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Universidad Autónoma de Querétaro, Facultad de Química

Licenciatura como Químico Farmacéutico Biólogo


C.U. Cerro de las Campanas, Santiago de Querétaro, Qro. 76010, México
Agosto 2021

Práctica No. 1: “CROMATOGRAFÍA EN PAPEL””


Gómez Rangel Berenice
M. en C.; Karina Durán Ríos
Laboratorio de Química Analítica;
Universidad Autónoma de Querétaro; Facultad de Química

OBJETIVO
La separación de los componentes de una mezcla, observando el corrimiento cromatográfica
de un compuesto puro y en mezcla, y reafirmara el concepto de migración relativa de una
sustancia.

1. INTRODUCCIÓN la fase estacionaria; obteniendo una


La cromatografía es un método separación. (Skoog, 2015).
ampliamente utilizado para la separación,
identificación y determinación de los 2. METODOLOGÍA
componentes químicos de mezclas
complejas. (Skoog, 2015) 2.1. Materiales y equipos
Técnica desarrollada a principios del siglo o Frasco de boca ancha 1
XX que permite la separación de sustancias o Papel filtro 1
que se encuentran en una muestra. El o Regla 1
nombre de cromatografía (kromos: color, o Pipeta de 10 ml 1
graphos: descripción). En general, es un o Capilar 1
proceso de migración diferencial en el cual o Propipeta 1
los componentes de una mezcla son o Hilo 1
transportados por una fase móvil, y o Agitador 1
retenidos selectivamente por una fase o Perforadora 1
estacionaria. (Orozco, 1989)
La fase estacionaria es aquella que está fija 2.2. Reactivos y soluciones
o Etanol al 70% 50 ml
en su lugar, ya sea dentro de una columna
o Acetona 15 ml
o sobre una superficie plana, y la fase móvil
es aquella que se mueve sobre la fase o Vinagre 15 ml
o Agua destilada 15 ml
estacionaria o a través de ésta acarreando
con ella la mezcla de analitos. o Tintas (rojo, azul y verde)
Donde aquellos componentes que tengan
2.3. Requerimientos de seguridad
una afinidad preferente a la fase
Los requerimientos de seguridad son los
estacionaria se retendrán por más tiempo básicos: vestido apropiado (pantalón largo,
en el sistema que aquellos que se zapato cerrado, cabello recogido), bata de
distribuyan selectivamente en la fase móvil. laboratorio de algodón a la medida e
Como consecuencia, los solutos eluyen a identificada, lentes de seguridad, guantes de
través del sistema en forma de seguridad y cubrebocas tricapa o KN-95.
concentraciones localizadas dentro de la
fase móvil de acuerdo al incremento de sus 2.4. Disposición de residuos
coeficientes de distribución con respecto a No se generan residuos.

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2.5. Procedimientos
a) Preparar la fase estacionaria. Coloque
las tintas para su manipulación (tintas
negra, rojo, azul y elución de las tres).
b) Preparar la fase móvil. Coloque en el
fondo del frasco 5.0 mL de la fase móvil.
c) Cortar una tira de papel filtro, de 5.0 cm
de ancho y 10.0 cm de alto. Marque, con
un lápiz, una línea a 0.5 cm del inicio del
papel y distribuya los cuatro puntos
donde se aplicarán las muestras de
forma equidistante (a 0.5 cm de
separación aproximadamente), de
manera tal que se tendrán 4 orígenes.
d) Aplicar en cada uno de los tres primeros
orígenes, una gota pequeña de diferente
indicador. Fig. 1. Cromatografía en f.m de etanol al 70%.
e) Colocar la tira de papel, con los
indicadores, en el frasco que contiene la El alcohol etílico obedece el principio químico,
fase móvil, cerciórese de que la fase por el arrastre de la tinta al ser un eluyente
móvil no esté por encima del sitio donde apolar por arrastrar los compuestos, dado que
se encuentran las muestras y evitando el los componente de la tinta son polares, se
contacto directo entre las fases. absorben en la fase estacionaria en lugar de
mantener su posición origina, y a medida que se
f) Cerrar el frasco y deje que corra la produce la elución, van siendo desplazados y
muestra hasta que la fase móvil este a 1 solubilizados, siendo favorecida por el
cm de distancia de la parte final del corrimiento de la muestra apolar.
papel.
g) Retirar la tira de papel del frasco, espere
al secado y señale con lápiz el frente del
disolvente.
h) Medir la distancia entre el origen y el
frente del disolvente como el centro de
cada mancha coloreada.

3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
La experimentación se distribuye en una fase
estacionaria que está sostenida sobre una placa
de papel poroso, y la fase móvil se mueve a
través de la fase estacionaria por capilaridad.
Estableciendo un equilibrio entre las moléculas
de cada uno de los componentes en la mezcla
que son adsorbidas y las que se encuentran en
disolución. Fig.2 Cromatografía en f.m de etanol al 70% y acetona.
En principio, los componentes se diferenciarán
en solubilidad y en la fuerza de su adsorción, de El segundo con mayor corrimiento fue el alcohol
forma que unos componentes se desplazarán con la cetona, ocurriendo debido a la pérdida
más que otros y mostraran distintas que posee este componente con respecto a la
características. fase móvil logrando sólo utilizarse en el mismo..
Provocando la suministración y corrimiento

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sobre el papel debido a la alta afinidad que 𝑅𝑓 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 𝑎𝑙 70% 𝑐𝑜𝑛 𝑣𝑖𝑛𝑎𝑔𝑟𝑒:
𝑅𝑓(𝑛𝑒𝑔𝑟𝑜) 𝑅𝑓(𝑎𝑧𝑢𝑙) 𝑅𝑓(𝑟𝑜𝑗𝑜) 𝑅𝑓(𝑛 ,𝑎 𝑦 𝑟)
posee respecto a la fase móvil, provocando que 5.4 6.3 7.2 6.8
ella una dispersa en incluso casi al final de la = = 0.60 = = 0.70 = = 0.80 = = 0.75
9 9 9 9
distancia recorrida es sólo por el eluyente.
Podemos verificar que hay un mejor tiempo de
respuesta entre el más alto sea el factor de
retención debido a la naturaleza apolar, el
etanol al 70% y la acetona, logrando un
desplazamiento más rápido de manera
ascendente. En el caso contrario el factor de
retención más bajo, el etanol al 70% y el
vinagre, se debe a que poseen una baja
afinidad con la fase móvil de videos de los dos
de la naturaleza son polares y por ende su
tiempo de respuesta logrando separarse sea
menor.

4. CONCLUSIONES
La movilidad de los componentes de una
muestra que se desea separar, depende de las
fuerzas con la que esta es absorbida como
Fig.3 Cromatografía en f.m de etanol al 70% y vinagre. afinidad, polaridad, actividad del absorbente y
de la polaridad de la fase móvil y estacionaria.
Por último instante el corrimiento de la del De la partición normal e inversa, intercambio
etanol con el vinagre comparte cierto carente de iónico y de exclusión molecular siendo que las
características, entre ellos su alta habilidad de fuerzas intermoleculares acondicionen para
polaridad. La afinidad de este compuesto con la separar el solvente del disolvente, a mayor
fase móvil permite escurrimiento y su polaridad de la molécula menor distancia es
separación con respecto al punto de origen pero recorrida y viceversa.
de manera menos precisa. Debido a la poca
afinidad que tiene con la fase more provocando A pesar de qué es una técnica muy sencilla de
su separación sea más lenta y una gran realizar, los resultados de la misma, pueden ser
diferencia que en las otras cromatografías. alterados experimentalmente por el
experimentador o condiciones del medio, ya sea
El factor de retención es un importante sobre la distribución de las muestras sobre el
parámetro experimental que es ampliamente papel, factores ambientales que afectan a la
utilizado para comparar las velocidades de fase móvil, error en las cantidades,
migración de los solutos en columna es la evaporización o el deterioro de la fase
cantidad de tiempo que un soluto pasa en la estacionaria. Sin embargo controlar estos
fase estacionaria en relación con el tiempo que factores, esta técnica puede desarrollarse y
pasa en la fase móvil. Presentado conforme a arrojar resultados favorables.
las tintas (negro, azul, rojo, elución de las
tintas).
5. BIBLIOGRAFÍA
𝑅𝑓 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 𝑎𝑙 70%: Harris, D. (2003). Análisis Químico
𝑅𝑓 (𝑛𝑒𝑔𝑟𝑜) 𝑅𝑓(𝑎𝑧𝑢𝑙) 𝑅𝑓(𝑟𝑜𝑗𝑜) 𝑅𝑓(𝑛 ,𝑎 𝑦 𝑟) Cuantitativo. (3ra edición). Reverté. México.
6.9 7.6 8.0 7.9
= = 0.76 = = 0.84 = = 0.88 = = 0.87 Orozco, F. (1989). Análisis Químico
9 9 9 9
Cuantitativo. (18va edición). Porrúa. México.
𝑅𝑓 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙 𝑎𝑙 70% 𝑐𝑜𝑛 𝑎𝑐𝑒𝑡𝑜𝑛𝑎: Skoog, D. A.; West, D.; Holler, F. S.; y Crouch,
𝑅𝑓(𝑛𝑒𝑔𝑟𝑜) 𝑅𝑓(𝑎𝑧𝑢𝑙) 𝑅𝑓(𝑟𝑜𝑗𝑜) 𝑅𝑓(𝑛 ,𝑎 𝑦 𝑟) S. R. (2015). Fundamentos de Química
8.0 8.2 8.1 8.3
= = 0.88 = = 0.91 = = 0.90 = = 0.92 Analítica. (9na. Edición) McGraw-Hill. México.
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