión de sustrato con la

máxima posible?

Suponiendo que se puede despreciar la muerte celular al igual que la formación de productos,
entonces

Productividad = DX
 D Ks
P = D Yx (Si − )
s μmáx − D

0.32 kg
0.32 kg kg h ∗ 0.8 m3 𝐤𝐠
P= ∗ 0.55 (20 3 − ) = 𝟑. 𝟏𝟕 𝟑
h kg m 0.45 0.32 𝐦 𝐡
h − h

Para obtener la productividad máxima se debe tener en cuenta que sucede a la Dmáx
1
Ks 2
Dmáx = μmáx (1 − )
Ks + S

1
kg 2
0.45 0.8 3 0.38
Dmáx = (1 − m ) =
h kg kg h
0.8 3 + 2 3
m m

Por lo tanto, la productividad máxima es

0.38 kg
0.38 kg kg ∗ 0.8
Pmáx = ∗ 0.55 (20 3 −
h m3 ) = 𝟑. 𝟐𝟕 𝐤𝐠
h kg m 0.45 0.38 𝐦𝟑 𝐡
h − h

De modo que haciendo una comparación

kg
3.17
m3 h = 𝟎. 𝟗𝟕
kg
3.27 3
m h
 SERIE 2
PROBLEMAS
Problema 1

Una cepa de E. coli, la cual ha sido modificada genéticamente se usa para producir proteína
humana. Al fermentador de 100 litros, el cual contiene 10 g glucosa/litro, se le inoculan 12 g
células. La μ_max del cultivo es de 0.9 /h. El coeficiente de rendimiento a partir de la glucosa es
0.575 g/g
Encuentre el tiempo requerido para alcanzar la fase estacionaria.
¿Cuál será la densidad celular final si la fermentación se detiene una vez que se ha consumido
el 70 % del sustrato?

Utilizando la ecuación para el balance de sustrato:

𝑑𝑆 𝜇𝑋 𝑞𝑝 𝑋
= (− + + 𝑚𝑋)
𝑑𝑇 𝑌𝑥 𝑌𝑝
𝑠 𝑠
𝑑𝑆 𝜇 𝑞𝑝
= −( + + 𝑚)𝑋
𝑑𝑇 𝑌𝑥 𝑌𝑝
𝑠 𝑠
Como 𝑋 = 𝑋0 𝑒 𝜇𝑚𝑎𝑥𝑡 𝑑𝑡
𝑑𝑆 𝜇 𝑞𝑝
= −( + + 𝑚)𝑋0 𝑒 𝜇𝑚𝑎𝑥𝑡 𝑑𝑡
𝑑𝑇 𝑌𝑥 𝑌 𝑝
𝑠 𝑠
Integrando y tomando como condiciones iniciales 𝑆 = 𝑆0 y 𝑡 = 0

1 𝑆0 − 𝑆𝑓
= ln [1 + ]
𝜇𝑚𝑎𝑥 1 𝑞𝑃 𝑚𝑆
( + + ) 𝑋0
𝑌𝑋⁄𝑆 𝜇 max 𝑌𝑃 ⁄𝑆 𝜇𝑚𝑎𝑥
Si el producto está directamente ligado con el metabolismo energético, en estos casos la velocidad
específica de utilización del sustrato contiene términos separados de la síntesis de producto:

1 1
𝑡𝑏 = ln [1 + (𝑆0 − 𝑆𝑓 )]
𝜇𝑚𝑎𝑥 𝑌𝑋⁄𝑆

1 𝑆0 − 𝑆𝑓
𝑡𝑏 = ln [1 + ]
𝜇𝑚𝑎𝑥 1 𝑚𝑆
( + ) 𝑋0
𝑌𝑋⁄𝑆 𝜇𝑚𝑎𝑥

Sustituyendo a)
1 0.575 𝑔⁄𝑔
𝑏= −1
ln [1 + (10 𝑔⁄𝐿 − 0)] = 0.495 ℎ
0.9ℎ 12 𝑔
Sustituyendo b)
𝑆𝑓 = 10(1 − 0.7) = 3 𝑔⁄𝐿
1 0.575 𝑔⁄𝑔
𝑡𝑏 = −1
ln [1 + (10 𝑔⁄𝐿 − 3 𝑔⁄𝐿)] = 3.9357 ℎ
0.9ℎ 12 𝑔
𝑋 = 𝑋0 𝑒 (𝜇𝑚𝑎𝑥)(𝑡𝑏)
𝑋 = 12 𝑔⁄𝐿 𝑒 (0.9)(3.9357) = 414.485 𝑔⁄𝐿
Problema 2

Complemento problema 4 (visto en clase).

a) Ordene los 4 pasos principales con respecto al proceso de fermentación para producir
ácido cítrico.

I. Ácido cítrico
II. Procesos upstream
III. Procesos downstream
IV. Melaza de caña y nutrientes

1. Procesos upstream
2. Melaza de caña y nutrientes
3. Ácido cítrico
4. Procesos downsteam

b) Haga un diagrama de flujo, para el proceso de recuperación de ácido cítrico por el

método clásico, utilizando las etapas que se mencionan.

I. Filtración
II. Secado
III. Licor de fermentación
IV. Precipitación con sulfato de calcio
V. Tratamiento para decolorar
VI. Filtrado y lavado
VII. Filtración
VIII. Concentración
IX. Empacado
X. Cristalización
XI. Regeneración del ácido cítrico
XII. Filtración
XIII. Tamizado
 1. Licor de 8. Filtracion y
9. Concentración
fermentación lavado

7. Regeneración
2. Filtración 10. Cristalización
del ácido citrico

3. Tratamiento
6. Filtración 11. Secado
para decolorar

5. Precipitacion
4. Filtración con sulfato de 12. Tamizado 13. Empacado
calcio

Problema 3

Una planta de producción de levadura emplea glucosa como fuente de carbono y se opera en un
quimiostato en steady state durante un período prolongado. La concentración de glucosa en la
alimentación de 30 g/l, la constante de saturación de glucosa es de 0,05 g/l, y el coeficiente de
rendimiento basado en glucosa es de 0,5 g/g. Cuando crece a una velocidad máxima, el tiempo
de duplicación es de 1 hora. El cultivo se opera al 90% de la tasa de dilución crítica para evitar el
lavado. La planta funciona 340 días del año con un reactor de 10 000 litros. ¿Cuánta biomasa se
produce al año?

Si consideramos que 𝑆 ≪ 𝑆𝑖 entonces

𝑋 = 𝑌𝑋⁄𝑆 = (𝑆0 − 𝑆)

𝑋 = 𝑌𝑋⁄𝑆 = (𝑆0 )

𝑋 = 0.5(30) = 15 𝑔⁄𝐿

Si tenemos que μ=D

𝑙𝑛2 𝑙𝑛2
𝜇𝑚𝑎𝑥 = 𝐷 = = = 𝑙𝑛2 ℎ −1
𝑡𝑑 1ℎ
𝐷(𝐾𝑆 + 𝑆)
𝐷𝑐 =
𝑆
𝑙𝑛2 ℎ −1 (0.05 𝑔⁄𝐿 + 30 𝑔⁄𝐿 )
𝐷𝑐 =
30 𝑔⁄𝐿

𝐷𝑐 = 0.694ℎ −1
 𝐷𝑐90% = 0.694(0.9) = 0.6246ℎ−1
𝑚𝑎𝑠𝑎 𝑚𝑎𝑠𝑎
𝑉= =
𝑃 𝐷𝑋

𝑚𝑎𝑠𝑎 = 𝑉𝐷𝑋
𝑚𝑎𝑠𝑎 = 10,000 𝐿(0.6246ℎ −1 )(15 𝑔⁄𝐿) = 744510.4 𝑘𝑔

Problema 4

En la literatura se reportan los datos siguientes de crecimiento y producción de ácido glutámico

por Brevibacterium sp creciendo sobre glucosa al 5 %, sales minerales y con severa restricción de
biotina:

a) Describa la ruta biosintética del glutámico a partir de glucosa

b) Calcule la productividad total y máxima en planta para un proceso por lote
c) Calcule el volumen de operación del fermentador necesario para producir 50
toneladas al año de glutámico operando a máxima productividad. Suponga que el tiempo
de preparación del fermentador es de 5 horas (P.M. = 147 g/mol)

Tiempo (h) Biomasa (g/l) Sustrato (g/l) Producto (mmol/l)

0 0.30 4.32 -

3.15 0.72 4.16 1.20

5 1.51 3.98 4.82

10 2.53 3.19 28.92

15 2.59 2.29 60.24

20 2.53 1.57 80.72

25 2.29 1.27 90.36

a)

La biosíntesis del glutamato a partir de la glucosa comienza con la conversión de glucosa a dos
moléculas de piruvato a través de la glucólisis, llevada a cabo en el citoplasma celular,
posteriormente una molécula de piruvato reacciona con el complejo enzimático piruvato
deshidrogenasa para obtener acetil-CoA el cual entra directamente al ciclo de Krebs. Dentro de
dicho ciclo el acetil-CoA sufre una condensación a citrato por la citrato sintasa para deshidratarse
a cis-aconitato y rehidratarse a isocitrato, de aquí el isocitrato a través de una descarboxilación
oxidativa pasa a α-cetoglutarato el cual a causa de una transaminación llevada a cabo por una
aminotransferasa con piridoxal fosfato (PLP) como cofactor, es convertido finalmente a glutamato.

Fig. 1 Ciclo del ácido cítrico

b)

Obtener productividad total

XT 2.29 g/l
ProductividadT = =
TT 25 h
𝐏𝐫𝐨𝐝𝐮𝐜𝐭𝐢𝐯𝐢𝐝𝐚𝐝𝐓 = 𝟎. 𝟎𝟗𝟏𝟔 𝐠/𝐥𝐡

Obtener rendimiento de biomasa sobre sustrato

∆X (2.29 − 0.30)
YX⁄ = − =
S ∆S (1.27 − 4.32)
YX⁄ = 0.6524 gx/gs
S

Obtener cantidad de biomasa máxima

Xmax = XO + (YX⁄ )(SO )

S

Xmax = 0.30 + (0.6524)(4.32) = 3.1183 gx/l

Obtener μmax
 ln X2 − ln X1
μmax =
t 2 − t1
ln 2.29 − ln 0.30
μmax = = 0.0813 h−1
25 − 0
Obtener Tmax
X
ln
X0
Tmax =
μmax
3.1183
ln
Tmax = 0.30 = 28.79 h
0.0813

Obtener productividad máxima

Xmax 3.1183 g/l
Productividadmax = =
Tmax 28.79 h
𝐏𝐫𝐨𝐝𝐮𝐜𝐭𝐢𝐯𝐢𝐝𝐚𝐝𝐦𝐚𝐱 = 𝟎. 𝟏𝟎𝟒𝟔 𝐠/𝐥𝐡

c)

Obtener rendimiento de producto sobre biomasa

∆P (90.36 − 0)
YP⁄ = =
X ∆X (2.29 − 0.30)
YP⁄ = 45.40 mmol P/g X
X

Convirtiendo los mmoles a gramos a través del peso molecular obtenemos:

YP⁄ = 6.6738 g P/g X

X

Obtener Pmax

Pmax = (Xmax ) ( YP⁄ )

X

Pmax = (3.1183 g X/l)( 6.6738 g P/g X) = 20.8109 g P/l

Calcular número de fermentaciones que se pueden realizar en un año

8760
No. Fermentaciones = = 263.8554 fermetaciones
5 + 28.20
Calcular total de litros que se ocuparan durante todo el año

50x106 g
Litros = = 2,402,587.106 l
20.8109 g P/l

Calcular volumen del reactor

2,402,587.106 l
VR =
263.8554
𝐕𝐑 = 𝟗𝟏𝟎𝟓. 𝟔𝟗𝟔𝟐 𝐥
Problema 5

Para producir alga unicelular, que será utilizada como alimento para animales, se utiliza un
biorreactor trabajando de manera continua. El medio contiene 20 g/l de ácido acético y 1 g/l de
NH3. El rendimiento de la biomasa es de 0,3 g de biomasa/g de ácido acético. La masa celular
contiene 8% de masa como nitrógeno. El ks para ácido acético es 0,1 g/l, y 0,01 g/l para NH3. El
cultivo se opera al 90 % del μmáx. Con este medio, el tiempo de duplicación es de 5 horas.
¿Cuáles son las concentraciones de células, ácido acético y NH 3 en la corriente de salida?

Datos
S1 = 20g/l ácido acético
S2 = 1g/l NH3
YX⁄ = 0.3 g X /g S1
S
X = (0.08N)(X)
K s = 0.1 g/l ácido acético
K s = 0.1 g/l NH3 X= 5.1563 g células/l
t 2 = 5h SNH3 = 0.0904 g/l
Sa.acético= 1.3177 g/l

Obtener μmax a partir de t2

ln 2
t2 =
μmax

ln 2
μmax = = 0.13862 h−1
5h

Obtener μmax al 90%

μmax al 90% = (0.9)(0.13862 h−1 ) = 0.12476 h−1

Calcular D para NH3

KS
D = µmax (1 − √ )
K S + SO
 0.01
DNH3 = 0.12476 (1 − √ )
0.01 + 1

DNH3 = 0.112345

Calcular concentración de NH3 en corriente de salida

(K S )(D)
SNH3 =
µmax − D

(0.01 g/l)(0.112345 h−1 )

SNH3 =
0.12476 h−1 − 0.112345h−1

𝐒𝐍𝐇𝟑 = 𝟎. 𝟎𝟗𝟎𝟒 𝐠/𝐥

Calcular D para ácido acético

0.1
Da.a. = 0.12476 (1 − √ )
0.1 + 20

Da.a. = 0.115960 h−1

Calcular concentración de ácido acético en corriente de salida.

(0.01 g/l)(0.115960 h−1 )

Sa.a. =
0.12476 h−1 − 0.115960h−1

𝐒𝐚.𝐚. = 𝟏. 𝟑𝟏𝟕𝟕 𝐠/𝐥

Calcular concentración de células (X) con base en las concentraciones de ácido acético

X = Yx⁄s (So − S)

X = 0.3(20 − 1.3177) = 5.60469 g/l

Restar el 8% de N presente en la biomasa

N = (0.08)(5.6046) = 0.4483 g/l de N

X = 5.6046 − 0.4483

𝐗 = 𝟓. 𝟏𝟓𝟔𝟑 𝐠 𝐜é𝐥𝐮𝐥𝐚𝐬 /
Problema 6

Para determinar su eficacia en la absorción de uranio a partir de agua contaminada se utiliza un

microorganismo, utilizando un CSTR. La tasa máxima de crecimiento específico es de 0,69 hr -1, y
la constante cinética Michaelis-Menten para glucosa, el sustrato limitante, es de 10 mg/l. La
corriente contaminante contiene 20 mg/l de uranio. La corriente de efluentes del biorreactor
continuo no debe contener uranio a niveles superiores de 1 mg/l. Debido a las preocupaciones
ambientales y para suprimir la tasa de crecimiento de los microorganismos contaminantes que
entran con la corriente de alimentación (nota: no se puede permitirse el lujo de esterilizar la
corriente contaminante antes de alimentarse en el biorreactor), el nivel residual de glucosa en el
biorreactor no debe ser superior a 5 mg/L. La adsorción de uranio en las células sigue una
cinética de orden cero con respecto a la concentración de uranio en las condiciones de nuestro
interés, y la velocidad específica de consumo es de 1 mg/g de células-h. El coeficiente de
rendimiento de la biomasa con respecto a la glucosa es de 1 g de células/g de glucosa.
Especifique las condiciones de funcionamiento (todas las variables necesarias para especificar el
sistema).

F = 0.5146 l/h
So = 10 mg/l
Xo = 0
Luranio = 20 mg/l

F = 0.5146 l/h
Sglucosa = 2.0244 mg/l
X = 7.9756 mg células/l
Luranio = 19.5896 mg uranio/l
VR= 1 l

Calcular D

KS
D = µm (1 − √ )
K S + SO

0.69
D = 0.69h−1 (1 − √ )
0.69 + 10

𝐃 = 𝟎. 𝟓𝟏𝟒𝟔 𝐡−𝟏

Calcular sustrato en el efluente

(K S )(D)
S=
µm − D
 (0.69)(0.5146 h−1 )
S=
0.69 + 0.5146 h−1
𝐒 = 𝟐. 𝟎𝟐𝟒𝟒 𝐦𝐠/𝐥

Se cumple con el parámetro indicado de una producción de sustrato menor a 5 mg/l

Calcular número de células (X) en el efluente

X = Yx⁄s (So − S)

X = 1 g células (.01g/l − .0020244 g/l)

⁄g glucosa

𝐗 = 𝟕. 𝟗𝟕𝟓𝟔𝐱𝟏𝟎−𝟑 𝐠 𝐜é𝐥𝐮𝐥𝐚𝐬 /𝐥

Suponiendo un volumen 1 L calcular F

F = (D)(VR )

F = (0.5146 h−1 )(1 l)

𝐅 = 𝟎. 𝟓𝟏𝟒𝟔 𝐥/𝐡

Calcular gramos de células por cada hora

g células l
(7.9756x10−3 ) ( 0.5146 ) = 𝟒. 𝟎𝟗𝟗𝟎𝐱𝟏𝟎−𝟑 𝐠 𝐜é𝐥𝐮𝐥𝐚𝐬 /𝐡
l h
Debido a que por cada gramo de células es consumido 1 mg de Uranio se puede deducir que el
producto final contendrá 19.99 mg de uranio por cada litro, por lo que no se cumple con el
objetivo del reactor al solicitar un efluente de uranio menor a 1mg/l. Por ende, es necesario
cambiar el volumen del reactor.

Calcular volumen necesario del reactor para obtener un efluente de uranio menor a 1mg/l.

19 g células /h 𝐥
g = 𝟐𝟑𝟖𝟐. 𝟐𝟔𝟔 = 𝐅
7.9756x10−3 células 𝐡
l
F = (D)(VR )
l
2382.266
VR = h
0.5146 h−1
𝐕𝐑 = 𝟒𝟔𝟐𝟔. 𝟑𝟓𝟒𝟔 𝐥

Comprobación de que la línea de salida de uranio cumpla con el requisito del problema

g células l
(7.9756x10−3 ) ( 2382.266 ) = 𝟏𝟗 𝐠 𝐜é𝐥𝐮𝐥𝐚𝐬 /𝐡
l h
Debido a que por cada gramo de células es consumido 1 mg de Uranio se puede deducir que el
producto final contendrá 1mg de uranio por cada litro, por lo que se cumple con el objetivo del
reactor al solicitar un efluente de uranio menor a 1mg/l deduciendo que mínimamente el reactor
deberá de tener un volumen de 4626.3546 l.

F = 2382.266 l/h
So = 10 mg/l
Xo = 0
Luranio = 20 mg/l

F = 2382.266 l/h
Sglucosa = 2.0244 mg/l
VR = 4626.3546 X = 7.9756 mg células/l
l Luranio = 1 mg uranio/l
6.3 Problema Shuler/Kargi

Se obtuvieron los siguientes datos sobre el efecto de la temperatura sobre la producción

fermentativa de ácido láctico por una cepa de Lactobacillus delbrueckii. A partir de estos datos,
calcule el valor de la energía de activación para este proceso. ¿Es el valor de la energía de
activación típico de este tipo de conversión biológica?

Temperatura ºC Rate constant (k) (mol/l-h)

40.4 0.0140
36.8 0.0112
33.1 0.0074
30.0 0.0051
25.1 0.0036

1/T Log k
0.02475247525 -1.853871964
0.02717391304 -1.950781977
0.03021148036 -2.13076828
0.03333 -2.292429824
0.3984063745 -2.443697499

Formula:
−𝐸
𝑘 = 𝐴𝑒 𝑅𝑇
𝐸
𝑃𝑒𝑛𝑑𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 = − = −8281 𝐾
𝑅
La energía de activación es 𝐸 = 16.5 𝐾𝑐𝑎𝑙/𝑚𝑜𝑙
6.11 Problema Shuler/Kargi

Los siguientes datos se obtienen en la oxidación de pesticidas presentes en aguas residuales

mediante un cultivo mixto de microorganismos en un tanque de aireación en funcionamiento
continuo.

𝑫(𝒉−𝟏 ) 𝑺(𝑷𝒆𝒔𝒕𝒊𝒄𝒊𝒅𝒂𝒔), 𝒎𝒈/𝒍 𝑿(𝒎𝒈⁄𝒍)

0.05 15 162
0.11 25 210
0.24 50 250
0.39 100 235
0.52 140 220
0.7 180 205
0.82 240 170

Suponiendo que la concentración de plaguicida en la corriente de aguas residuales de

alimentación es s = 500 mg / l, determine 𝑌𝑥𝑀⁄𝑆 , 𝐾𝑑 y 𝐾𝑠 .

1 1 𝑚𝑠
= +
𝑌𝑥𝐴𝑃
⁄𝑆 𝑌𝑥𝑀⁄𝑆 𝐷
𝑥 − 𝑥2
𝑌𝑥𝐴𝑃
⁄𝑆 = ; (𝑥2 = 0)
𝑆0 − 𝑆

Tasa de S(mg/l) X(mg/l) Yap 1/Yap 1/D (h)

dilución
0.05 15 162 0.334 2.994 20.000
0.11 25 210 0.442 2.262 9.091
0.24 50 250 0.556 1.800 4.167
0.39 100 235 0.558 1.702 2.564
0.52 140 220 0.611 1.636 1.923
0.7 180 205 0.641 1.561 1.429
0.82 240 170 0.654 1.529 1.220

1 1
Gráfica 𝑌 𝐴𝑃 𝑉𝑠. 𝐷
𝑥⁄𝑆

𝑌 = 𝐴 + 𝐵𝑥
𝑌 = 1.4794 + 0.0774𝑥
𝑅2 = 0.9936
1 1 1
𝐴𝑃 = 𝑀 + 𝐷 𝑚𝑠
𝑌𝑥⁄𝑆 𝑌𝑥⁄𝑆
 1
= 1.4794
𝑌𝑥𝑀⁄𝑆

𝑚𝑔 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑌𝑥𝑀⁄𝑆 = 0.6759
𝑚𝑔 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜
𝐾𝑑
𝑃𝑒𝑛𝑑𝑖𝑒𝑛𝑡𝑒 = 𝑚𝑠 = 0.0774 =
𝑌𝑥𝑀⁄𝑆

𝐾𝑑 = 0.0774(0.6759)
𝐾𝑑 = 0.05231ℎ−1

1/Yap Vs. 1/D

3.5

2.5

1.5

0.5

0
0 5 10 15 20 25

𝐾𝑠 (𝐷 + 𝐾𝑑 )
𝑆=
𝜇𝑚 − 𝐷 − 𝐾𝑑
1 𝜇𝑚 1
= −
𝑆 𝐾𝑠 (𝐷 + 𝐾𝑑 ) 𝐾𝑠

S D(h-1) 1/S 1/(D+Kd)

15 0.05 0.066667 9.775171
25 0.11 0.04 6.16429
50 0.24 0.02 3.421143
100 0.39 0.01 2.260909
140 0.52 0.007143 1.747335
180 0.7 0.005556 1.329257
240 0.82 0.004167 1.146395
 1 1
Gráfica 𝑆 𝑉𝑠. (𝐷+𝐾
𝑑)

𝑌 = 𝐴 + 𝐵𝑥
𝑌 = −0.0050869 + 0.00731997𝑥
1
− = −0.0050896
𝐾𝑠
𝐾𝑠 = 196.479 𝑚𝑔⁄𝐿
𝜇𝑚
= 0.00731997
𝐾𝑠
𝜇𝑚 = 0.00731997(196.479)
𝜇𝑚 = 1.438 ℎ𝑟 −1

1/S Vs. 1/(D+Kd)

0.08
0.07
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 2 4 6 8 10 12
6.19 Problema Shuler/Kargi

La formación de ácido láctico a partir de glucosa se realiza en un cultivo continuo por

Streptococcus lactis. La siguiente información se obtuvo de estudios experimentales.

𝑆0 = 5 𝑔⁄𝑙 , 𝜇𝑚 = 0.2ℎ −1, 𝐾𝑠 = 200 𝑚𝑔⁄𝑙 , 𝑘𝑑 = 0.002ℎ −1 , 𝑌𝑥𝑀⁄𝑆 = 0.4 𝑔𝑋⁄𝑔𝑆 , 𝑌𝑃⁄𝑆 =
0.2 𝑔𝑃 ⁄𝑔𝑆, 𝑞𝑃 = 0.1 𝑔𝑃 ⁄𝑔𝑋 − ℎ

a) Grafique las variaciones de S, X, P, DX y DP con la tasa de dilución.

𝜇𝑚 𝑆0 (0.2ℎ −1 )(5)
1)𝐷 = − 𝑘𝑑 = (0.2)+(5)
− 0.002 = 0.19031 ℎ −1
𝐾𝑠+𝑆0
𝐾𝑠𝐷 (0.2)(0.19031)
2)𝑆 = 𝜇 = = 3.928 𝑔⁄𝑙
𝑚 −𝐷 0.2−0.19031
𝑘𝑠 𝐷 (0.2)(0.19031)
3)𝑋 = 𝑌𝑥𝑀⁄𝑆 (𝑆0 − 𝜇 ) = (0.4) (5 − ) = 0.4288
𝑚 −𝐷 0.2−0.19031
𝑞𝑃 𝑋 (0.1)(0.4288)
4)𝑃 = 𝐷
= 0.19031
= 0.22532
5)𝐷(𝑆0 − 𝑆) = (0.19031)(5 − 3.928) = 0.205002
6)𝐷𝑃 = 𝑞𝑃 𝑋 = (0.1)(0.205002) = 0.0205002
Bibliografía:

Doran, P. (1995). Bioprocess Engineering Principles. Londos: Academic Press. ISBN 0-12-220855-2.

Liu, S. (2017). Bioprecess Engieering kinetics, sustainability, and reactor design. USA: Elsevier.
ISBN: 978-0-444-63783-3.

Navarro, O.; Ley Chong, N.; Rodríguez, R.; Gonzáles, E. (2016). Oportunidades de producción de
ácido cítrico por vía fermentativa a partir de sustratos azucarados en cuba. Universidad Central
“Marta Abreu” de las Villas. Copyright: Cuba. Centro Azúcar Vol 43, No. 2 (pp. 85-99)

Nelson, D. L., Lehninger, A. L., & Cox, M. M. (2008). Lehninger principles of biochemistry.
Macmillan.

Shuler M. & Kargi F. (2002). Ingeniería de Bioprocesos: conceptos básicos. 2da ed. EUA: Prentice
Hall.