CITOESQUELETO

ENSAMBLAJE, ESTRUCTURA Y REGULACIÓN

Participa en todas las funciones de la célula. Es una estructura muy dinámica y adaptable.
Como función principal tiene la organización espacial interna: ordena y distribuye las organela, participa en el tráfico de
vesículas, etc. También es importante para la interacción célula-entorno y participa en algunas respuestas de señalización.
Tipos de filamentos
● Microfilamentos: constituidos por actina. El grosor va de 5 a 9 nm. Da forma y locomoción de la célula
● Microtúbulos: constituidos por tubulina. El grosor de 25 nm. Participa en el transporte, locomoción intracelular, y en
la movilidad de estructuras particulares.
● Filamentos intermedios: constituidos por varias proteínas. Relacionado con la resistencia mecánica de la célula.
La interacción de estos tres tipos de filamentos le da la estructura mecanico-funcional a una célula.
Ensamblaje: Las subunidades de estos filamentos se ensamblan por proceso de polimerización, por uniones no covalentes,
en una estructura helicoidal termodinámicamente favorable. Las propiedades del ensamble va a depender de las
subunidades.
Diferencias entre microfilamentos/microtúbulos y filamentos intermedios: Los subunidades de los primeros son proteínas
globulares que se ensamblan siguiendo un patrón cabeza-cola y tienen polaridad. En cambio, los monómeros de los
filamentos intermedios son tetrámeros compuestos por varias proteínas fibrosas y globulares que se ensamblan en forma
antiparalela, por lo que es no polar.
Las distintas subunidades forman protofilamentos que interaccionan y forman filamentos. Para formar los protofilamentos
difieren en la cantidad de subunidades intervinientes lo que da diferentes propiedades mecánicas.
Cinética de formación de filamentos: La dinámica dependerá del control sobre el proceso de polimerización-
despolimerización. La velocidad de crecimiento o polimerización va a depender de la constante de asociación y de la
concentración de subunidades libres. La velocidad de acortamiento va a depender solo de la constante de disociación. La
célula gobierna las velocidades con:
➔ Nucleo minimo: En estructuras helicoidales hay más interacciones entre subunidades lo que contribuye a una mayor
estabilidad, menor constante y mayor velocidad. El núcleo mínimo constituye la mínima cantidad de subunidades a
partir de la cual aumenta la máxima velocidad. De esta manera, con la nucleación se controla la velocidad de
polimerización.
➔ Concentración crítica: Concentración en la que la velocidad de polimerización y despolimerización es la misma y se
dice que se encuentra en estado estacionario. Matemáticamente es una relación de constantes. La célula regula las
velocidades con la concentración de monómeros de manera que si la cc es mayor a la crítica, la velocidad de
polimerización es mayor y viceversa.
➔ Polaridad de polimerización: por naturaleza de los filamentos un extremo tiene mayor velocidad de polimerización
que otro lo que determina la dirección de crecimiento.
➔ Nucleótidos trifosfato: (Actina: ATP/ADP; Tubulina:GTP/GDP) Modulando la cantidad de ADP o GDP se gobierna la
polimerización dado que el monómero con el NTP tiene más afinidad por el filamento que el NDP. (Si hidrolizo el
nucleótido no polimeriza)

Microtúbulos
El monómero está compuesto por α-tubulina y β-tubulina unidas por interacciones no covalentes y un nucleótido GTP
retenido entre estas que no es hidrolizado y otro GTP unido a la β-tubulina que va a ser hidrolizado para formar el
protofilamento. El dímero polimeriza en forma cabeza-cola hidrolizando GTP y forma el protofilamento. Tiene polaridad: el
extremo α-tubulina o extremo - y el β-tubulina o extremo +.

Microfilamentos
Monómero de actina G formado por α-actina, β-actina y γ-actina unidas por interacciones no covalentes y un nucleótido ATP
retenido entre estas. Polimeriza y forma el protofilamento Actina F. Tiene polaridad: el extremo + es el que tiene mayor
velocidad de crecimiento que el extremo -

Intercambio rotatorio: La concentración crítica (CC) del extremo + es menor a la del extremo -. Si la célula se encuentra en
una cc entre estas, (CC(+) < cc < CC(-)) el extremo + va a polimerizar y el - va a despolimerizar. Ocurre principalmente en
microfilamentos
Inestabilidad dinámica: Ocurre principalmente en microtúbulos. La CC en el extremo + es menor cuando el monómero se
encuentra unido a GTP que a GDP (CC+(T)<CC+(D)). Si la célula se encuentra en una cc cercana a la CC+(T) la velocidad de
hidrólisis y polimerización son similares. A medida que polimeriza se hidroliza el GTP hasta que hay pérdida del casquete GTP.
Como la CC+(D) es mayor a la cc se despolimeriza y ocurre lo que se denomina catástrofe hasta que se logra incorporar el
casquete de GTP y comienza a crecer otra vez lo que se conoce como rescate.

Fármacos que alteran el citoesqueleto:

➔ Latrunculina secuestra la actina monomérica -> disminuye la cc de actina libre -> debajo de la CC ->
despolimerización.
➔ Faloidina se une a la Actina F e impide la despolimerización. Si utilizo faloidina-FITC se ve solo la actina polimerizada
en verde (porque no se utilice a la actina G)
➔ Citocalasina: Se une al extremo + de la actina G y bloquea la despolimerización.
➔ Taxol: Estabiliza los microtúbulos
➔ Vincristina y Vinblastina: se une a subunidades de los microtúbulos e impide la polimerización

PROTEÍNAS ACCESORIAS

Regulan la polimerización mediante:

MICROTÚBULOS MICROFILAMENTOS

Nucleación La tubulina γ forma lo que se llama el
anillo complejo de γ tubulina (γTuRC)
el cual genera el núcleo mínimo en el
extremo -. Se encuentra en el
centrosoma que contiene los
centriolos.
La ARP genera la nucleación en el extremo - y permite la
polimerización en forma ramificada (ya que puede unirse
también al filamento polimerizado) hacia el extremo +.
La formina se une al extremo + y favorece la polimerización en
este sentido

Concentración La estatmina se une a los monómeros
crítica de α β tubulina y regulan su
concentración efectiva. Además,
favorecen la inestabilidad dinámica.
Son regulados a su vez por
fosforilaciones.
La timosina se une a los monómeros de actina y los bloquean
impidiendo la polimerización. Impiden la hidrólisis e intercambio
de ATP y la asociación de monómeros. Disminuye la
concentración efectiva de actina.
La profilina se une en la cara opuesta y desplaza a la timosina,
impide la nucleación espontánea (para controlar la
polimerización) y dirige la polimerización. Se activa en respuesta
a un estímulo.

Polaridad γTuRC se une en el extremo – y ARP y Tropomodulina se unen al extremo – y favorece la

favorece la polimerización hacia el polimerización hacia el extremo +.
extremo +. Cap Z se une al extremo + y estabiliza la F-actina
 MAP se une al extremo + y estabiliza
el protofilamento.

Nucleótidos GTP/GDP ATP/ADP

trifosfato

Proteínas de Catanina requiere ATP para cortar al
unión lateral microtúbulo y deja al extremo + libre
y favorece la despolimerización.
MAP 2 se unen lateralmente y alinea
los microtúbulos.
Gelsolina se activa por Ca2+ y se une lateralmente cuando el
microfilamento se abre. Favorece la despolimerización
Tropomiosina se dispone sobre todo el filamento de actina y
bloquea el sitio de unión de la miosina.
Cofilina desestabiliza los filamentos de actina y favorece la
despolimerización enrollándolo y disminuyendo, de esta
manera, la interacción entre monómeros.

Proteínas de entrecruzamiento:
Determina la disposición de la F actina en haces o redes. Las que forman haces:
➔ α-actininina:El dominio que separa los filamentos es de 30 nm; este espacio permite que ingresen las proteínas
motoras. Por esto, forman haces contráctiles
➔ Fimbrina: El dominio que separa los filamentos es de 14 nm forma un empaquetamiento apretado que impide la
entrada de la miosina por impedimento estérico. Forman haces paralelos (por ejemplo, en microvellosidades)
Las que forman redes:
➔ Filamina: 160 nm de distancia y flexible. Permite la disposición perpendicular de los filamentos
➔ Espectrina

Proteínas motoras: Tienen un cabeza y cola. En la cabeza presenta el dominio motor que ejerce el cambio conformacional a
partir de la unión a ATP y la cla da la especificidad de la carga a transportar.
➔ Miosina: En microfilamentos. Se desplazan hacia el extremo + (excepto la miosina 6). La miosina 1 en la
microvellosidad relacionada principalmente con la organización intracelular. La miosina 2 relacionada con la
contracción muscular, citocinesis y migración. Miosina 5 involucrada en transporte de organelas y vesículas.
Desplazamiento según ciclo del ATP
-Sin nucleótido: Miosina fuertemente unida al microfilamentos. A esta etapa de la llama Rigor
-ATP: Une ATP y ocurre un cambio de afinidad por la que la miosina se libera del filamento.
-ADP/Pi: Tras la hidrólisis de ATP la miosina cambia su conformación y se desplaza. Interacciona débilmente con el filamento
y libera el Pi
-ADP: Se une con mayor afinidad al microfilamento que provoca la liberación de ADP. El ciclo vuelve a comenzar
➔ Quinesinas : En microtúbulos. Se desplazan hacia el extremo + (excepto la quinesina 14). La quinesina 1 involucrada
en transporte de organelas y vesículas. La quinesina 3 en el transporte de organelas. La quinesina 5 en el
desplazamiento bipolar de microtúbulos. La quinesina 13 (con dominio motor en el centro de la cadena
aminoacídica) es el factor de catástrofe que se une lateralmente y genera la tensión para romper el protofilamento,
inestabilidad dinámica y despolimerización.
Desplazamiento:
A diferencia del desplazamiento de la miosina, la quinesina es coordinada y permanece constantemente unida al
microtúbulo. Por esto, el desplazamiento de la quinesina es más lenta.
 ➔ Dineinas: En microtúbulos. Se desplazan rápidamente hacia el extremo -. Hay dos familias: citoplasmáticas
(homodímeros: 2 dominios motores) y axonemales, involucradas en el axonema de cilias y flagelos (Heterotrimeros:
3 dominios motores)

FUNCIONES DEL CITOESQUELETO

❖ Transporte de organelas - Vesículas: Ejemplos:

-Al RE transporta la quinesina y al Golgi la dineina. Puesto que el
extremo - de los microtúbulos en encuentra en el centro de la célula
en el centro organizador de los microtúbulos; y que la quinesina
transporta hacia el extremo + y la dineína hacia el extremo -; el Golgi
va a estar desplazado hacia el extremo - cerca de centro organizador
de microtúbulos, cerca del núcleo, y el RE hacia la MP. La localización
del Golgi involucra citoesqueleto y proteínas motoras.
-Un complejo con dineína, espectrina, y un pequeño microfilamento
unido al microtúbulo transporta las vesículas
-Vesículas con melanina de los melanocitos son transportados a los extremos de la células y las cede a los queratinocitos. En
este transporte está involucrada la miosina 5
❖ Mitosis: Forma el huso mitótico que va a separar las cromátidas hermanas en la anafase
❖ Transporte de mRNA a un sitio específico de la célula: Con esto se logra la polaridad en la expresión de una
determinada proteína, importante en la embriología.
❖ Músculo: Estructura del citoesqueleto especializada que se llama Sarcómero y permite la contracción muscular
❖ Cilios y flagelos.

Estructuras de la actina: (Que se forma uno u otro va a depender de proteínas accesorias)

-Fibras estrés: protofilamentos paralelos. Son estructuras contráctiles
-Lamelipodio: Actina polimerizada en forma de red. Están involucradas la profilina que desplaza a la timosina, la ARP, filamina
y cofilina y gelsolina que polimeriza un extremo y despolimeriza el otro generando el movimiento mecánico.
-Filopodios
❖ QUIMIOTAXIS o Desplazamiento de una célula sobre sustrato: La célula genera un Lamelipodio (red de actina), su
citoplasma es empujado hacia adelante por Fibras estrés (haces paralelos contráctiles con miosina 2) donde genera
nueva uniones con la matriz mientra se desarman otras hacia atrás.
Para determinar el tipo de organización de la actina se activan por diversas señales las GTPasas monoméricas: Cdc42 que
estimula la formación de filopodios; Rac activa un complejo que genera los lamelipodios; y Rho favorece la formación de
fibras de estrés y la activación de miosina 2.
Las bacterias generan un gradiente de ligando o quimioatractante. Por
este gradiente, se activan receptores en los linfocitos que generan una u
otra respuesta. Donde hay mayor quimioatractante (cercano a la bacteria)
se desencadena la vía PI3K que
activa Rac y genera el lamelipodio.
A menor gradiente se activa la Rho y
se produce la contracción de las
fibras contráctiles. A su vez, la Rac
y Rho se inhiben mutuamente.