ELEMENTOS TEÓRICOS I

GENÉTICA HUMANA
JUAN JOSE YUNIS LONDOÑO, MD
PROFESOR TITULAR
DEPARTAMENTO DE PATOLOGÍA
FACULTAD DE MEDICINA
UNIVERSIDAD NACIONAL DE COLOMBIA
jjyunisl@unal.edu.co

Subdirector
Servicios Médicos Yunis Turbay y Cia
Kra 24 # 42-24, Bogotá D.C.
PBX 2329622
jjy@yunis.com.co
 Genética
• Ciencia que estudia las características
heredables entre individuos y a nivel
poblacional.
 Célula
• Unidad básica en los seres vivos.
• Unicelulares y pluricelulares
• Núcleo, citoplasma, organelas,
mitocondrias, membrana celular.
• Cromosomas (ADN nuclear)
• ADN mitocondrial
CICLO CELULAR
 Mitosis
• Proceso mediante el cual la célula duplica
su material genético previo a la división
celular para asegurar que cada célula hija
contenga la misma cantidad de ADN.
MITOSIS
 Biología del Ser Humano

• Todo ser humano tiene 46 cromosomas

• Distribuidos en 23 pares (1, 2, 3, etc)
• Un par de cromosomas sexuales (XX, XY).
• Todo óvulo ó espermatozoide tiene solo 23
cromosomas (haploide).
• Todos los óvulos tienen cromosoma X.
• Los espermatozoides portan cromosoma X
ó cromosoma Y.
Cariotipo Normal XY
Paterno Materno

Paterno
Materno
Cariotipo 46 XX

Materno Paterno
 Genética del Ser Humano
• Todo individuo recibe 23 cromosomas de
cada progenitor.
• Aporte Genético cromosómico de todo
individuo es 50% materno y 50% paterno.
• Características genéticas heredadas en
un individuo tienen herencia Mendeliana.
Cariotipo Espermatozoide con
Y
Cariotipo Espermatozoide con
X
Cariotipo de Óvulo (X)
MEIOSIS
Meiosis
GAMETOGENESIS
 ADN en la célula
cromosoma

Núcleo
celular

Molécula de
ADN de doble
cadena

Nucleotidos
individuales
 ADN
• Acido desoxirribonucléico. Cadenas
antiparalelas.
• Esqueleto Azúcar y Fosfato.
• Bases Nitrogenadas
– Adenina A Timidina T
– Guanina G Citosina C
Purinas Pirimidinas
• ACGT, código genético.
Molécula de ADN
Esqueleto de la Molécula de
ADN
Nucleotidos
Replicación del ADN
Replicación del ADN implica el apareamiento de bases siguiendo las reglas de Chargaff

El apareamiento de nucleótidos es muy importante para la reparación del ADN

 ADN en la célula
cromosoma

Núcleo
celular

Molécula de
ADN de doble
cadena

Nucleotidos
individuales
DNA porta la información que permite
a la célula elaborar proteínas

Cromosomas

ADN codificante (2% genoma) Genes

ADN no codificante (mayoría)

 Estructura de un Gen

Gen:
Secuencia de ADN que codifica para una proteína completa.
En el gen hay segmentos denominados exones (codificantes) e intrones,
Secuencias que separan a los exones (no codifican).
 RNA (Ácido Ribonucléico)
Otra molécula de ácidos nucléicos

Se diferencia del ADN en varios aspectos:

Cadena única (No es doble cadena)
Nucleótidos son A, G, C y U (Uracilo)
Sale del núcleo de la célula al citoplasma (mensajero mRNA)
Lleva información exclusiva de secuencias codificantes
(proteinas)
Se produce en un proceso denominado TRANSCRIPCIÓN
Solo se produce con base en las necesidades de la célula (ej:
insulina)
Vida media corta (no es permanente)
Se sintetiza cada vez que se requiera
Secuencia de 3 nucleótidos del mRNA denomina CODÓN.
Destino es Ribosoma (fábrica de proteínas de la célula)
Transcripción

mRNA

Ribosomas

Traducción

Proteínas
 Terminología
• Gen: Unidad genética que codifica la síntesis de
una proteína.
• Alelo: Variantes de un mismo gen en la
población (formas alternas).
• Genes constitutivos.
• Genes polimórficos.
• Genotipo y Fenotipo.
• Homocigoto y Heterocigoto.
• Herencia Dominante, Codominante y Recesiva.
 Genotipo Vs Fenotipo
• Genotipo
• Constitución genética de un individuo.
• Material genético heredado de los padres.
• Genotipo incluye ADN codificante y no
codificante.
 Fenotipo
• Manifestación del genotipo.
• Características visibles
• Factores que afectan el fenotipo
• Dominancia
• Recesividad
• Codominancia
• Medio ambiente
Gregor Johann Mendel
• Monje Austriaco.
• Nacido en Brünn.
• 1822-1884.
• 1866 Publica sus
experimentos en
Hibridización de plantas.
• Proceeedings of the Natural
History Society of Brünn.
“Versuche über Pflanzen-
Hybriden” .
 Gregor Mendel

Guisante de Jardín Pisum sativum.

7 Caracteres heredables
– Semilla Redonda Vs. Arrugada
– Cotiledón Amarillo Vs. Verde
– Flor Blancas Vs. Violetas
– Cascara Lisa Vs. Rugosa.
– Cascara Amarilla Vs. Verde
– Planta Alta Vs. Enana
– Tallo Axial Vs. Terminal
 Leyes de Mendel
Primera Ley ó Ley de la segregación de los
alelos

Cada Gameto recibe un solo alelo de la

célula progenitora (meiosis).

La unión de los dos gametos, restablece el

número de alelos al valor normal.
 1a Ley de Mendel (STR F13AO1)

STR- F13AO1

Hombre Mujer
Genotipo 7/4 5 / 3.2
Gametos 7 4 5 3.2

Hijos 7 / 5 7 / 3.2 5 / 4 4 / 3.2

 Leyes de Mendel
Segunda Ley ó Ley de la segregación
Independiente.

Los alelos de un gen se segregan en forma

independiente de los alelos de otro gen.
2a Ley de Mendel (Grupos Sanguíneos)
Hombre Mujer
A A D D B B d d
Genotipo I I I I I I II
Gametos IAID IBId
A B D d A B D d
Hijos I I I I I I I I
Hijo 1 Mujer
Genotipo IAIBIDId IBIOIDId
A D A d B D B d
Gametos I I I I I I I I
B D B d O D O d
I I I I I I I I
 Gregor Mendel
Conclusiones:
• Cada planta tiene dos determinantes para
cada característica (genes).
• Un solo alelo de cada determinante (gen)
se segrega a cada gameto.
• Para dos determinantes (genes), los alelos
de cada uno de ellos se segrega en forma
independiente.
 Marcadores Polimórficos

• Marcador genético
• Gen -Secuencia de ADN
• Gen: Unidad Genética codificante.
• Exón e Intron:
• ADN Codificante. -ADN No codificante
• ADN Codificante:
• Grupos Sanguíneos: ABO, Rh, MNSs, etc.
• HLA: HLA-A, HLA-B, HLA-DRB, HLA-DQB1, HLA-DQA1
• ADN No codificante: Huella Genética
 Polimorfismo
Grupos Sanguineos ABO
Grupo Genotipo
Sanguíneo
O IOIO Homocigoto

A A A O Homocigoto,
A I I ,I I
Heterocigoto
B B B O Homocigoto,
B I I ,I I
Heterocigoto
A B Heterocigoto
AB I I
 Herencia Dominante

A/a a/a

A/a

a/a a/a
a/a A/a A/a
A/a A/a
 Herencia Dominante

Fenotipo
 Herencia Cual
Recesiva
es la probabilidad
Características de las De que los padres de la paciente
Enf. Recesivas? Tengan otro hijo con la enfermedad?

Como es el genotipo
de los afectados B/b B/b
y de los sanos?

b/b

B/B
Herencia Recesiva
Fenotipo
50% 50%
• Los restos microscópicos que
cubren nuestra ropa y nuestros
cuerpos son testigos mudos,
seguros y fieles, de nuestros
movimientos y nuestros
encuentros.

Edmund Locard, Profesor de Criminalística,

Lyon Francia 1877-1966
 Teoría de la Transferencia de
Locard
• Cuando dos objetos entran en contacto,
trazas de uno serán transferidos al otro
y viceversa. Las trazas pueden no
siempre ser detectadas (depende de la
capacidad técnica del momento) pero
siempre están presentes.
• Edmund Locard, Profesor de
Criminalística, Lyon Francia 1877-1966
 Pruebas de Identificación
Humana
• Casos Forenses -- Comparar al sospechoso
con la evidencia
• Pruebas de Paternidad y/o Maternidad.
• Investigaciones Históricas
• Identificación de Desaparecidos
• Desastres en Masa -- Armar el rompecabezas
• Identificación Militar
• Bases de datos de convictos
 Documentación
• Formato de Consentimiento
• Nombres, direcciones,
• Documento de identidad.
• Fotografía de las partes.
• Huellas Dactilares (pentadactilar).
• Cadena de Custodia.
 Fuentes de Evidencia
• Sangre Biológica
• Semen
• Saliva
• Orina
• Cabellos
• Diente
• Huesos
• Tejido

Colilla de cigarrillo, goma de mascar, caspa, uñas, puño y cuellos de camisas, materia
fecal, vómito, estampillas, vasos, botellas, teléfonos, perillas de las puertas,
computador, prendas íntimas, vello púbico, almohadas, cepillo de dientes,
máquina de afeitar, guantes, estropajo, pañuelo, ………………
 Estudios de Paternidad
• Propósito

• Identificar si un individuo es el padre

biológico de un menor ó si ha sido
falsamente acusado de la paternidad.
 Casos de Paternidad
• Trío típico

• Individuo que desea confirmar una

paternidad sin el concurso de la madre.

• Identificar si un individuo fallecido era el

padre biológico de una persona y se
cuenta con abuelos paternos
 Casos de Sucesiones

• Exhumación de los restos del demandado.

• Reconstrucción Genética del Demandado.

– A mayor número de familiares directos del
demandado mayor será la posibilidad de obtener
un resultado.
– Hijos legítimos y Viuda, Hermanos, Padres, etc.
 Sucesiones

• Demandante es un
hombre y hay
descendientes varones
del demandado
– STR de Cromosoma Y
– Marcadores STR
Autosómicos.
– HLA
– VNTR
 Proceso Básico
Pruebas de Paternidad
Trio (Presunto padre, Madre y Menor).
• Para cada marcador genético, que
comparte el menor con la madre.
• Lo restante en el menor, está presente en
el padre ó no.
• No está presente: Paternidad Excluida
• Presente: Inclusión. probabilidad de la
compatibilidad.
 Documentación
• Formato de Consentimiento
• Documento de identidad.
• Fotografía de las partes.
• Huellas Dactilares (pentadactilar).
• Cadena de Custodia.
 Reporte
• Identificación de las Personas.
• Tipo de Pruebas Practicadas. Reactivos
validados.
• Resultados obtenidos.
• Interpretación.
• Cálculos Probabilísticos de Paternidad
– Índice de Paternidad Acumulado.
– Probabilidad Acumulada de Paternidad
 Requisitos Ley 721 de 2001
Decreto 2912 de 2003

• Laboratorios Habilitados.
– Secretarías de Salud Distritales o
Departamentales

• Laboratorios Certificados ISO 9001:2008

– Entidades Certificadoras

• Laboratorios Acreditados: ISO 17025:2005

– ONAC: Organismo Nacional de Acreditación
 Requisitos en Estudios de
Paternidad

• Frecuencias poblacionales de los

marcadores en Estudio.
• Estricto Control de Calidad en las
Pruebas Realizadas.
• Poder de Exclusión > 99.99%
• Probabilidad de Inclusión superior al
99.99%.
• Pruebas de Control de Calidad Externas
 Recomendaciones
Internacionales
• Poder de Exclusión
• Probabilidad de excluir a todo individuo
falsamente de una paternidad.
• 100 %
• Probabilidad de Inclusión
• Probabilidad de que el presunto padre sea de
hecho el padre comparado con cualquier
hombre de la población general.
• Valor > 99.9%
 Recomendaciones
Internacionales
• Laboratorios Acreditados.
• Personal Idóneo.
• Reactivos Validados y estandarizados.
• Estricto Control de Calidad.
• Estudios Poblacionales. Frecuencias.
• Poder de Exclusión.
• Probabilidad de Inclusión.
 Análisis de ADN
• Recomendación del National Research
Council, USA.
– Análisis del mayor número posible de
marcadores genéticos en una muestra.
– Las frecuencias poblacionales de los
marcadores genéticos deben ser las del
grupo étnico en estudio.
– Estricto control de calidad en las pruebas
realizadas.
Fuente de la Muestra

• Pulpa Dentaria
• Hueso Compacto
• Cabello (raíz)
• Semen
• Sangre (individuos vivos)
• Tejido Orgánico
• Uñas
Extracción de ADN
 Extracción Diferencial
Hisopado vaginal

Células epiteliales y espermatozoides

Extracción Diferencial
Pro K
SDS
Incubar

Centrifugar
Separar
DTT Lavar botón esperma
Pro K
SDS
Incubar

Fracción ADN células epiteliales

Espermática
 Identificación por ADN
ADN contiene la información genética del individuo
Hereda 50% paterno y 50% Materno
Perfil ADN es único *Gemelos idénticos
Confirmar o refutar testimonios acerca del sospechoso
Eliminar individuos falsamente acusados
Confirmar crímenes seriados por un mismo agresor
Determinar si varios agresores están involucrados
Asociar a un sospechoso con evidencia en escena
del crimen en donde no hay testigos

Establecer la verdad en casos de perjurio y coartada falsa

Estimular a las víctimas a denunciar un crimen
Identificar restos humanos
Resolver disputas de paternidad y filiaciones.
 Derecho Penal
• Permite comparar el material genético de
muestras biológicas recuperadas en el sitio
del crimen con aquellas tomadas de el ó los
individuos sospechosos.

• Si el perfil de DNA (Huella Genética) de los

diferentes marcadores analizados es idéntico
en ambas muestras, la probabilidad de
inclusión del sospechoso puede calcularse.
Identificación de desaparecidos
• El perfil genético de un individuo (restos óseos,
pulpa dentaria, etc) se compara con el perfil de
ADN de los familiares (Padres, hermanos, hijos).

• Si existe concordancia, se identificará sin duda

alguna a un individuo, previo análisis que
contempla la frecuencia de los marcadores
genéticos en la población.
Ventajas de la Huella Genética

• Perfil genético único

• Cualquier tejido es útil.
• No requiere células vivas.
• Perfil genético no varía nunca
– Trasplantes, transfusiones.
• Mínimas cantidades de muestra son
requeridas.
 ADN Genómico

• Material ideal

• Se hereda por vía paterna y materna.

• Persiste en toda materia orgánica.

 Cuál es la certeza de las
pruebas genéticas?
• Certeza depende de
– Número de marcadores genéticos analizados.
– Tipo de Marcadores Genéticos analizados.

– Poder de Exclusión
– Índice de Paternidad -Probabilidad Acumulada de
Paternidad.
– Likelihood Ratio (LR)
 Poder de Exclusión A priori.

• Capacidad de un sistema genético de excluir a un

individuo falsamente acusado de una paternidad o de un
crimen.

• La Probabilidad de Exclusión A priori depende del

número de alelos en un marcador y de las frecuencias
génicas de dichos alelos.
 Poder de Exclusión A priori.

• Garantía que ofrece el laboratorio antes de

realizar las pruebas con base en la batería de

pruebas genéticas que utiliza de excluir a los

falsos acusados de una paternidad.

• Valor que se calcula apriori antes de realizar las

pruebas con base en la batería de pruebas.

Sistema PE
Grupos Sanguíneos 72%
DQA Amplitype 84%
Polimarker 71%
GS + DQA 95.52% Cuadro Comparativo
(4.5:100)
GS-DQA-PM 98.70% Poder de Exclusión
(1.3:100)
9 STR 99.86%
1.4:1000
15 STR 99.99994%
6
(1:6 x10 )
 Poder de Exclusión.
Grupos Sanguíneos
SISTEMA COLOMBIA BLANCOS NEGROS JAPONESES
MNSs 0.3181 0.3206 0.3095 0.2531
Rh 0.2831 0.1859 0.2746 0.205
Xg 0.1746 0.1615 0.0965 0.1344
ABO 0.1363 0.1774 0.1342 0.1917
DUFFY 0.1071 0.042 0.1844 0.1159
KIDD 0.0896 0.1545 0.1869 0.1573
KELL 0.0181 0.0049 0.0354 0
DIEGO 0.0104 0.003 0 0.0304
ACUMULADA 0.7247 0.6934 0.7494 0.6998

Fuente: Yunis, Sandoval y Lopez

Poder de Exclusión
PE PEA
D16S539 0.5699 0.5699
D7S820 0.5480 0.8056
D13S317 0.5736 0.9171
CSF1PO 0.4603 0.9553
TPOX 0.4230 0.9742
THO1 0.5454 0.9883
F13A01 0.4707 0.9938
FESFPS 0.4535 0.9966
vWA 0.5995 0.9986

PEA = 99.86%
Fuente: Yunis y Yunis, SMYT y Cia.
Poder de Exclusión PP 16 BIO
Marcador PE PEA
Penta E 0.787 0.787
D18S51 0.728 0.942064
D21S11 0.68 0.9814605
D3S1358 0.505 0.9908229
D8S1179 0.595 0.9962833
Penta D 0.719 0.9989556
FGA 0.84 0.9998329
D16S539 0.57 0.9999281
D7S820 0.548 0.9999675
D13S317 0.574 0.9999862
D5S818 0.488 0.9999929
vWA 0.494 0.9999964
CSF1PO 0.437 0.999998
TPOX 0.406 0.9999988
THO1 0.493 0.9999994

Fuente: Yunis y Yunis, SMYT y cia.

 Calidad del Perito
• Educación
– Títulos
– Entrenamiento
• Reconocimiento Profesional
– Sociedades Científicas
– Conferencias.
• Experiencia
– Número de pruebas realizadas
– Tipo de muestras
–
 Laboratorio
• Procedimientos estandarizados.
• Control de Calidad interno.
• Mantenimiento de equipos.
• Reactivos utilizados.
• Pruebas de proficiencia externas.
• Certificación.
• Acreditación.
• Frecuencias poblacionales utilizadas.

Juan J. Yunis©. Prohibida la reproducción

SNP
 Sistema HLA en Paternidad
• Principios modernos para estudios de
paternidad.
– Karl Landsteiner descrubre los grupos
sanguíneos ABO en 1900.
– Hirszfeld y Von Dungern describen la
herencia mendeliana de los Grupos ABO
en 1910
• En 1958 se descubre la primera
molécula HLA
 Sistema HLA en Paternidad
• En 1972-1973 se propuso por primera
vez el uso del sistema HLA en
Paternidad (HLA clase I).

• En 1976 la AMA-ABA recomendaron

la inclusión del sistema HLA como
método en Paternidad
 Breve Historia de la Genética
Forense
• 1980 David Botstein decriben la técnica RFLP.
• 1980 - Ray White describe el primer marcador polimórfico
por RFLP.
• 1981 - Anderson y col. Secuencian el ADNmt
• 1985 - Alec Jeffreys descubre las sondas multilocus
VNTR.
• 1985 - Primer Artículo de PCR
• 1988 - FBI inicia análisis de casos por DNA
• 1991 - Introduce el análisis de HLA-DQA
• 1991 - Primer Artículo sobre STR por Al Edwards.
• 1993 - Primer marcador STR Validado para pruebas
forenses
• 1994 - Introduce el PolyMarker
• 1995 - FSS inicia en UK bases de datos de ADN.
• 1995 - Primeros reportes de STR de Cromosoma Y
• 1998 - FBI inicia la base de datos CODIS.
 Historia de la Genética Forense en
Colombia

• Grupos Sanguíneos 1970

• Tipificación HLA clase I Serología 1990
• Tipificación HLA Clase II , PCR 1991
• VNTR-RFLP 1992
• Inserciones Alu 1994
• STR 1995
• Tipificación HLA clase I, PCR 1996
 Polimorfismo
• Sistemas genéticos con varios alelos
producirá una gran variedad de genotipos
a nivel poblacional, especialmente cuando
los alelos son más o menos igualmente
frecuentes.
• Ejemplo, sistema HLA-DRB con 180
alelos, sistema HLA-DQA con 6 alelos
• Genotipos HLA-DRB= 180
(180+1)/2=16290
• Genotipos HLA-DQA = 6 (6+1)/2 = 21
 Polimorfismo
• Genotipos HLA-DQA = 6 (6+1)/2 = 21
• Alelos DQA1-0101, 0201, 0301,
0401,0501, 0601.
• Genotipos 0101/0101, 0101/0201,
0101/0301, 0101/0401, 0101/0501,
0101/0601, 0201/0201, 0201/0301,
0201/0401, 0201/0501, 0201/0601,
0301/0301, 0301/0401, 0301/0501,
0301/0601, 0401/0401, 0401/0501,
0401/0601, 0501/0501, 0501/0601,
0601/0601
 ÁDN Nuclear
3000 Mb

Genes y Pseudogenes ADN Extragénico

45% 55%

Unico o
Codificante No Codificante Repetitivo
Baja copia
2% 98% 20%
80%
Exones

Pseudogenes Repetido en
Intrones Interesparcido
Tandem

LINES
Minisatelites
SINES
Microsatélites
 Polimorfismo

Secuencia ADN SNP

• -----CAGTCTTACGGGACT---------
• -----CAGTCTTCCGGGACT---------
–Sistema HLA.
– ADN Mitocondrial
Longuitud ADN
• VNTR (Variable Number of Tandem Repeats)
• Short Tandem Repeats (STR)
• Amp-FLP (Amplified fragment lenght polymorphism)
 Historia Genética Forense

• Primer Caso
– Scottland Yard Vs Colin Pitchfork
– Cerca de 4000 estudiados
• USA, Primer Caso Forense en 1986
 Huella Genética
(Fingerprinting)
• Sir Alec Jeffreys (Inglaterra)
• ADN No codificante.
• Diferencias entre individuos dadas por la
longitud de los marcadores.
• Altísimo poder de discriminación.
• VNTR (DNA Fingerprinting)
Estructura VNTR
 Digestión de ADN con enzima de restricción

Imagine el ADN como una cinta larga. Las enzimas de restricción cortan el ADN
En secuencias específicas (barras rojas)

+ Separación de fragmentos de ADN obtenidos por

Digestión del ADN con enzimas de restricción
Separados por electroforesis (migración en una matriz
Semisólida por carga eléctrica y tamaño)
en gel de agarosa

-
VNTR VARIABLE NUMBER OF TANDEM REPEATS

Una vez se aísla el ADN de las células de cualquier tejido, el ADN es sometido
a corte con enzimas especiales denominadas Enzimas de Restricción las
cuales se aíslan de bacterias.
Las Enzimas de restricción cortan el ADN en secuencias específicas
 Sin enzima
Se prepara un gel
de Agarosa

Fragmentos
De ADN mas Barrido de
largos
Los fragmentos
Fragmentos De ADN
más cortos

Electroforesis (migración de moléculas)

En una matriz de agarosa por su carga eléctrica

El ADN digerido se somete a Electroforesis

Separa los fragmentos de ADN de acuerdo a
Su peso molecular, los fragmentos más grandes
Migran menos, los fragmentos más cortos migran más en el gel
El ADN separado por electroforesis, es sometido a tratamiento para romper la doble
Cadena de ADN (desnaturalización), y el ADN del gel de agarosa se transfiere
A una membrana de Nylon (cargado +) para que el ADN quede allí fijo, ya que
la Agarosa es muy débil y se puede romper el gel.
Luego se utiliza una sonda (segmento de ADN de secuencia conocida), para ubicar
En el barrido de ADN
Sonda de ADN
Secuencia complementaria al ADN
TGCAATAGCTACC
Permite detectar el ADN blanco de interés
Las sondas hibridarán con las secuencias de ADN complementarias por homología
en las secuencias.
Los fragmentos de ADN donde hibrida la sonda se visualizan por la señal que emite
La sustancia utilizada para marcar la sonda.
El patrón de bandas obtenido es único para cada individuo.
 VNTR-RFLP
Ejemplo de un análisis con VNTR
PP H M X PP H M X PP H M X Utilizando una sonda que reconoce
1 Secuencias en un solo locus
La imagen muestra tres casos de
Estudio de paternidad separados
Por una escalera de peso molecular
2 (fragmentos de ADN de peso molecular
Definido).
El primer caso (Compatible) contiene las
Muestras de Presunto padre (PP), hijo/a (H) y
3 Madre (M), y mezcla (X) (hijo/a y madre)
4 Se observan las dos bandas (alelos)
Del PP (1 y 2), los alelos en el Hijo/a (2 y 3)
Y los alelos de la madre (3 y 4).

Segundo caso, compatible)

Último caso, Incompatible, observe en la

Muestra (H), que el alelo indicado con la flecha
No corresponde a ninguna de las dos bandas
Presentes en el PP.
Si se utiliza una sonda que hibride en secuencias del ADN que se encuentren en
Diferentes cromosomas, llamada sonda Multi-Loci, generarán un patrón de bandas
Que es ´como un código de barras único para cada individuo
Huella genética de ADN
(DNA Fingerprinting).

Sonda VNTR multilocus

Sir Alec Jeffreys (FSS)

La imagen muestra que el patrón

de bandas de 3 casos muestra que
para gemelos idénticos (caso 1 y 3)
el patrón es idéntico, mientras
que el caso 2, muestra dos
Hermanos en los cuales se observa
que comparten algunas bandas
(alelos) y otras no.
 Características VNTR
Tamaño de Alelos Frec.
Locus Cromoosma Hae III Pst I Hinf I Het% PE Recombinación
D1S339 1p36 0.6 - 12 1.2 -13 1.2 - 13 0,95 0,96 < 0.1
D2S44 2p12 0.2 -11 6.8 - 16 1.5 - 10 0,96 0,95 < 0.1
D4S163 4q35 1.3 - 16 3.6 - 16 1.2 - 12 0,95 0,91 < 0.1
D5S110 5p15 0.6 - 10 0,96 0,95 0,8
D10S28 10p15 0.2-13 3 - 16 0,94 0,96 < 0.2
D17S79 17q25 0.6- 2.4 2.5 - 5.7 1 - 4.3 0,88 0,75 < 0.1
DNF24 Multilocus NP 2 - 25 1 - 23 > 0.99 > 0.98 < 0.2
Lifecodes, Cellmark
 La Reina Vs. Colin Pitchfork
• En 1983 Linda Mann de 15 años de edad fue violada y
estrangulada en el condado de Leicestershire en Inglaterra. No
se detuvo a ningún sospechoso.

• En 1986, Dawn Ashworth de 18 años de edad fue violada y

estrangulada a tan solo una milla de distancia del caso anterior.
Se detuvo a Richard Buckland “por su actitud sospechosa”.

• El resultado RFLP-VNTR Alec Jeffreys , semen presente en las

dos víctimas provenía del mismo hombre diferente a Richard
Buckland.

• Recompensa de 20.000 Libras esterlinas.

• Hombres 13 y 30 años muestra de sangre en forma

voluntaria. Aproximadamente 4583 muestras se
analizaron. Un hombre objeto el análisis de su
sangre con base en creencias religiosas.
• Otro individuo, Colin Pitchfork, no se presentó
a ninguna de las dos citas que le
programaron para la toma de su muestra en
1987. Para la tercera cita, el persuadió a su
compañero de trabajo Ian Kelly a presentarse
en su nombre ya que “el temía que las
autoridades lo incriminaran debido a sus
antecedentes previos por conducta de
exposición indecente”. Pitchfork puso la foto
de Kelly en su pasaporte y lo entrenó para
falsificar su firma y en los detalles familiares
que todo individuo debería suministrar.

• Pitchfork logró eludir a las autoridades

(aunque solo por algunos meses).
• En Septiembre de 1987, mientras departía
con varios amigos en una Taberna (Pub),
Kelly comentó como había suplantado a su
amigo Pitchfork para la toma de la muestra
de sangre. Las autoridades fueron enteradas
inmediatamente.

• Colin Pitchfork fue detenido y su muestra

analizada. Los resultados mostraron que el
semen en las víctimas y la muestra de
Pitchfork eran idénticas.

• En 1988, Colin Pitchfork fue condenado a

Cadena Perpetua por las dos violaciones y
asesinatos cometidas. Ian Kelly fue
condenado por obstrucción a la Justicia.
Perfiles VNTR

Sonda Multi-Loci

Evidencia

Sospechosos
 Marcador de
ADN tamaño
Muestras Evidencia
Sangre Asalto
sexual Cuál de los dos
Sospechosos (A o B)
Víctima
Sospechoso A Fracción
femenina
Sospechoso B
puede ser excluído como
Fracción

perpetrador del
Masculina

asalto sexual?
 Puntos de Crítica iniciales
1. Bases científicas de las pruebas
Bases sólidas y la
tecnología ha sido
realizadas. validada

– Validez de la tecnología
Criterios estadísticos
2. Evaluación estadística de las pruebas.
definidos y utilizados
en todo el mundo
– NRC I y II, 1992 y 1996.
3. Calidad de las pruebas, Control de
Calidad, Tasa de error, Cadena de
Principal aspecto
Custodia, Idoneidad de los peritos.
actualmente

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 Audiencias Frye
• Audiencias para determinar la
admisibilidad de las pruebas.
• Frye Vs. United States (1923) audiencia
para determinar la admisibilidad del
“detector de mentiras” en corte.
– Determina si la técnica o métodos son
aceptados en forma general por la comunidad
científica específica del área”.

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 Estándares Frye
• Expertos deben determinar la confiabilidad
de las pruebas.
• Los expertos deben estár debidamente
calificados.
• Los procedimientos y métodos utilizados
deben ser correctamente utilizados.

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 Evidencia de DNA
• Desde 1987 se ha presentado evidencia
con base en DNA en cientos de casos en
U.S.A.
• RFLP-VNTR.
• HLA-DQA por PCR.
• PCR-Polimarcador.
• Short Tandem Repeats (STR).
 Pennsylvania Vs. Pestinikas
• 1986, Primer Caso en donde pruebas de ADN
fueron utilizadas en un Juicio en USA.
• Un hombre murió en un hogar geriátrico en
Pennsylvania por aparente falta de
alimentación y los administradores fueron
acusados de Homicidio por Negligencia.
• Los resultados de la autopsia inicial fueron
questionados por lo cual se requirió una
exhumación.
• El patólogo que realizó la primera autopsia
alegó que los órganos internos habían sido
cambiados por los de otro cuerpo.
Juan J. Yunis©. Prohibida la reproducción
• El Cuerpo había sido embalsamado e
inhumado hacía un año.
• Los resultados de las pruebas de ADN
mostraron identidad entre los diferentes
órganos internos analizados y otros tejidos
del cuerpo analizados. (HLA-DQA, Ed Blake
Forensic Science Associates).
• Los acusados fueron condenados por
homicidio por negligencia.

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 Florida Vs. Andrews
• Primer Caso de una persona condenada
por violación con base en pruebas de
ADN.
• Una serie de violaciones ocurrieron en
1986, Orlando, Florida.
• Primera víctima fue Nancy Hodge de 27
años de edad.
• Durante 1986, se presume que el
mismo hombre era responsable por 23
incidentes de intento de violación o
violación ya que el modus operandi era
el mismo. ©
Juan J. Yunis . Prohibida la reproducción
• El atacante entraba a las casas o
apartamentos después de media noche
portando un cuchillo.
• Atacaba a sus víctimas en la oscuridad
y cubría la cabeza de la víctima con una
sábana.
• Durante la violación, prendía y apagaba
la luz constantemente.
• Después del ataque, usualmente se
llevaba la licencia de conducción de la
víctima.
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• En Febrero de 1987, una mujer fue golpeada,
cortada y violada varias veces mientras sus
dos hijos dormían en la habitación contigua.
• Agentes de policía vestidos de civil vigilan la
zona en las noches. El 1 de Marzo a las 2:48
a.m. Una mujer reporta el intento de ingreso
a su casa de un individuo.
• La patrulla que responde a la llamada
observa un vehículo huyendo de la zona a
alta velocidad el cual fue seguido hasta que
el sospechoso se estrella con un poste
después de varios kilómetros.
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• Tommy Lee Andrews fue detenido. Vivía
a 4.5 kilómetros de la primera víctima
Nancy Hodge.
• Nancy Hodge lo identificó como su
asaltante a la mañana siguiente (estaba
oscuro). El Sr. Andrews tenía una
coartada y las pruebas de grupos
sanguíneos no eran concluyentes.
• En Octubre de 1987, Lifecodes realiza el
análisis de ADN y determinó que el perfil
genético del sospechoso era idéntico al
semen dejado en las víctimas (1 en 10
billones). ©
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• Andrews fue enjuiciado pero el juicio
fue declarado fallido (mistrial) a pesar
de la identificación positiva por la Sra.
Hodge.
• En Noviembre 6 de 1987, en otro Juicio
por otra de las víctimas, Andrews fue
sentenciado a 22 años de prisión.
• En 1988, un segundo juicio relacionado
al primer juicio fallido resultó en un
veredicto de culpable y una sentencia
adicional de 78 años de prisión.
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 Poder de Exclusión

Plataforma PE Marcadores
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Año 2001