UNIVERSIDAD CATÓLICA DE SANTA MARÍA

FACULTAD DE CIENCIAS FRAMECÉUTICAS, BIOQUÍMICAS Y BIOTECNOLÓGICAS

ESCUELA DE INGENERÍA BIOTECNOLÓGICA

NOMBRE DEL TRABAJO:

“MEDIOS DE CULTIVO EN PLACA”
ELABORADO POR:
MARJORIE LIZBETH PUMA QUITO
CURSO:
MICROBIOLOGÍA I
DOCENTE:
JESÚS MERCEDES JAVE MARQUEZ
AREQUIPA – PERÚ
2020
 AGAR TSI (TRIPLE SUGAR IRON)
1. COMPOSICIÓN
Extracto de Carne 3g/L
Pluripeptona 20g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Lactosa 10g/L
Sacarosa 10g/L
Glucosa 1g/L
Sulfato de Hierro y Amonio 0.2g/L
Tiosulfato de Sodio 0.2g/L
Rojo Fenol 0.025g/L
Agar 13g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Lactosa, Sacarosa y Glucosa.
Fuente de nitrógeno: Extracto de Carne, Pluripeptona.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de azufre: Sulfato de Hierro y Amonio, Tiosulfato de Hierro y Amonio.
Iones metálicos: Cloruro de Sodio.
Indicador: Rojo Fenol.
C. Según su proporción en agua: Sólido.
D. Según su uso o utilización: Diferenciación.
E. Según la composición que presenta: Semisintético.
F. Según su presentación: Sólido en tubo.
3. MICROORGANISMOS
Fermentación de carbohidratos:
- No fermentadores de glucosa: Se visualiza una coloración rojo más fuerte, debido a que se
forman aminas en el bisel. Como, por ejemplo
- No fermentadores de lactosa/sacarosa: Se visualizará una coloración completamente amarilla
al cabo de ocho horas, después al cabo de 18 horas en la superficie se verá un color rojo. Como,
por ejemplo Pseudomonas, Alacalígenes, Achromobacter, Burkholderia.
- Fermentadores de lactosa/sacarosa/glucosa: En un periodo de 8 horas el medio estará amarillo,
donde al acabo de 18 horas seguirá con su coloración amarilla.

Producción de sulfuro de hidrógeno: Se visualizará un precipitado negro, esto se debe a que al

formar el sulfuro de hidrógeno reacciona con el sulfato ferroso de amonio. Como, por ejemplo:
Proteus, Citrobacter, Edwardsiella, Leminollera, Pragia, Trabusiella o Salmonella.
 AGAR LIA (LISINA HIERRO)
1. COMPOSICIÓN
Peptona de Gelatina 5g/L
Extracto de Levadura 3g/L
Glucosa 1g/L
Lisina 10g/L
Citrato de Hierro y Amonio 0.5g/L
Tiosulfato de Sodio 0.04g/L
Púrpura de Bromocresol 0.02g/L
Agar 15g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente carbono: Glucosa
Fuente de nitrógeno: Peptona de Gelatina, Extracto de Levadura, Lisina
B. Requerimiento no energético:
Fuente de azufre: Tiosulfato de Sodio
Iones metálicos: Citrato de Hierro y Amonio.
C. Según su proporción en agua: Semisólido.
D. Según su uso o utilización: Diferencial
E. Según la composición que presenta: Sintética.
F. Según su presentación: Agar semi-inclinado o Pico de flauta
G. Indicador: Púrpura de Bromocresol.

3. MICROORGANISMO
Lo primero que ocurrirá la fermentación de la glucosa, donde después de 10 a 12 horas se colorearán de
color amarillo.
Descarboxilación de la lisina: Si al finalizar el tiempo de incubación:
- Reacción positiva: Se observa que el fondo y la superficie del tubo son completamente púrpuras
- Reacción negativa: Se observa un fondo amarillo con una superficie morada, la cual corresponde
a la alcalinización del medio por el uso de las peptonas.

Desaminación de la lisina: Es positiva cuando la superficie es de color rojiza granate y un fondo

amarillo o todo el tubo se coloreará de color rojizo.
Producción de sulfuro de hidrógeno: Una reacción positiva se observa por la aparición de un
precipitado negro.
 AGAR PEPTONADO

1. COMPOSICIÓN
Peptona de Carne 1.5g/L
Peptona de Gelatina 17g/L
Tripteina 1.5g/L
Lactosa 10g/L
Mezcla de Sales biliares 1.5g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Rojo Neutro 0.03g/L
Cristal violeta 0.001g/L
Agar 13.5g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Lactosa
Fuente de nitrógeno: Peptona de Carne, Peptona de Gelatina.
B. Requerimiento no energético:
Ion metálico: Cloruro de Sodio.
Inhibidor: Sales Biliares, Cristal Violeta.
Indicador: Rojo neutro
C. Según su proporción en agua: Sólido.
D. Según su uso o utilización: Aislamiento.
E. Según la composición que presenta: Semisintético
F. Según su presentación: Sólido en tubo.

3. MICROORGANISMO:
Se usan para aislar a Salmonella y Coliformes.
 AGAR CITRATO DE SIMMONS

1. COMPOSICIÓN
Citrato de Sodio 2g/L
Azul de Bromotimol 0.08 g/L
Fosfato Monoamónico 1g/L
Fosfato Dipotásico 1g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Agar 12.5 g/L
Sulfato de Magnesio 0.2 g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de nitrógeno: Fosfato de Amonio.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de Azufre: Sulfato de Magnesio.
Fuente de Fósforo: Fosfato Monoamónico.
Iones Metálicos: Cloruro de Sodio, Citrato de Sodio.
C. Según su proporción en agua: Sólido.
D. Según su uso o utilización: Selectivo. Diferencial.
E. Según la composición que presenta: Sólido en tubo.
F. Según su presentación: Sintético.

3. MICROORGANISMOS
Una vez pasado el periodo de incubación, se observará lo ocurrido en el agar:
Resultado positivo: Se observará un cambio de color de verde a azul. Como, por ejemplo:
Klebsiella pneumoniae, Salmonellatyphimurium, Pseudomonas aeruginosa.
Resultado negativo: No se observará desarrollo ni cambio de pH. Como, por ejemplo: Escherichia
coli, Shiguella flexneri.
 AGAR UREA
1. COMPOSICIÓN
Tripteína 1g/L
Glucosa 1g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Fosfato Monopotasico 2g/L
Agar 15g/L
Rojo Fenol 0.02 g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Glucosa.
Fuente de nitrógeno: Tripteína.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de fósforo: Fosfato de Monopotasico.
Ion metálico: Cloruro de Sodio.
Indicador: Rojo Fenol.
C. Según su proporción en agua: Sólido.
D. Según su uso o utilización: Identificación.
E. Según la composición que presenta: Sintético.
F. Según su presentación: Medio sólido en tubo.

3. MICROORGANISMOS
Microorganismos que hidrolizan la urea: Se observará de un color rosado-rojizo. Como, por
ejemplo: Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae.

Microorganismos que no hidrolizan la urea: Se observará de color amarillo. Como, por ejemplo:
Escherichia coli, Salmonellamtyphimurium.
 AGAR SIM (SULFIDE INDOLE MOTILITY)
1. COMPOSICIÓN
Tripteína 20g/L
Peptona 6.1g/L
Tiosulfato de Sodio 0.2g/L
Sulfato de Hierro y Amonio 0.2g/L
Agar 3.5 g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de nitrógeno: Tripteína, Peptona.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de azufre: Sulfato de Hierro y
Amonio, Tiosulfato de Sodio.
C. Según su proporción en agua: Sólido.
D. Según su uso o utilización: Diferenciación.
E. Según la composición que presenta:
Semisintético.
F. Según su presentación: Sólido en tubo.

3. MICROORGANISMOS:
Movilidad:
- Resultado positivo: Se presencia de turbidez o crecimiento más allá de la línea de siembra.
- Resultado negativo: Se observa crecimiento solo en la línea de siembra.

Producción de ácido sulfhídrico:

- Resultado positivo: Se observa un ennegrecimiento del medio de cultivo a lo largo de la línea de
siembra o en todo el medio.
- Resultado negativo: El medio no cambia de color
 AGAR MR-VP (ROJO METILO-VOGES PROSKAUER)
1. COMPOSICIÓN
Pluripeptona 7g/L
Glucosa 5g/L
Fosfato dipotásico 5g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Glucosa.
Fuente de nitrógeno: Pluripeptona.
B. Requerimiento no energético:
Factor de fósforo: Fosfato dipotásico.
C. Según su proporción en agua:
Semisólido.
D. Según su uso o utilización:
Diferenciación.
E. Según la composición que presenta:
Semisintético.
F. Según su presentación: Semisólido en tubo

3. MICROORGANISMO
Prueba de Rojo de Metilo:
- Resultado positivo: Se observa una coloración roja.
- Resultado negativo: Se observa una coloración amarilla.

Prueba de Voges Proskauer

- Resultado positivo: Se observa un color rojo, después de la agitación.
- Resultado negativo: Ausencia de color rojo.
 AGAR BHI (BRAIN HEART INFUSION)

1. COMPOSICIÓN
Infusión Cerebro de Ternera 20g/L
Fosfato Disódico 2.5g/L
Infusión Corazón de Res 25g/L
Peptonas 10g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Glucosa 2g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Glucosa
Fuente de nitrógeno: Infusión de Cerebro de Ternera, Corazón de Res, Peptonas.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de fósforo: Fosfato disódico.
Iones metálicos: Cloruro de Sodio.
C. Según su proporción en agua: Sólido
D. Según su uso o utilización: Crecimiento General.
E. Según la composición que presenta: Semisintético.
F. Según su presentación: Sólido en tubo.

3. MICROORGANISMOS:
Escherichia coli
Staphylococcus aureus
Candida albicans
 AGAR FENILALANINA
1. COMPOSICIÓN
Extracto de Levadura 3g/L
Di-Fenilalanina 2g/L
Fosfato Disódico 1g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Agar 12g/L
Cloruro Férrico 10% 4 a 5 gotas

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de nitrógeno: Di-Fenilalanina, Extracto de Levadura.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de fósforo: Fosfato Disódico.
Iones metálicos: Cloruro de Sodio.
Factores de crecimiento o arranque: Extracto de levadura.
C. Según su proporción en agua: Sólido.
D. Según su uso o utilización: Identificación.
E. Según la composición que presenta: Semisintético (-) Echerichia coli
F. Según su presentación: Medio semisólido en tubo.
G. Indicador externo: Fenilalanina (+) Proteus Mirabilis

3. MICROORGANISMOS:
El aminoácido fenilalanina es sometido a la desaminación oxidativa catalizada por la enzima fenilalanina
desaminasa, para producir fenilpirúvico y amoniaco.

Positivo: Se visualiza de color verde-azulado pálido al intenso en el pico de flauta y en el líquido de

condensación. Como ejemplo tenemos: Proteus mirabilis, Morganella morganii.
Negativo: Sin cambios de color. El medio permanece amarillo debido al color del reactivo. Como,
por ejemplo: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae.
 AGAR MIO (MOVILIDAD-INDOL-ORTININA)
1. COMPOSICIÓN
Extracto de Levadura 3g/L
Peptona de Caseína 10g/L
Triptona 10g/L
Dextrosa 1g/L
L-Ortinina HCl 5g/L
Púrpura de Bromocresol 0.02g/L
Agar Bacteriológico 2g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Dextrosa, Triptona.
Fuente de nitrógeno: Peptona de Caseína, Extracto de Levadura.
B. Requerimiento no energético:
Factor de crecimiento o arranque: Extracto de Levadura.
C. Según su proporción en agua: Semisólido.
D. Según su uso o utilización: Identificación.
E. Según la composición que presenta: Semisintético
F. Según su presentación: Semisólido en tubo.
G. Indicador: Púrpura de Bromocresol.
H. Indicador externo: Indol.

3. MICROORGANISMOS
Según su movilidad
Resultado positivo: Se observa una turbidez o crecimiento más allá de la línea de siembra. Como,
por ejemplo: Echerichia coli, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Salmonella serovar Newport.
Resultado negativo: Se observa un crecimiento solamente en la línea de siembra. Como, por
ejemplo: Klebsiella pneumoniae.
Según la detección de la enzima ortinina descarboxilasa.
Resultado positivo: Se ve una coloración púrpura. Como, por ejemplo: Escherichia coli, Proteus
mirabilis, Enterobacter cloacae, Salmonella serovar Newport, Shiguella sonnei.
Resultado negativo: Se ve una coloración amarilla, a veces puede llegar a tener un color violáceo
en la superficie del medio. Como, por ejemplo: Klebsiella pneumoniae, Shiguella flexnen.
Prueba de Indol
Resultado positivo: Se ve una coloración roja. Como, por ejemplo: Escherichia coli.
Resultado negativo: Se ve el color del reactivo revelador permanece incoloro-amarillento. Como,
por ejemplo: Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Shiguella flexnen.

A: Tubo inoculado
B: Prueba de indol negativo: Shiguella flexnen
C: Prueba de indol positiva: Escherichia coli
D: Sí móvil/Ornitina positiva: Salmonella
serovar Newport
E: No móvil/Ornitina negativa: Shiguella
flexnen
F: No móvil/Ornitina positiva: Shiguella sonnei
 AGAR NITRATO
1. COMPOSICIÓN
Extracto de Carne 5g/L
Nitrato Potásico 1g/L
Peptona de Carne 10g/L
Cloruro Sódico 5g/L
Ácido Sulfamínico 8g/L
Alfa-naftilamina 5g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de nitrógeno: Extracto de carne, Nitrato Potásico, Peptona de carne.
B. Requerimiento no energético:
Iones metálicos: Cloruro sódico.
C. Según su proporción en agua: Semisólido.
D. Según su uso o utilización: Identificación.
E. Según la composición que presenta: Sintético.
F. Según su presentación: Líquido en tubo.
G. Indicador externo: Ácido sufaminico y Alfa-naftilamina.

3. MICROORGANISMOS
Se usa para confirmar la utilización de nitrato. Identifica a aquellas capaces de reducir nitrato a nitrito.

Resultado positivo: Si los nitratos han sido reducidos, el caldo de cultivo mostrará un color rojo
intenso por la presencia de nitritos. Como, por ejemplo: Salmonella tyohimurium, Escherichia coli,
Pseudomona aeuroginosa.
Resultado negativo: Si todo el nitrato ha sido reducido hasta nitrógeno, no se revelará la presencia
de nitritos, en cambio se observará burbujas de nitrógeno. Como, por ejemplo: Enterococcus
faecalis.
 AGAR KIA (KIGLER HIERRO AGAR)
1. COMPOSICIÓN
Peptona de Carne 13g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Lactosa 10g/L
Tripteína 10g/L
Glucosa 1g/L
Citrato de Hierro y Amonio 0.5g/L
Tiosulfato de Sodio 0.3g/L
Rojo de Fenol 0.025g/L
Agar 15g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de carbono: Lactosa, Glucosa
Fuente de nitrógeno: Peptona de Carne, Tripteína.
B. Requerimiento no energético:
Fuente de azufre: Tiosulfato de Sodio
Iones metálicos: Citrato de Hierro y Amonio.
Factor de arranque: Glucosa y Fructosa.
Factor inhibidor: Cloruro de Sodio.
C. Según su proporción en agua: Sólido
D. Según su uso o utilización: Diferencial
E. Según la composición que presenta: Sintético.
F. Según su presentación: Agar semi-inclinado o Pico de Flauta.
G. Indicador: Rojo de Fenol.
3. MICROORGANISMO
Fermentadores de lactosa y glucosa:
- No hay fermentación: El medio se acidifica y se observa una coloración roja.
- Fermentación de glucosa: El fondo del tubo se torna amarillento y la superficie se mantiene roja.
Como, por ejemplo: Proteus vulgaris, Shiguella flexneri, Salmonella entenritidis.
- Fermentación de lactosa: Tanto el fondo como superficie se observa una coloración amarillenta.
Como, por ejemplo: Citrobacter freundii, Escherichia coli.
Formadores de ácido sulfhídrico:
- Formador de gas: Se visualiza burbujas o la ruptura del agar. Como, por ejemplo: Citrobacter
freundii, Escherichia coli, Salmonella enteritidis.
- Sulfuro de hidrógeno: Se visualiza un precipitado negro. Como, por ejemplo: Citrobacter freundii,
Proteus vulgaris, Salmonella enteritidis.

Tubo virgen Citrobacter Escherichia Shigella Salmonella

freundii coli flexneri enteritidis
 AGAR O-F O HUGH LEIFSON
1. COMPOSICIÓN
Tripteína 2g/L
Cloruro de Sodio 5g/L
Fosfato dipotásico 0.30g/L
Azul de bromotimol 0.03g/L
Agar 2.5g/L

2. DESCRIPCIÓN DEL MEDIO

A. Requerimiento energético:
Fuente de nitrógeno: Tripteína
B. Requerimiento no energético:
Fuente de fósforo: Fosfato Dipotásico.
Factores Inhibidores: Cloruro de Sodio.
C. Según su proporción en agua: Semisólido.
D. Según su uso o utilización: Aislamiento.
E. Según la composición que presenta: Semisólido en tubo.
F. Según su presentación: Semisintético,
G. Indicador: Azul de bromotimol.

3. MICROORGANISMO

Fermentadores de azúcares:
- Resultado positivo: Se observa un color amarillento. Como, por ejemplo: Enterobacter
aerogenes, Escherichia coli, Salmonella typhi, Shiguella sonnei.
- Resultado negativo: Ausencia de color amarillo, el medio permanece verde o se vuelve azul.
Como, por ejemplo: Pseudomona aeruginosa.
1: Tubo no inoculado
2: Enterobacter aerogenes
3: Escherichia coli
4. Pseudomona aerogenes
5. Salmonella typhi
6. Shiguella sonnei