FACTORES QUE INFLUYEN EN LAS SEPARACIONES

CROMATOGRÁFICAS

RESUMEN: Se realizo el corrimiento de distintas placas cromatográficas para identificar y determinar los factores
que pueden afectar su corrimiento y por ende una correcta separación o en su caso una correcta determinación y
cuantificación de un analito presente en una muestra dada.

EQUIPO: 3 GRUPO 6FV1

OBJETIVOS:
• analizar la influencia de algunos factores que
afectan las separaciones cromatográficas
INTRODUCCIÓN:
La cromatografía en una técnica de separación,
identificación y cuantificación de analitos de suma
importancia en distintas áreas relacionadas al análisis de
muestras, industria farmacéutica, industria alimentaria
que ayuda a identificar los componentes de una mezcla
compleja.

El fundamento de la cromatografía es que los

componentes de una muestra se dispersan en dos fases
no miscibles entre sí, una conocida como fase
estacionaria y la otra como fase móvil, la elución y
corrimiento a diferentes velocidades de los componentes
de la muestra lleva a cabo la separación de esta.
Esta misma diferencia de velocidades se da
principalmente por dos características:
1. polaridad
2. adsorción
a su vez otra variedad de factores como es la
concentracion de la muestra, la fase móvil, el volumen de
la muestra aplicada inclusive la misma composición de la
muestra puede llegar a afectar el correcto corrimiento del
cromatograma.
ANÁLISIS DE RESULTADOS:
EXPERIMENTO 1: EFECTO DE LA POLARIDAD DEL
DISOLVENTE
se observó que la afinidad de la muestra-disolvente fue
cambiando, evidencia de esto es el cambio considerable
en los valores de rf obtenidos experimentalmente del rojo
de metilo.
Existen interacciones muestra-fase móvil y muestra-fase
estacionaria por lo tanto si la muestra tiene mayor
afinidad por la fase móvil esta avanzara más que si se
realiza con una fase móvil poco afín a la muestra.

RESULTADOS: EXPERIMENTO 2: EFECTO DEL VOLUMEN DE LA

EXPERIMENTO 1: EFECTO DE LA POLARIDAD DEL MUESTRA.
DISOLVENTE
El Rf de los volúmenes 1 y 2 µL tienen el mismo valor, no
hubo discrepancia con 1 µL de diferencia

EXPERIMENTO 3: EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN

DE LA MUESTRA.

En la CCF ocurre una competencia por los sitios activos

de la fase estacionaria entre la muestra o analito y la fase
móvil.

1
EXPERIENCIA 4: EFECTO DE LA NATURALEZA DEL
DISOLVENTE.

La polaridad es un concepto importante en la CCF y se

tiene que tomar en cuenta para no cometer errores. La
polaridad de la fase estacionaria es de naturaleza polar y
la de la fase móvil es no polar, así podemos decir que
existirá una interacción entre el disolvente del analito y la
fase estacionaria si el disolvente es polar.

CUESTIONARIO
1.- Defina brevemente los siguientes términos:
Tipos de interacciones moleculares. Son las formas en
cómo pueden estar en contacto 2 o más moléculas entre
sí. Por ejemplo: interacción dipolo-dipolo, puente de
hidrógeno, dipolo inducido, fuerzas de van Deer Waals.
Resolución. Es la capacidad en una cromatografía de que
dos bandas cromatográficas estén separadas entre sí.
Coeficiente de partición. Razón entre las concentraciones
del analito en las dos fases de la mezcla formada por dos
disolventes inmiscibles en equilibrio.
Asimetría de pico. Cuando se registra la lectura del
detector se forma un pico simétrico si la muestra eluye de
forma individual, entonces se nuestra asimétrica cuando
la separación de la muestra es incompleta, es decir
cuando pasa en el detector con más componentes en
ella.
Efecto de matriz. Es cuando los componentes de una
muestra irrumpen en la correcta elución y separación de
las bandas cromatográficas.
2.- Investiga dos aplicaciones de la cromatografía en
capa fina en el área farmacéutica.
Debido a su facilidad de elaboración y rapidez, es
utilizada como un método de análisis de medicamentos
previa a su distribución, así se sabrá si un lote es óptimo
para su distribución o si está contaminado.
3.- Investiga los mecanismos de separación
cromatográfica en capa fina.
Los mecanismos de separación de la CCF son adsorción,
partición, intercambio iónico y por exclusión.

REFERENCIAS:

• http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/6.-
CROMATOGRAFIA_26249.pdf
• http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/M.Cro
matogrficos_6700.pdf
• Riu J, Boqué R. “Técnicas de Laboratorio”, 284
(2003) 676-680.
• Dominique Pradeau. “Analisis químicos
farmacéuticos de medicamentos”, Primera
edición, Noriega Editores, Mexico, Pag. 413-435.