Universidad Nacional Autónoma de México

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Facultad de Química
Práctica #4. Cromatografía en capa fina.
Alumna: Juárez Gómez Ariadna
Laboratorio de Química Orgánica 1
Grupo: 5
Antecedentes.
1. Se trata de una técnica o método físico de separación de dos o más solutos presentes en una mezcla basada en la velocidad de
desplazamiento de estos. En ella participan dos fases, una móvil (líquida o gaseosa) y otra estacionaria (sólida o líquida). Este método
puede variar de técnica en técnica, pero siempre se basa en el mismo principio: Todos los sistemas de cromatografía contienen una fase
estacionaria y una fase móvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido que se queda fijo en la misma posición. La fase móvil
puede ser un líquido o un gas que corre a través de una superficie y de la fase estacionaria. Las sustancias que están en un sistema de
cromatografía interaccionan tanto con la fase estacionaria como con la fase móvil. La naturaleza de estas interacciones depende de las
propiedades de las sustancias, así como también de la composición de la fase estacionaria. La rapidez con que viaja una sustancia a
través del sistema de cromatografía depende directamente de la interacción relativa entre las sustancias y las fases móvil y estacionaria.
En el caso de una mezcla, si cada componente interacciona diferente con la fase móvil y la fase estacionaria, cada uno de ellos se
moverá diferente.
• Cromatografía de adsorción. La separación depende de los equilibrios de adsorción-desorción de los componentes de la mezcla, entre la
fase estacionaria sólida y la fase móvil líquida o gaseosa. La fuerza con que es adsorbido un componente depende de la polaridad de este,
de la actividad del adsorbente y de la polaridad de la fase móvil. En general cuanto más polar es un compuesto más fácilmente será adsorbido.
es una técnica que está particularmente bien adaptada para la separación de compuestos de polaridad baja y media. La separación de
compuestos muy polares mediante cromatografía de adsorción requiere, debido a la gran retención que ofrecen, la utilización de adsorbentes
muy poco activos, o bien, tratamientos químicos previos para la preparación de la muestra, a fin de reducir su polaridad. Ejemplos: fases
estacionarias polares (sílice, alúmina, hidroxiapatito) y fases móviles apolares (ciclohexano, isooctano, tetracloruro de carbono, etc.),
aplicándose a la separación de solutos apolares.
• Cromatografía de reparto. Está basada en la separación de una mezcla de sustancias mediante el reparto existente entre la fase móvil
(líquido o gas) y la fase estacionaria (líquida) soportada o ligada sobre un sólido adecuado. La mayor o menor migración de un compuesto
en este tipo de cromatografía, será función del coeficiente de reparto de éste entre la fase estacionaria y la fase móvil. La cromatografía
de reparto es utilizable para la separación de mezclas de compuestos de polaridad media y alta. Ejemplos: son las cromatografías sobre
papel, sílice hidratada y la cromatografía líquida de alta eficacia en fase reversa.
2. La adsorción puede definirse como la tendencia de un componente del sistema a concentrarse en la interfase, donde la composición
interfacial es diferente a las composiciones correspondientes al seno de las fases. Es de particular relevancia en la ciencia de los coloides
y superficies. El proceso de adsorción de átomos y moléculas en las interfases es una de las principales formas en que las interfases de
alta energía pueden modificarse para disminuir la energía total del sistema. La adsorción puede ocurrir en cualquier tipo de interfase
(L-G, S-G, L-S), sin embrago las diferentes características de las interfases sólidas y líquidas hace necesario un análisis particular de
cada caso.
El comportamiento de retención refleja la distribución del soluto entre la fase móvil y la estacionaria. El volumen de fase móvil necesario
para transportar la banda de soluto desde el punto de inyección, a través de la columna, hasta el detector (en el máximo del pico del soluto)
se define como el volumen de retención, Vr. El gasto o flujo volumétrico, en términos de los parámetros de la columna, depende la sección
transversal de la columna vacía, la porosidad total del relleno (empaque) de la columna y la velocidad lineal promedio de la fase móvil. Como
medida en cromatografía sobre papel se emplea el Rf (Factor de retención), el cual se define como el cociente de dividir el recorrido de la
sustancia por el disolvente, esto es, la distancia media desde el origen hasta el centro de la mancha (X) dividida por la distancia que media
desde el origen hasta el frente del disolvente (S). 𝑅𝑓 = 𝑋 𝑆
 3. Para la cromatografía en capa fina (TLC), la fase estacionaria es una capa de partículas de unos milímetros de espesor, fijadas sobre
un soporte sólido generalmente de aluminio, plástico o vidrio. Después de aplicar el analito cerca de la parte inferior de la placa seca
el, disolvente empieza a producir la separación. La ventaja principal de la TLC es que se analizan simultáneamente la muestra y el patrón,
mientras que en la cromatografía en columna las muestras se analizan individualmente. En este tipo de cromatografía la fase estacionaria
se extiende sobre un soporte inerte (silica). Stahl estandarizó el método para elaborar capas finas por métodos mecánicos. La mancha
en una placa de TLC se caracteriza por la distancia que recorre con relación a la distancia recorrida por la fase móvil. El grado de
retención en cromatografía plana de superficie se expresa como el factor de retardación, o índice de retención Rf: la distancia del
desplazamiento de soluto / distancia de desplazamiento del disolvente. El “frente” del disolvente es el límite alcanzado por la fase
móvil, en éste se mide la distancia en que se ha desplazado éste. El valor de Rf depende de las mismas condiciones experimentales que
el valor de K de la cromatografía en columna: la composición de la fase móvil, el tipo de fase estacionaria, la temperatura y el tipo de
compuestos separados. Aplicación de la Cromatografía en capa fina: Las técnicas de aplicación de la cromatografía en capa fina se
aplican para desarrollar las condiciones para la separación en cromatografía en líquidos de alta resolución. La cromatografía en capa
fina tiene amplio uso en los laboratorios clínicos y es la estructura de apoyo de muchos estudios bioquímicos y biológicos. También tiene
una gran aplicación en los laboratorios industriales.
4. Los eluyentes más utilizados se dividen en dos los que son Polares y los que son ligeramente polares o no polares. Polares: AcetOEt,
piridina, benceno, etanol. Metanol, H2O. No polares o ligeramente polares : Éter de petróleo, éter dietílico, ciclohexano, CCl 4, CHCl3,
Hexano. Los soportes más utilizados son los de vidrio, plástico y los metálicos. Por último, los reveladores más comunes son la luz UV,
vapores de yodo y rocío con solución de H2O/H2SO4.
5. Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben más en la fase estacionaria. La cromatografía debe llevarse a
cabo en un área sin corrientes de aire. Limpieza de las placas. Muchas placas están contaminadas con grasa o agentes
plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequeña escala, éstas deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo
y metanol y después dejar secar completamente antes de aplicar la muestra. Pureza de los disolventes.
Sustancia Estructura Propiedades Solubilidad Riesgos, inflamabilidad, etc.
Benzoína -Estado físico: Sólido cristalino Insoluble en agua, se
C14H12O2 -Color: Blanco a amarillo claro hunde en agua. Soluble
-Olor: Alcanfor en acetona,
cloroformo, metanol, Salud 2
-P.F. 133° C ácido acético, piridina, Inflamabilidad 2
-P. E. 334° C dimetilsulfóxido y en Reactividad 0
-Masa molar: 146.14 g/mol dimetilformamida.
-Densidad relativa:1.31 Puede ser nocivo por ingestión y si se inhala. Es
inflamable, puede haber formación de gases de
combustión o vapores peligrosos.
Acetona -Estado físico: Líquido Soluble en agua a Puede causar irritación ocular,
CH3(CO)CH3 -Color: Incoloro cualquier proporción conjuntivitis, desecamiento y
-Olor: Picantes, dulces y agrietamiento de la piel, irritación en
nariz y garganta, dolor de cabeza, letargo, mareo,
penetrante náuseas, confusión. Puede causar irritación del tracto
-P.F. -95.3C -P. E. 56.6° C digestivo. Puede afectar el sistema nervioso central
-Masa molar: 58.04 g/mol caracterizado por depresión, fatiga, excitación, dolor
- Densidad: 0.79 g/cm3 de cabeza, tiempos de sueño alterados, ataxia.
Acetato de -Estado físico: Líquido Solubilidad en agua 80 La inhalación de vapores puede provocar
-Color: Incoloro -Olor: Frutal g en 1 L somnolencia y vértigo. Nocivo: puede
etilo causar daño pulmonar si se ingiere. Irrita
C4H8O2 -P.F. -83° C -P. E. 77.6° C
la piel.
-Masa molar:88.11 g/mol

Hexano -Estado físico: Líquido Insoluble en agua

C6H14 -Color: Incoloro -Olor: Petróleo En forma de vapor , irrita a la nariz y
-P.F. -95.6° C -P. E. 69° C garganta; como líquido, irrita a la piel y
ojos.
-Masa molar: 86.17 g/mol
-Densidad relativa: 0.66
Metanol -Estado físico: Líquido Solubilidad en agua, Causa moderada irritación en los ojos.
CH3OH -Color: Incoloro -Olor: Alcohol acetona, benceno, Puede causar irritación a la piel y
-P.F. -97.8° C -P. E. 64.5° C cloroformo y éter. tracto respiratorio. Puede ser dañino
si es tragado o inhalado, hay
-Masa molar: 32.04 g/mol envenenamiento.
-Densidad relativa: 0.79 g/cm3
Silica Gel -Estado físico: Sólido Insoluble en agua. No presenta información de toxicidad aguda. Evaluar las
-Color: Blanco -Olor: Inodoro propiedades de alteración endocrina en la salud humana.
SiO2 Este producto no contiene ningún alterador del sistema
-P.F. 1710 - 3110° C endocrino conocido o sospechoso de serlo
-P. E. 2230 - 4046° C
-Masa molar: 60.08 g/mol
-Densidad: 2.1 g/cm3
Cafeína -Estado físico: Sólido Solubilidad en agua 20 Dolor de cabeza, ansiedad, diarrea, vómitos, intranquilidad,
-Color: Blanco -Olor: Inodoro g/L a 20°C colapso. Cefalea, Agitación, Descenso de presión sanguínea,
C8H10N4O2 Colapso circulatorio
-P.F. 236 - 239° C
-P. E. 178° C
-Masa molar: 149.19 g/mol
-Densidad: 1.23 g/cm3
Ácido -Estado físico: Sólido, Polvo Solubilidad en agua La ingesta de grandes cantidades puede
-Color: Blanco -Olor: Perceptible 3.3 g/L a 20°C causar sangrado interno, náuseas o
acetilsalicílico vómito.
-P.F. 135 - 144° C
C₉H₈O₄ -P. E: Indeterminado
-Masa molar: 180.16 g/mol

Resultados experimentales:
1. Efectos de la concentración:
*Todas las medidas las saqué midiendo desde la pantalla de mi computadora.
 5 cm
Frente del eluyente: ___4___cm Eluyente: __Acetato de Etilo____
a) 1 aplicación. Rf: _=3.9/4 = 0.975 cm __
b) 3 aplicaciones. Rf: _=3.8/4= 0.95 cm__
c) 9 aplicaciones. Rf: _=3.9/4=0.975 cm__

2. Polaridad de las sustancias y los eluyentes:

Frente del eluyente: __4.8__cm Frente del eluyente: __4.5__cm Frente del eluyente: __4.7__cm

Rf(2A): 0.5/4.8= 0.10 cm Rf(2A): 0.5/4.5= 0.11 cm Rf(2A):2.4/4.7= 0.51 cm

Rf(3A): 0.5/4.8= 0.10 cm Rf(3A): 3.5/4.5= 0.77 cm Rf(3A): 3/4.7= 0.64 cm

Hexano Acetato de etilo Etanol

3. Pureza de las sustancias: d) Identificación de un medicamento:

RfA1: 0.7/3 =0.23 cm RfA2: 1.8/3 = 0.6 cm
Rf(4A): 1.5/1.5= 1 cm
RfB: 1.8/3 = 0.6 cm A B
Rf(5A): 1 cm
Número de componentes: A= 2 B= 1
Cafeína
Medicamento A: Agrifen Medicamento B: Desenfriol

Análisis Experimental:
Los resultados de la práctica nos dejan observar la utilidad de una cromatografía de capa fina, como el separar una mezcla en
sus componentes puros. Los resultados de la parte a, son bastante similares ya que son la misma sustancia pero observamos la
diferencia que puede haber en el número de aplicaciones solo afecta en el tamaño de la muestra, más no afecta la concentración
en el Rf. En la parte b nos deja observar que eluyente tiene una polaridad similar a nuestras sustancias problema, si hay arrastre
de la muestra se podría decir que tiene una polaridad como la del eluyente, de ahí se confirma lo similar disuelve lo similar, no
polar con no polar como lo es con el acetato de etilo. En la parte c es acerca de la pureza de nuestras sustancias, se observa
que ambos llegan al límite del frente del eluyente y hay un solo componente, por lo que son puros. Y por último la identificación
del medicamento, nos permitió observar cuantos componentes podría tener la sustancia y llegar a diferenciarlos por sus
características, como en este caso el tener la cafeína, nos permitió diferenciar entre los medicamentos, pues poseían
componentes similares pero se diferenciaron con esta, dando que el vial 1 aplicaron agrifen y en el vial 2 se aplicó desenfriol,
ya que este no contiene cafeína dentro de sus componentes.
Conclusión:
Comprendí los objetivos de la práctica, ya que esta me ayudo a observar de mejor manera la técnica que lleva realizar una
cromatografía en capa fina y sus características, que esta nos ayuda para visualizar la pureza y polaridad de las sustancias
que se usan para este método, así como la ayuda que proporciona para identificar sustancias que probablemente desconozcamos
sus características de polaridad, pero esta te proporciona elementos para su identificación.
Referencia bibliográfica:
1. Cromatografía en placa fina. (s. f.). Universidad Autónoma de Madrid. Recuperado 20 de octubre de
2021, de http://www.qfa.uam.es/qb/practicas/P6-guion.pdf