PRÁCTICAS DE LABORATORIO

CURSO : QUÍMICA ORGÁNICA

 Capítulo 5 :
CROMATOGRAFÍA

• LABORATORIO
SEM_6
LOGROS DE APRENDIZAJE

Conocimiento de un método de identificación y purificación de

mezclas de compuestos.

Verificación de un método de separación basado en la distribución o en la

diferencia velocidad con que se desplazan los compuestos entre 2 fases en
íntimo contacto.

Identificación de compuestos en una mezcla.

REFLEXIÓN DESDE LA EXPERIENCIA
• ¿Qué sucede cuando agregamos agua al vaso que contiene el papel con los 5 puntos?

• ¿Será un método de separación ?

¿Cuáles son las parte del sistema
cromatográfico?

https://www.youtube.com/watch?v=WO0OsxaPYs8
 CROMATOGRAFÍA

Separación de una mezcla por Tipos de cromatografía

distribución diferencial atendiendo el fenómeno
físico que prevalece
puede ser

En 2 fases

1.De Adsorción (S-L) 2.Reparto o 3.-Intercambio iónico

partición (L-L) (Resina-L)

Fase móvil
Fase estacionaria, ,disolvente
fija ,adsorbente. ,eluyente
SISTEMA CROMATOGRÁFICO: Partes
FASE FIJA O FASE MÓVILO
1 ESTACIONARIA DISOLVENTE
Fluye la fase móvil Fluye (Recorre) en la
fase estacionaria.
4 Retiene a la muestra Contiene a los
componentes de la
muestra (separa a la
muestra)
-Líquido -Líquido
-Sólido -

2
Tipos de Cromatografía Según el
material a utilizar

C. SOBRE PAPEL C. EN CAPA FINA C. EN COLUMNA

Cromatografía de adsorción. Fase fija es un sólido (
Silicagel,alúmina, fosfato de
calcio)
Adsorbato

Adsorbente

Fenómeno físico
superficial

Separación depende de la adsorción y

desorción

Desorción :separación de las moléculas

adsorbidas por la fase móvil

El desplazamiento de las moléculas depende

de su polaridad.

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ

CROMATOGRAFÍA DE REPARTO O
Fase fija es un líquido .
Fase móvil es un líquido o un
PARTICIÓN gas.

El desplazamiento depende de la solubilidad

de los compuesto en las fase.

Los componentes si son solubles a la fase

fija no se desplazará.

Los compuesto si son solubles a la fase

móvil se desplazará a la misma velocidad
que la fase.
 cromatografía de intercambio iónico

En este tipo de Cromatografía la

Fase Estacionaria tiene grupos
cargados que interaccionan
electroestáticamente
con iones de signo contrario
de la fase móvil.
C de Intercambio catiónico : retiene
los positivos ;porque es la FE
negativa

Se basa en la interacción y el intercambio.

Las resinas posee cargas
https://www.youtube.com/watch?v=-
G7QHNpAeQE
Etapas del trabajo cromatográfico

1 3
2
 FACTOR REPARTICIÓN O Usada en Cromatografía sobre papel
RELACIÓNDE FRENTE “Rf” o capa fina

Frente del
solvente

Punto de
siembra

 Permite identificar un compuesto en

base a su desplazamiento
 A mayor distancia del compuesto mayor
rf y mayor afinidad a la fase móvil.

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ

PARTE EXPERIMENTAL 1 CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL

1.-Preparación para el sembrado

Señale el punto
del lugar de la
siembra de uno
Señale la línea de los colorantes
para la siembra
de la mezcla

Señale la línea de partida

Distancia = 1,5 cm

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ

 PARTE EXPERIMENTAL 1: CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL

2.- SIEMBRE 3 VECES CON EL CAPILAR

3.- Hacer secar

Sembrar el
anaranjado de
metilo (patrón)
Siembre el azul
de metileno con
anarajando de
metilo (Muestra)

Señale la línea de partida

D=
1,5

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ

PARTE EXPERIMENTAL 1: I.-CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL

4.- Introducir el papel al tubo

Introducir a un tubo de ensayo

vacío

Agregar la fase móvil( propanol,

butanona ,agua) menos de la línea de
siembra .

Esperar que la fase móvil suba 8 a

10cm ,sacar y marcar. Luego secar
el papel filtro.

Solvente de propanol- butanona-agua

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
 PARTE EXPERIMENTAL 1: CROMATOGRAFÍA SOBRE PAPEL

RESULTADO
PATRÓN
MUESTRA

10cm

Calcular el Rf de la
6,3cm 3,5cm muestra y compara con el
6,3cm
patrón y afirma que
componentes tiene.
No olvidar que aquí se
aplica cromatografía de
adsorción.
PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ
CROMTOGRAFÍA DE PAPEL

https://www.youtube.com/watch?v=woN9mBiMuCw
PARTE EXPERIMENTAL 2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

Señalar dos Sembrar Introducir la placa en una

puntos con el Seca cámara cromatografica Retirar ,marque el
Secar los portaobjeto
equidistante ( capilar 3 r con la fase frente del solvente
silicagel ya preparadas
1cm de línea de gotas de móvil(propanona, ,secar ,calcular Rf
partida) muestra butanona y agua).
PARTE EXPERIMENTAL 2 CROMATOGRAFÍA EN CAPA FINA

RESULTADO : También se trabajó con la mezcla de azul de metileno y anaranjado de metilo

PATRÓN
MUESTRA

7.5cm

Calcular el Rf de la muestra y
compara con el patrón y afirma
2.8cm que componentes tiene.
2.8cm No olvidar que aquí también se
aplica cromatografía de
adsorción.
VIDEO CROMATOGRAFIA DE CAPA FINA

https://www.youtube.com/watch?v=4IyGp6tqFqA https://www.youtube.com/watch?v=g71IWP2
O5pg&t=255s
PARTE EXPERIMENTAL 3 CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
PREPARACIÓN DE LA 3. Agregar la Abrir la llave hasta SIEMBRA 2. Abrir la llave ELUCIÓN
COLUMNA suspensión de que el solvente sea 1.Agregar 2m de la hasta que se 1.Adiconar mas
1.-Introducir algodón silicagel y 1mm por encima de mezcla y adsorbido en la etanol hasta que se
2.-Agregar 10ml de etanol etanol).20ml la superficie. fase fija. eluya la mezcla.

https://www.youtube.com/watch?v=rHeH3cOm_nI
MÉTODO PARA LAS OBSERVACIONES DE
LAS SUSTANCIAS
Si son
Directo
coloreadas

Observación
de las No modifica la
sustancias sustancia.
Método físico

Revelador ( se Fluorescencia,
usa cuando no Radiactividad
Indirecto son
coloreadas las
sustancias)

Método Reacciona con

Químico la sustancia

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ

https://www.youtube.com/watch?v=qcuJpsWa
gE8
CROMATOGRAMA

PROFESORA :MILAGROS YOVANA MUÑOZ

INTEGRAMOS LO APRENDIDO
FASE MÓVIL

FASE ESTACIONARIA
PARTES
MUESTRA

SOPORTE

SIEMBRA

CROMATOGRAFÍA ETAPAS DESARROLLO

Reparto o
SECADO
partición.
SEGÚN EL FÉNOMENO FÍSICO
Adsorción
QUE PREVALECE
Intercambio
Papel
TIPOS Iónica.
Según el
Material
Capa fina
físico
utilizado
Columna
¡LOGRO ALCANZADO !
MUCHAS
ACTIVIDAD ASINCRÓNICA

• Próxima semana: Presentación de informe de

Laboratorio 5(Capítulo 5):Cromatografía.

• La siguiente semana es el examen parcial de

laboratorio.
MUCHAS GRACIAS

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