BALANCES DE MATERIA

PARA SISTEMAS DE CULTIVO

I. ECUACION DE BALANCE DE MATERIA EN EL BIORREACTOR
BIORREACTOR O FERMENTADOR

Es el equipo o recipiente donde se realiza el proceso fermentativo o bioprocesos en general.

Provee todos los servicios que son necesarios para el cultivo: mezclado, termostatizacin,
suministro de oxgeno, entradas para adicin nutrientes, control del pH, etc.
ESQUEMA DE UN BIORREACTOR

Se indica los caudales (F) y concentraciones del componente i (Ci) a la entrada (1) y salida (2).
La flecha que rodea al eje del agitador significa que el cultivo est perfectamente mezclado.

F1
Ci1

F2
Ci2

Figura 1

En la Figura 1 para un componente i cualquiera del cultivo (Ci): i = sustrato,

biomasa o producto, se puede plantear el siguiente balance de materia en el
biorreactor
Velocidad
de
acumulacin

(1)

d (V Ci)
dt
V
F1
F2
Ci1
Ci2

rf i

Velocidad
de
ingreso

Velocidad
de
salida

F1 Ci1

F2 Ci2

Velocidad
de
formacin
V rf i

Velocidad
de
consumo
V rci

Volumen de cultivo,
Caudal de alimentacin, (Lh-1)
Caudal de salida, (Lh-1)
Concentracin del componente "i" en la alimentacin
Concentracin del componente "i" en el caudal de salida
Si el cultivo esta bien mezclado, se puede asumir idntica a la que
hay dentro del biorreactor.
Velocidad de formacin del componente "i"

Velocidad de consumo del componente "i"

rci
EJERCICIO 1:

Aplicando la Ecuacin (1):

Deduzca la Ecuacin de Balance de Materia para las Clulas (Ci = X)

(1)

II.

d (V Ci)
dt

F1 Ci1

F2 Ci2

V rf i

V rci

d (V X)
dt

F1 X1

F2 X2

V rx

V rd

d (X)
dt

F1 X1 / V

F2 X2 / V +

V rx / V

V rd / V

d (X)
dt

F1 X1 / V

F2 X2 / V +

rx

rd

d (X)
dt

F1 X1 / V

F 2 X2 / V +

SISTEMAS DE CULTIVO Y ECUACIONES DE BALANCE DE

MATERIA

Los sistemas de cultivo o mtodos de cultivo, hace referencia al modo de

operar de un biorreactor, esto es en forma continua o discontinua.

Suponiendo que la densidad del cultivo (d = m / V) y de su alimentacin son

iguales resulta:
o

El volumen del cultivo (V) variar en el tiempo segn sea F1 y

(2)

dV
dt

F1 - F2

F1 Caudal de entrada
F2 Caudal de salida

Dependiendo de como sea F1 y F2 surgen tres sistemas de cultivo:

F2

1. Cultivo Continuo
F1

Ambos caudales son iguales

Por la ec. (2): V es constante

Por lo tanto: la ec. (1) se reduce a ec. (3)

F2

F1 = F2

(1)

d (V Ci)
dt

F1 Ci1

F2 Ci2

(3)

V d (Ci)
Dt

F ( Ci1

Ci2 )

V rf i

V ( rf i

V rci

rci )

2. Cultivo Batch Alimentado

El caudal de salida F2 , es nulo

F1

Por lo que V aumentar en el tiempo en

funcin del caudal de entrada:
Ec. (4)

F2 = 0

dV
dt

F1

En la Ec. (1) se anula el trmino:

(1)

d (V Ci)
dt

F1 Ci1

(5)

d (V Ci)
dt

F Ci1

F2 Ci2

F2 Ci2

V rf i

V ( rf i

V rci

rci )

3. Cultivo Batch

Ambos caudales son nulos F1 = F2 = 0

V es constante

En la Ec. (1) se anulan los trminos:

F1 Ci1

(1)

(5)

F2 Ci2

V rf i

V rci

V ( rf i

rci )

( rf i

rci )

d (V Ci)
dt

V d (Ci)
dt

d (Ci)
dt

F1 Ci1

F2 Ci2

Su duracin:
Tambin es limitada en el tiempo y depende de las condiciones iniciales del
cultivo

Una vez inoculado el medio:

La Biomasa aumenta a expendas de los nutrientes y cuando el substrato que
limita el crecimiento se agota, finaliza el batch.

II.

BALANCES DE MATERIA DE LOS COMPONENTES

( X, P, S ) PARA SISTEMAS DE CULTIVO

Analizaremos ahora con ms detalle cada uno de los sistemas vistos

aplicando en particular los balances de materia a la biomasa (X), al producto
(P), y al sustrato limitante de crecimiento (S).

Para la biomasa (X), y el producto (P) slo es necesario considerar la cintica

de formacin

rx

rp

respectivamente, con lo cual rci = 0 en ambos casos.

Para el sustrato (S) se tiene el caso inverso y slo deber considerarse la

velocidad de consumo, rs .

Si por las caractersticas del proceso, la lisis celular o la descomposicin del

producto son importantes, deber incluirse en el balance un trmino adicional
que contemple este aspecto.

II.1. Cultivo continuo

II.1.1. Operacin:

Para poner en marcha un cultivo continuo, se realiza previamente un

cultivo batch
En un momento dado se comienza a alimentar con medio fresco a
caudal F y por rebalse se mantiene el volumen constante.

3.1.2. Componentes del caudal de salida:

Clulas
Medio de cultivo parcialmente agotado y
Eventualmente algn producto.

3.1.3. Consideraciones:

Si alimentamos con medio fresco significa que:

X1 = 0

P1 = 0

Por lo que, slo se debe considerar la concentracin de sustrato

limitante del crecimiento (S1).

3.1.4. Balance de Materia para X, S, P

En base a las consideraciones anteriores y de acuerdo a Ec. (3) los

balances de materia para X, S y P ser la: Ec. (7) , Ec. (8) Ec. (9)
CUANDO: Ci = X
(7)

VdX
dt

DEDUCCION MATEMATICA DE EC. (7)

F X

V rX

(3)

CUANDO: Ci = S
(8)

VdS
dt

V d (Ci)
dt

F (Ci1 -Ci2) + V (rf i - rci )

Cuando: Ci = X
F (S1 S2) - V rS

VdX
dt

F ( 0 - X ) + V (rX - 0 )

CUANDO: Ci = P
(9)

VdP
dt

F P

V rP

(7)

VdX
dt

F X

V rX

3.1.5. En Estado Estacionario

Las concentraciones dentro del biorreactor permanecern constantes

en el tiempo, lo que significa igualar a cero las ecuaciones (7), (8) y (9).

3.1.6. Relacin entre la Velocidad de Dilucin ( D ) y Crecimiento Celular ( )

De la primera Ec. (7) y teniendo en cuenta que rx =

(10)

VELOCIDAD DE DILUCIN (D)

(10)

F
V

D =

X, resulta Ec.

DEDUCCION MATEMATICA EC. (10)

(7)

u
(10)

VdX
dt

F X

V rX

F X

V rX

F X

F
V
D

uX

Si se reemplaza D Ec. (10) en la ec. (19) resulta Ec. (11)

CONCENTRACION DE SUBSTRATO EN ESTADO ESTACIONARIO ()

(11)

= KS D / (u m - D)

DEDUCCI
(10)

(19)

Ejercicio de Aplicacin:
KS = 0.05 g L-1
D

= 0, 0.25, 0.5, 0.75, 1.0

h -1

K
S
D

u m = 1.0 h-1
1. Calcule los valores de
2. Traze la curva de evolucin de
Rpta: = 0.017 g/L; cuando D = 0.25
(11)

317 `Rlaci "ents a Vlcidad e Diui n>(D )

e Sbstra ( s

eha Ecc ,8)!$sr e c. (1

Consm

VEOIA E CON MO E
USRTO )
!
4
(12
) $ !

! xr " =
$ !

D !(S

DEDUCCION MATEMATICA Ec. (11)

(8)

VdS
dt
0

F (S1 S) - V rC

F (S1 S) - V rS

!!
ezcicio de AplicAcin:
E
D

= 0, 0.25, 0.5, 0.75, 1.0

h -1

(12)

V bS

F (S1 S)

rS

F (S1 S)

rS

D (S1 )

/ V

S1 = 5 g L-1

= valores del ejercicio anterior

1. Calcule rS para los valores de

Rpta:

Por la Ec. (26) :

VELOCIDAD DE CONSUMO DE
SUBSTRATO
(26)

rs = u X / Yx/s

DEDUCCION MATEMATICA Ec. (26)

(26)

Y x/s

rx / rs

rs =

rx / Y x/s

rs =

uX / Yx/s

Por lo tanto, comparando ec. (26) y dc. (12) y reemplazando u = D se tiene ec.(1#)
CONCENTRACION DE BIOMASA EN
DEDUCCION MATEMATICA Ec. (13)
ESTADO ESTACIONARIO (x)
(12)

rS

D (S1 )

(13)

Yx/s ( S1 - )

Ejebcicio de Aplicacin:

(26)

rS = u X / Yx/s
u X / Yx/s = D (S1 )

(26) y (12)
Reemphazando u = D

Yp-s = 0.5
D X = Yx/s D (S1 - )

S1 = 5 g L-1

= valores del ejercicio anterior

(13)
X = Yx/s (S1 - )

1. Calcule X
2. Gr!fi1ue la evolucin de la biomasa
Rpta:
X = 2.49 g/L;

cuando = 0. 17 g/L

Si en particular S es la fuente de carbono y energa, r S vendr dada por la Ec. (29)

del Cap. 5 y X ser:

CONCENTRACION DE BIOMASA EN
ESTADO ESTACIONARIO (x)

(13 B)

DEDUCCION MATEMATICA Ec. (13 B)

(11)

(13)

X = Yx/s ( S1 Ks D / u m D)
(13B)

= KS D / (u m - D)
=

Yx/s (S1 - )

Introduciendo (11) en (13)

resulta (13 B)
X = Yx/s ( S1 Ks D / u m D)

CONCENTRACION DE BIOMASA EN
ESTADO ESTACIONARIO (x)

(14)

D Yx/s ( S1 - )
(D + ms Yx/s )

DEDUCCION MATEMATICA Ec. (14)

En ec. (29) reemplazar rx = X
(29)

rs = rx / Yx/s + ms X
=

X / Yx/s

Factorizando en X

+ ms X

Ejercicio de Aplicacin:
D

= 0, 0.25, 0.5, 0.75, 1.0

rs = X [ / Yx/s + ms ]
h-1

Introducir la ec. (26):

rs = X /Yx/s

Yx/s = 0.5
X /Yx/s

S1 = 5 g L-1

= valores del ejercicio anterior

X [ / Yx/s + ms ]

Introducir la ec. (13):

ms = 0.06 g / g h

X =Yx/s (S1 - )

Yx/s (S1 - ) / Yx/s = X [ /Yx/s + ms ]

-------------------------------------------------1. Calcule X
2. Grafique la evolucin

Despejando X
X [ /Yx/s + ms ] .Yx/s = Yx/s (S1 - )

Rpta:

------------

Yx/s ( S1 - )
[ /Yx/s + ms ] .Yx/s
D

Yx/s ( S1 - )
D + ms . Yx/s

Cuando ms = 0 , la ecuacin (14) se reduce a la ecuacin (13).

Figura 16.
Cultivo continuo.
Muestra como vara la concentracin () en estado estacionario
en funcin de la velocidad de dilucin (D)
La curva superior continua corresponde a Ec. (13) y la inferior Ec. (14)
(13)
ms = 0

Yx/s ( S1 - )

(14)

ms = 0.08 g-1g-1h-1

D Yx/s ( S1 - )
(D + ms Yx/s)

S1 = 5 gL-1

Ks = 0.05 gL-1

Dc = 0.99 h-1
m = 1 h-1
Concentracin de biomasa (X) y de substrato limitante
(S1) en estado estacionario a distintos valores de D.
Parmetros:

m = 1 h-1

Ks = 0.05 gL-1 ;

Yx/s = 0.5

S1 = 5 gL-1

En el caso de la Ec.(14) el efecto del mantenimiento celular se hace notable a

bajas velocidades de dilucin.
En ambos, casos puede apreciarse que existe un valor D por encima del cual es
X = 0, con lo cual por la ec. (13) o (14) es = S1
(14)

D Yx/s ( S1 - )
(D + ms Yx/s)

(13)

Yx/s ( S1 - )

Yx/s ( S1 - )

D Yx/s ( S1 - )
(D + ms Yx/s)

= S1

D Yx/s ( S1 - )

= S1
Si se reemplaza este valor en la Ec. (11) se obtiene Ec. (15)
VELOCIDAD DE DILUCION CRITICA
Dc

DEDUCCION MATEMATICA Ec. (15)

(11)

= KS D / (u m D)

S1
(15)

Dc

S1 = KS D / (u m D)

m
Ks + S1

KS D = S1 . (u m D)
(15)

KS D =

u m S1

S1 D

KS D + S1 D =

u m S1

D (KS + S1 )

u m S1

S1
D

Ks + S1
Si como ocurre normalmente S1 >> Ks se tiene Dc m lo cual es un criterio
muy til en el momento de seleccionar un valor D apropiado, ya que debe
cumplirse que D < m
Caso contrario, ocurrir el lavado del cultivo debido a que la velocidad de
salida de las clulas del biorreactor ser mayor que la del crecimiento.
Debe tomarse en cuenta que la Fig. 16 se representa en caso que esta dado por
la ecuacin de Monod, pero si en el medio de cultivo hay sustancias inhibidoras
del crecimiento ( o son formadas por microorganismos ) o el substrato limitante
es el inhibidor, debern emplearse las expresiones de correspondientes a las
dadas en el capitulo 5.
3.1.8. Relacin entre la Velocidad Dilucin y Formacin de Producto

De la tercera Ec. (9) en estado estacionario se reduce a:

CONCENTRACION DE PRODUCTO EN
ESTADO ESTACIONARIO (P)

DEDUCCION MATEMATICA EC. (10)

(9)

(10)

O bien:
(17)

P =

rP / D

rP = qp . X
_
P = qp . X / D

VdP
dt

V rP

0 = -F P
F P = V rP
P = V rP / F

V rP

P =

F P

rP / D

Donde P : concentracin de producto en estado estacionario

Dependiendo de cmo sea la cintica de formacin de producto ser la forma de
la curva P vs D.
El cultivo continuo, alternativamente puede emplearse, y de hecho se emplea,
para elucidar que tipo de relacin existe entre q p y , ya que como se mencion
en el capitulo 6 es uno de los factores a tener en cuenta para planear la estrategia
de produccin, como se ver mas adelante cuando se trate la produccin de
penicilina.

DETERMINACION DE LOS PARAMETROS DE CRECIMIENTO

El cultivo continuo es sumamente til para determinar parmetros de crecimiento
tales como Ks, u m o Yx/s.
As reordenando la ec. (11) se tiene la ec.(15)

(11)

(15)

= KS D / (u m D)

KS D =

. (u m D)

KS D =

um

KS D +

D (KS +

D =
=

um
um

m
Ks +

La Ecuacin de Monod se puede linearizar tomando los recprocos para obtener

la expresin

m
D

m
+

Ks

m
D

Ks
1

Ks

1
+

Es una lnea recta

Graficando 1 / D en funcin de 1 / , los puntos debern ajustarse a una lnea

recta cuya interseccin con el eje 1/D
dar el valor de 1/ m y la pendiente
Ks / m , si es que el cultivo puede ser representado por una cintica como la de
Monod.
Y

a=Ks/m

1/D
b= 1/m

1/

Por otra parte reordenando la ec. (14) resulta ec. (19)

(14)

D Yx/s ( S1 - )

(D + ms Yx/s)

D Yx/s ( S1 - )
D ( S1 - )

(19)

X (D + ms Yx/s)

X (D + ms Yx/s) / Yx/s

D ( S1 - ) /

D / Yx/s

ms Yx/s / Yx/s

D ( S1 - ) /

D / Yx/s

ms

D ( S1 - ) /

1 / Yx/s . D

De donde la grfica de:

1 / Yx/s y ms

D ( S1 - ) / X

ms

Es una lnea recta

en funcin de D permitir estimar

Obviamente en esta caso el substrato considerado es la fuente de carbono y

energa

A = 1 / Yx/s

D ( S1 - ) / X
B = ms

3.2. Cultivo Batch Alimentado

3.2.1. Operacin:

Se inicia la alimentacin del cultivo cuando el substrato limitante se ha

agotado. No es un requisito indispensable, pero simplifica el tratamiento
matemtico.
3.2.2. Objetivo:
Controlar la
alimentacin

velocidad

de

crecimiento

mediante

la

velocidad

de

3.2.3. Consideraciones:
Supondremos que alimentamos con medio fresco, es decir:
X1 = 0

P1 = 0

Por lo que, slo deberemos considerar la concentracin de sustrato

limitante del crecimiento, S1 .
3.2.4. Balance de Materia para X , S , P
Segn Ec.(5)

(5)

d (V Ci)
dt

F Ci1

V ( rf i

rci )

Se tiene:
CUANDO: Ci = X
(20)

d XV
dt

DEDUCCION MATEMATICA DE EC.(20)

V rX

(5)

CUANDO: Ci = S
(21)

d SV
dt

d (VCi)
dt

F (Ci1 )

Cuando: Ci = X
F S1 V r S

dVX
dt

V (rf i - rci )
donde X = 0

F ( 0 ) + V (rX - 0 )

CUANDO: Ci = P
(22)

d PV
dt

V rP

(20)

d XV
dt

V rX

Si en la ec. (21) se reemplaza rS por rx / Yx/s que resulta de Yx/s = rx / rs y

reemplazando V rx por su equivalencia de la ec. (20).
DEDUCCION MATEMATICA DE EC.(23)
(23)

d SV
dt

F S1 1 / Yx/s . dXV/dt

(21)

d SV
dt

F S1 V rX / Yx/s

d SV
dt

F S1 V rS

F S1 1 / Yx/s . V rX

Pero como Ec. (20):

d XV
dt
(23)

d SV
dt

V rX

F S1 1 / Yx/s . dXV/dt

Si deseamos que la velocidad de crecimiento d(XV)/dt este controlada por la

alimentacin d(SV)/dt , esta deber ser tal que en todo momento S 0 y por lo
tanto d(SV) / dt 0
Esto equivale decir que el sustrato es consumido totalmente ni bien ingresa al
birreactor
Luego ec. (23) es:
(23)

1 / Yx/s

(24)

F S1 1 / Yx/s

dXV/dt

dXV/dt

dXV/dt

F S1

Yx/s . F S1

E integrando:
XV

dXV
XoVo

t
=

Yx/s . F S1
to

dt

(25)

XV

XV - Xo Vo

Yx/s . F S1 t

XV

Xo Vo + Yx/s . F S1 t

Xo Vo + Yx/s . F S1 t

Donde:
Xo = Concentracin de biomasa en el momento de iniciar la alimentacin.
Vo = Volumen del cultivo en el momento de iniciar la alimentacin
La variacin de V con el tiempo se obtiene integrando la ec. (4): dv/dt = F
V

dv

Vo

V - Vo

(26)

V - Vo

dt

to

F t

F t

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

ESCUELA POST GRADO
MAESTRIA: BIOTECNOLOGIA Y BIOINGENIERA
DOCENTE : MSc CARLOS E. VILLANUEVA AGUILAR
Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo Lambayeque 074-283610

villabal@hotmail.com

EJERCICIO N 1
Para un cultivo continuo se tiene los sgtes. parmetros:
m = 1 h-1 ; Yx/s = 0.5 ; Ks = 0.05 gL-1 ; S1 = 5 gL-1
a) Calcule la velocidad de dilucin crtica Dc
b) Si como ocurre normalmente S1 >> Ks . Calcule Dc.
c) Que criterio deber cumplirse en el momento de seleccionar un valor D apropiado En caso contrario que ocurrira?

EJERCICIO N 2
Aplicando la ecuacin general de balance de materia determine las ecuaciones de balance de un sistema de cultivo
batch o discontinuo para los componentes biomasa (X) , producto (P) y substrato (S).

EJERCICIO N 3
Tomando como base el ejemplo 4.6. Produccin de goma xantano, realice los clculos de balance similares a los
solicitados para cuando la cantidad de gas de salida recogido durante todo el proceso es de 1350 kg.

EJERCICIO N 4
Si considera el esquema de datos para el biorreactor indicado deduzca:
1.
2.
3.
4.

La ecuacin general de balance de materiales, tomando como patrn el La ecuacin general de balance
La ecuacin de balance cuando el componente es biomasa (X)
La ecuacin de balance cuando el componente es substrato (S)
La ecuacin de balance cuando el componente es producto (P)

EJERCICIO N 5
Deducida la ecuacin de balance de materia para biomasa (Ci = X) y suponiendo las siguientes condiciones para el
biorreactor:

Estado estacionario

Alimentacin estril

Velocidad de muerte despreciable

Establezca la ecuacin resultante para dichas condiciones