Asignatura de Química Analítica e Instrumental

M.Sc. Ing. David Roberto Ricse Reyes

Docente Auxiliar
https://orcid.org/0000-0002-2172-0379

Universidad Nacional de Frontera

www.unfs.edu.pe
 Espectroscopia molecular
Se basa en la medición de la transmitancia (T) o de la absorbancia (A) de
soluciones que están en celdas transparentes que tienen una longitud de
trayectoria de b cm, según la ley de Beer:
 
Donde:
Po = Potencia radiante en watts que incide en la muestra
P= Potencia radiante que transmite la muestra
ε = Absortividad molar
b= Longitud sobre la que ocurre la atenuación
c= Absortividad
Medición de la Transmitancia y la Absorbancia
 Espectroscopia molecular
Para compensar todos estos efectos, la potencia del haz transmitido por la solución
del analito se compara con la potencia del haz transmitido por una celda idéntica
que contiene solo solvente.
 
 
 
 Ley de Beer
Un haz de radiación monocromático paralelo de potencia P0 choca de forma
perpendicular contra la superficie del bloque. Después de atravesar una longitud b
de material, que contiene n átomos, iones o moléculas absorbentes, su potencia
disminuye hasta un valor P como resultado de la absorción.
 Espectroscopia molecular
La ley de Beer también se puede aplicar a un medio que contenga más de una clase de
sustancias absorbentes. Siempre que no haya interacción entre las distintas especies, la
absorbancia total para un sistema con múltiples componentes es :
 
 
  

Limitaciones
La ley de Beer describe el comportamiento de absorción de medios que contienen
concentraciones de analito relativamente bajas; en este sentido, es una ley restrictiva. A
concentraciones altas (casi siempre >0.01 M), el grado de las interacciones soluto-
solvente, soluto-soluto, o los puentes hidrogeno pueden afectar el ambiente del analito y
su capacidad de absorción.
si los cambios de la concentración causan alteraciones importantes en el índice de
refracción n de una solución, se observan desviaciones de la ley de Beer. Este efecto se
puede corregir sustituyendo ε por la cantidad
εn/(n2 +2)2 en la ecuación general
 Espectroscopia molecular
Desviaciones
Se producen desviaciones aparentes de la ley de Beer cuando un analito se disocia, se
asocia o reacciona con un solvente para originar un producto con un espectro de
absorción diferente al del analito. Las soluciones acuosas de los indicadores acido/base
son un ejemplo característico de este comportamiento.
La ley de Beer solo se cumple en forma rigurosa cuando las mediciones se efectúan
con radiación monocromática
La radiación que emerge del monocromador está contaminada con pequeñas
cantidades de radiación dispersa o parasita llamada luz parasita, y se define como la
que proviene de un instrumento que esta fuera de la banda de longitud de onda
seleccionada para la determinación. Con frecuencia, esta radiación parasita es
resultado de la dispersión y reflexión desde superficies de redes, lentes o espejos,
filtros y ventanas.
Otra desviación respecto a la ley de Beer que parece trivial, pero que es muy
importante es la que ocasionan las celdas desajustadas. Si la longitud de trayectoria de
las celdas que contienen las soluciones del analito y del blanco no son iguales ni tienen
características ópticas equivalentes, habrá una ordenada al origen k en la curva de
calibración y A =εbc + k será la ecuación real en lugar de la ecuación general
 Espectroscopia molecular
Desviaciones
Se producen desviaciones aparentes de la ley de Beer cuando un analito se disocia, se
asocia o reacciona con un solvente para originar un producto con un espectro de
absorción diferente al del analito. Las soluciones acuosas de los indicadores acido/base
son un ejemplo característico de este comportamiento.
La ley de Beer solo se cumple en forma rigurosa cuando las mediciones se efectúan
con radiación monocromática
La radiación que emerge del monocromador está contaminada con pequeñas
cantidades de radiación dispersa o parasita llamada luz parasita, y se define como la
que proviene de un instrumento que esta fuera de la banda de longitud de onda
seleccionada para la determinación. Con frecuencia, esta radiación parasita es
resultado de la dispersión y reflexión desde superficies de redes, lentes o espejos,
filtros y ventanas.
Otra desviación respecto a la ley de Beer que parece trivial, pero que es muy
importante es la que ocasionan las celdas desajustadas. Si la longitud de trayectoria de
las celdas que contienen las soluciones del analito y del blanco no son iguales ni tienen
características ópticas equivalentes, habrá una ordenada al origen k en la curva de
calibración y A =εbc + k será la ecuación real en lugar de la ecuación general
 Espectroscopia molecular
Efectos del ruido instrumental en los análisis espectrofotométricos
Con frecuencia, la exactitud y la precisión de los análisis espectrofotométricos están
limitadas por las incertidumbres o ruidos asociados con el instrumento
 Espectroscopia molecular
Efecto de la anchura de la rendija en las mediciones de la absorbencia
Para resolver espectros complejos se requieren anchuras de rendija angostas
 Espectroscopia molecular
Efecto de la radiación dispersada en los extremos de la longitud de onda de un instrumento

Luminiscencia
Propiedad que tienen ciertos cuerpos de emitir luz tras haber absorbido energía de otra radiación
(principalmente ultravioleta) sin elevar su temperatura.
Fluorescencia
Propiedad que tienen algunas sustancias de reflejar luz con mayor longitud de onda que la recibida,
cuando están expuestas a ciertos rayos del espectro.
Fosforescencia
Propiedad que tienen algunas sustancias de reflejar luz durante un largo período de tiempo,
después de cesar su exposición a una fuente luminosa
Quimioluminiscencia
Fenómeno por el que, en algunas reacciones químicas, la energía liberada no sólo se emite en
forma de calor o de energía química, sino también en forma de luz
 Espectroscopia molecular
Ejemplo 01
Se prepararon soluciones de diferentes concentraciones del indicador acido HIn con Ka =
1.42x 10-5 en 0.1 M HCl y 0.1 M NaOH. En ambos medios, las graficas de absorbancia a 430
nm o a 570 nm contra la concentración total del indicador no son lineales. No obstante, en
ambos medios se cumple la ley de Beer a 430 nm y 570 nm para las especies individuales HIn
e In-. Por tanto, si se conocen las concentraciones de equilibrio de HIn e In -, se podría
compensar la disociación de HIn. Por lo general, las concentraciones individuales son
desconocidas y solo se conoce la concentración total C total =[HIn] + [In-]
Ahora se calcula la absorbancia de una solución con C total= 2.00 x 10-5 M. La magnitud de la
constante de disociación acida sugiere que, para todo propósito practico, el indicador esta no
disociado por completo en la forma HIn en la solución de HCl y totalmente disociado como In -
en la de NaOH. Las absortividades a 430 y 570 nm del ácido débil HIn y su base conjugada In -
5
se determinaron mediante mediciones de soluciones fuertemente acidas y fuertemente
básicas del indicador. Los resultados fueron
 

¿Cuáles son las absorbencias (celda de 1.00 cm) de soluciones no amortiguadas del indicador
que varíen en concentración desde 2.00 x 10 -5 M hasta 16.00 x10-5 M?
 Espectroscopia molecular
Ejemplo 01
Se prepararon soluciones de diferentes concentraciones del indicador acido HIn con Ka =
1.42x 10-5 en 0.1 M HCl y 0.1 M NaOH. En ambos medios, las graficas de absorbancia a 430
nm o a 570 nm contra la concentración total del indicador no son lineales. No obstante, en
ambos medios se cumple la ley de Beer a 430 nm y 570 nm para las especies individuales HIn
e In-. Por tanto, si se conocen las concentraciones de equilibrio de HIn e In -, se podría
compensar la disociación de HIn. Por lo general, las concentraciones individuales son
desconocidas y solo se conoce la concentración total C total =[HIn] + [In-]
Ahora se calcula la absorbancia de una solución con C total= 2.00 x 10-5 M. La magnitud de la
constante de disociación acida sugiere que, para todo propósito practico, el indicador esta no
disociado por completo en la forma HIn en la solución de HCl y totalmente disociado como In -
en la de NaOH. Las absortividades a 430 y 570 nm del ácido débil HIn y su base conjugada In -
5
se determinaron mediante mediciones de soluciones fuertemente acidas y fuertemente
básicas del indicador. Los resultados fueron
 

¿Cuáles son las absorbencias (celda de 1.00 cm) de soluciones no amortiguadas del indicador
que varíen en concentración desde 2.00 x 10 -5 M hasta 16.00 x10-5 M?
Ejemplo 02
Espectroscopia molecular
Una muestra de 2.00 mL de jugo se trato con un reactivo que genera color con fosfato,
después de lo cual la muestra se diluyo hasta 100 mL. A una segunda muestra de 2.00 mL se
le añadieron exactamente 5.00 mL de una solución de fosfato que contenía 0.0300 mg de
fosfato
por mililitro, y se le trato de la misma forma que la muestra original. La absorbancia de la
primera solución fue 0.428, la de la segunda fue 0.538. Calcule la concentración de fosfato en
miligramos por mililitro de la muestra.
 
Ejemplo 03
Calcule el numero de onda y la longitud de onda aproximados de la absorción fundamental
correspondiente a la vibración de estiramiento de un grupo carbonilo C=O.
Masa reducida
 
 
Los enlaces dobles y triples tienen una constante de fuerza (K) de dos a tres veces este valor
(1 x103 y 1.5x 103 N/m, respectivamente).
Ejemplo 04
Espectroscopia molecular
Muchos instrumentos de resonancia magnética nuclear de protón están equipados con un
imán que proporciona una intensidad del campo de 4.69 T ¿A qué frecuencia absorbería el
núcleo de hidrogeno en este campo?
 
 

Ejemplo 05
¿Qué resolución se requiere para separar los iones C 2H4+ y CH2N+, con masas de 28.0313 y
28.0187, respectivamente?
 
 
 
Gracias por su atención