UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

Escuela Profesional de Ingeniería Química

Laboratorio de Análisis Instrumental

(Cuarta practica de laboratorio)

TEMA:
“Determinación simultanea de un compuesto
por espectrofotometría UV-VISIBLE”

DOCENTE:
Ing. Rodríguez Vílchez Ricardo (91-G)

PRESENTADO POR:
Ccencho Fernández Laura
Guevara Bernardo Ariane
Gonzales Mayhua Lizeth
Lucas Lizano Alonso

2021
INTRODUCCION:
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta-visible (UV/VIS)
es una espectroscopia de emisión de fotones y una espectrofotometría. Utiliza radiación
electromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja
cercana (NIR) del espectro electromagnético, es decir, una longitud de onda entre
380nm y 780nm. La radiación absorbida por las moléculas desde esta región del
espectro provoca transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas.

La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de

moléculas, y además, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza
de manera general en la determinación cuantitativa de los componentes de soluciones
de iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados.

Se utiliza extensivamente en laboratorios de química y bioquímica para determinar

pequeñas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o
la concentración de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.

Una diferencia obvia entre ciertos compuestos es su color. Así, la quinona es amarilla;
la clorofila es verde; los 2,4-derivados del dinitrofenilhidrazona de aldehídos y de
cetonas se extienden en color de amarillo brillante a de color rojo oscuro, dependiendo
de la conjugación del enlace doble; y la aspirina (ácido acetilsalicílico) es carente de
color.

Longitud de onda: se define como la distancia entre los picos adyacentes y puede ser
medida en metros, centímetros, o nanómetros (10^(-9) metros).

Frecuencia: es el número de ciclos (picos y valles) por segundo, sus unidades están
dadas en Hertz que son ciclos por segundos (Hz).

La luminiscencia ocurre debido a la emisión de luz por una sustancia determinada y esto
ocurre cuando un electrón regresa a su estado inicial después de haber sido excitado y
libera una energía como un fotón. Podemos encontrar tres tipos de nombres para la
espectroscopia de luminiscencia, para diferentes técnicas:

Espectroscopia de fluorescencia molecular.

Espectroscopia de fosforescencia molecular.

Espectroscopia de quimioluminiscencia.
OBJETIVOS:

 Mostrar el empleo de la espectrofotometría para cuantificar

simultáneamente 2 sustancias en una mezcla que presentan diferentes
espectros de Absorción.
 Desarrollar los ejercicios aplicativos y analizar los resultados.
MARCO TEORICO:

ESPECTROFOTOMETRÍA

La espectrofotometría es un método analítico que utiliza los efectos de la

interacción de las radiaciones electromagnéticas con la materia (átomos y
moléculas) para medir la absorción o la transmisión de luz por las sustancias.

La espectrofotometría se refiere a los métodos, cuantitativos, de análisis

químico que utilizan la luz para medir la concentración de las sustancias
químicas. Se conocen como métodos espectrofotométricos y, según sea la
radiación utilizada, como espectrofotometría de absorción visible
(colorimetría), ultravioleta, infrarroja.

APLICACIONES DE LA ESPECTROFOTOMETRÍA VISIBLE Y

ULTRAVIOLETA.

La espectrofotometría es de gran utilidad en el análisis de espacies químicas

sobre todo para el químico analítico.
En bioquímica se utiliza por ejemplo para:
1. Identificar compuestos por su espectro de absorción.
2. Conocer la concentración de un compuesto en una disolución.
3. Determinar la glucosa en sangre en un laboratorio de análisis químico.
4. Seguir el curso de reacciones químicas y enzimáticas.

 El espectrofotómetro es de gran utilidad en análisis cuantitativo de

proteínas, en la determinación de ácidos nucleicos incluyendo ADN / ARN,
enzimas.
EJERCICIOS:

1. Se registran los espectros de absorción individuales de los compuestos A y B

en dos medios diferentes: etanol al 10% y piridina al 20%. El espectro para cada
compuesto es el mismo en ambos disolventes. La mezcla de A + B, sin embargo,
no presenta el mismo espectro en los dos medios. Los datos de absorbancia
obtenidos para tres longitudes de onda, a las concentraciones de A y B que se
especifican, son los siguientes:

A(450nm) A (550 nm) A (650 nm)

Compuesto A (1 g/l) 1.75 0.68 0.21
Compuesto B (1 g/l) 0.11 0.23 0.33
Mezcla A+B en etanol al 10% 2.07 1.75 1.30
Mezcla A+B en piradina al 20% 2.8 1.37 1.20

Determinar (a) la composición de la mezcla; (b) el disolvente apropiado para el

análisis.

DATOS: b = 1 cm

Solución:

CA = 1 g/l

CB = 1 g/l

 Hallamos ε
 A 450nm
1.75
𝐴
𝜀450 = = 1.75 𝐿⁄𝑔
1
0.11
𝐵
𝜀450 = = 0.11 𝐿⁄𝑔
1
 A 550 nm
0.68
𝐴
𝜀550 = = 0.68 𝐿⁄𝑔
1
0.23
𝐵
𝜀550 = = 0.23 𝐿⁄𝑔
1
 A 650 nm
 0.21
𝐴
𝜀550 = = 0.21 𝐿⁄𝑔
1
0.33
𝐵
𝜀550 = = 0.33 𝐿⁄𝑔
1
 Para la mezcla 1
1.75𝐶𝐴 + 0.11𝐶𝐵 = 2.07
0.68𝐶𝐴 + 0.23𝐶𝐵 = 1.75
𝑔
𝐶𝐴 = 0.865 ⁄𝐿

𝑔
𝐶𝐵 = 5.05 ⁄𝐿

 Para la mezcla 2
0.68𝐶𝐴 + 0.23𝐶𝐵 = 1.75
0.21𝐶𝐴 + 0.33𝐶𝐵 = 1.20
𝑔
𝐶𝐴 = 1.712 ⁄𝐿

𝑔
𝐶𝐵 = 2.547 ⁄𝐿
2. Los iones Mo(VI), Ti(IV) y V(V) originan complejos coloreados con peróxido
de hidrógeno. Para resolver una mezcla de estos tres iones se prepararon los
patrones correspondientes en exceso de peróxido conteniendo 4 mg/100 ml
de cada ion. Las lecturas de absorbancia dieron los siguientes valores:

Patrón A330 A410 A460 ԑ330 ԑ410 ԑ460

Mo 0.416 0.048 0.002 97.6 115.1 4.8

Ti 0.130 0.608 0.410 155.7 728.1 491.0

V 0.000 0.148 0.200 0.0 188.5 254.8

La muestra problema se trató con exceso de peróxido y se diluyó a 50 ml. Los

valores de absorbancia obtenidos fueron: A330=0.248, A410=0.857,
A460=0.718. Calcular la concentración de cada ion en la disolución preparada,
expresada en ppm, sabiendo que el paso óptico de la célula es de 1 cm y los
pesos atómicos de 95.94, 47.90 y 50.94 para Mo, Ti y V, respectivamente.

SOLUCION:

Datos:

𝑏 = 1𝑐𝑚

𝑚𝑔 0.04𝑚𝑔
𝐶𝑃𝐴𝑇𝑅Ó𝑁 = 4 =
100𝑚𝐿 𝑚𝐿

𝐴
Sabemos: LEY DE BEER 𝐴 = 𝑎𝑏𝐶 𝑎 = 𝑏𝐶

Hallamos la absortividad (a) para cada ion:

 Para 𝑴𝒐
0.130 𝑚𝐿
𝑎330 = 𝑚𝑔 = 3.25
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

0.608 𝑚𝐿
𝑎410 = 𝑚𝑔 = 15.2
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚
 0.410 𝑚𝐿
𝑎460 = 𝑚𝑔 = 10.25
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

 Para 𝑻𝒊
0.416 𝑚𝐿
𝑎330 = 𝑚𝑔 = 10.4
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

0.048 𝑚𝐿
𝑎410 = 𝑚𝑔 = 1.2
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

0.002 𝑚𝐿
𝑎460 = 𝑚𝑔 = 0.05
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

 Para 𝑽
𝑎330 = 0

0.148 𝑚𝐿
𝑎410 = 𝑚𝑔 = 3.7
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

0.200 𝑚𝐿
𝑎460 = 𝑚𝑔 =5
0.04 𝑚𝐿 ∗ 1𝑐𝑚 𝑚𝑔. 𝑐𝑚

 Formulamos el sistema de ecuaciones para el problema a diferentes longitudes

de onda: (b=1cm)

𝐴330
𝑚𝑒𝑧𝑐𝑙𝑎 = 0.248 = 10.4𝐶𝑀𝑜 + 3.25𝐶𝑇𝑖 + 0𝐶𝑉

𝐴410
𝑚𝑒𝑧𝑐𝑙𝑎 = 0.857 = 1.2𝐶𝑀𝑜 + 15.2𝐶𝑇𝑖 + 3.7𝐶𝑉
 𝐴460
𝑚𝑒𝑧𝑐𝑙𝑎 = 0.718 = 0.05𝐶𝑀𝑜 + 10.25𝐶𝑇𝑖 + 5𝐶𝑉

 De esta hallamos los valores de 𝐶𝑀𝑜 , 𝐶𝑇𝑖 y 𝐶𝑉 mediante el método de

determinantes:

0.248 3.25 0
|0.857 15.2 3.7| 3
𝐶𝑀𝑜 = 0.718 10.25 5 = 0.0110 𝑚𝑔 ∗ 10 𝑚𝐿
10.4 3.25 0 𝑚𝐿 1𝐿
| 1.2 15.2 3.7|
0.05 10.25 5
𝑚𝑔
𝐶𝑀𝑜 = 11.0 = 11 𝑝𝑝𝑚
𝐿

10.4 3.25 0.248

| 1.2 15.2 0.857| 3
𝐶𝑇𝑖 = 0.05 10.25 0.718 = 0.0411 𝑚𝑔 ∗ 10 𝑚𝐿
10.4 3.25 0 𝑚𝐿 1𝐿
| 1.2 15.2 3.7 |
0.05 10.25 5
𝑚𝑔
𝐶𝑇𝑖 = 41.1 = 41.1 𝑝𝑝𝑚
𝐿

0.248 3.25 0
|0.857 15.2 3.7| 3
𝐶𝑉 = 0.718 10.25 5 = 0.0593 𝑚𝑔 ∗ 10 𝑚𝐿
10.4 3.25 0 𝑚𝐿 1𝐿
| 1.2 15.2 3.7|
0.05 10.25 5

𝑚𝑔
𝐶𝑉 = 59.3 = 59.3 𝑝𝑝𝑚
𝐿