INFORME N.

º 2

ALGUNAS PROPIEDADES DE LAS PROPIEDADES DE LAS PROTEÍNAS

Integrantes

MSc.Orlando J. Pastrana

Docente

Universidad de Córdoba

Facultad de medicina veterinaria y zootecnia

Programa de Acuicultura
 OBJETIVOS

Objetivo General

Reconocer y comprobar algunas propiedades de las proteínas al reaccionar con

determinados reactivos.

Objetivos específicos:

 Reconocer la presencia de algunos aminoácidos en las proteínas.

 Comprobar la precipitación de la albumina con sales metálicas.
 Observar el cambio de color que tienen algunas proteínas al reaccionar con
el reactivo de Biuret
 INTRODUCCIÓN

Las proteínas son moléculas complejas formadas por unidades más simples
llamadas aminoácidos, los cuales están unidos por enlaces peptídicos. Estos
compuestos son esenciales en la química de la vida. (Sites.Ciencia.,2009).

Son el principal componente estructural y funcional de las células y tienen

numerosas e importantes funciones dentro del organismo, que van desde su papel
catalítico (enzimas) hasta su función en la motilidad corporal (actina, miosina),
pasando por su papel mecánico (elastina, colágeno), de transporte y almacén
(hemoglobina, mioglobina, citocromos), protección (anticuerpos), reguladora
(hormonas), etc. (Martínez, A. & Martínez E, 2006)

http://iesmonre.educa.aragon.es/

Estructura de la proteína
 METODOLOGÍA

Materiales y Reactivos

 10 tubos de ensayo    

 1 Pinza para tubo de ensayo     
 3 Pipetas de 5 ml              
 1 Frasco lavador                         
 1Gotero.                                                  
 1 Beaker de 400 ml               
 1 Gradilla    
 1 termómetro
 Ácido Pícrico saturado   
 Ácido Acético 10%                                     
 Buffer pH 4.7  
 Soluciones: Albúmina, caseína y gelatina.
 Acido tánico al 10%    
 Sulfato cúprico al 2%  
 Ferriacianuro de potasio acuoso.
 1 Estufa o calentador
 Acetato de plomo al 2 %
 Cloruro de mercurio al 2%     
 Reactivo de Biuret      
 Métodos

Determinación del punto de coagulación de una proteína y demostración de

la desnaturalización.

Tomar 2 tubos de ensayos y rotular como A y B

Agregar 4,5 ml de solución de albumina de huevo a cada tubo

Agregar 0,5 ml de buffer pH, al tubo A

Colocar Los tubos en baño de maría, a temperatura controlada

Anotar Cualquier cambio en los tubos y a la temperatura que ocurre.

Continuar Calentando, hasta ebullición del agua

Prolongar Calentamiento por 5 minutos más

Separar El tubo A y dejar enfriar

Agregar 4 ml de buffer pH 4,7 y calentar hasta ebullición

Determinar

Si el precipitado formado, se redisuelve después de enfriar

 PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS

Precipitación con sales pesadas.

Tomar 3 tubos de ensayos

Adicionar 1 ml de solución albumina de huevo a cada tubo

Adicionar al tubo 1, 4 gotas de solución de cloruro de mercurio

2%

Adicionar al tubo 2, 4 gotas de solución acetato de plomo al 2 % más 3 gotas de ácido

acético

Adicionar al tubo 3, 4 gotas de sulfato cúprico al 2 %

Observar Si se formó precipitado o no

Repetir El procedimiento, con solución de caseína y gelatina.

Precipitación con reactivos ácidos.

Tomar 3 tubos de ensayos

Adicionar 1,5 ml de solución caseína a cada tubo

Adicionar al tubo 1, 3 gotas de solución acuosa saturada de ácido

pírico

Adicionar al tubo 2, 3 gotas de ácido tánico al 10%

Adicionar al tubo 3, 3 gotas de solución acuosa de ferrocianuro de potasio y 1 gota ácido acético al 10%

Observar Lo que ocurre en los tubos

Repetir El procedimiento, con solución de albumina

 REACCIONES COLORIDAS

Reacción de Biuret.

Tomar 1 tubo de ensayo

Adicionar 1,5 ml de la solución proteica

Agregar 1 ml de reactivo de Biuret

Dejar Reposar la mezcla

Observar Lo que ocurre

 RESULTADOS

Determinación del punto de coagulación de una proteína y demostración de

la desnaturalización.

Tubo Resultados Observación

Hubo desnaturalización y Se observó un
A coagulación, por efecto precipitado sólido de
de la temperatura. color blanco

Hubo desnaturalización y Presentó partículas de

B coagulación, por efecto color blanco suspendida
de la temperatura. en el líquido

Precipitación con sales pesadas

Albumina.

Tubo Resultados Observación

Se observó una turbidez
1 Hubo reacción de color blanco.

Presentó sólidos
2 Hubo reacción suspendidos de color
blanco.
Se observó un
3 Hubo reacción precipitado de color
blanco.
Caseína.

Tubo Resultados Observación

Se observó una turbidez
1 Hubo reacción de color blanco.

Presentó sólidos
2 Hubo reacción suspendidos de color
blanco.
Se observó un
3 Hubo reacción precipitado de color
blanco.

Gelatina.

Tubo Resultados Observación

No se observó cambio
1 No Hubo reacción en la mezcla.

Se observó un
2 Hubo reacción precipitado de color
blanco.
No se observó cambio
3 No Hubo reacción en la mezcla.
 Precipitación con reactivos ácidos

Albumina.

Tubo Resultados Observación

Se observó viscosidad y
1 Hubo reacción un precipitado
Ácido pícrico

Presentó olor
2 Hubo reacción desagradable y se
Ácido acético observó precipitación.

Caseína.

Tubo Resultados Observación

Se observó una turbidez
1 Hubo reacción de color blanco.
Ácido pícrico
Presentó sólidos
2 Hubo reacción suspendidos de color
Ácido acético blanco.

Gelatina.

Tubo Resultados Observación

No se observó cambio
1 No Hubo reacción en la mezcla.

Se observó un
2 Hubo reacción precipitado de color
blanco.
 Reacciones coloridas

Reacción de Biuret.

Tubo Resultados Observación

Se observó un color
1 Hubo reacción violeta o azul intenso
 ANALISIS DE RESULTADOS

Para la determinación del punto de coagulación de una proteína y demostración

de la desnaturalización, las proteínas presentes se desestabilizaron por el efecto
del calor sobre los enlaces de la estructura terciaria (en gran parte enlaces de
hidrogeno), causando así un desdoblamiento de la proteína y una disminución
progresiva de su solubilidad. (Virginia Melo, Oscar Cuamatzi, 2007, p.98).

Para el tubo A se observó que la solución buffer pH 4.7 hace precipitar a la

albumina de forma más rápida donde se observó un precipitado de color blanco,
en comparación con el tubo B, donde solo se sometió a calor y no hubo mayor
precipitación.

La desnaturalización es irreversible debido a que no se disolvió en el agua.

En la prueba de precipitación con sales metálicas se observó un resultado positivo

debido a la formación de precipitados tanto en la albumina y en la caseína, debido
a que son proteínas globulares. En cambio, en la gelatina solo dio positivo para la
reacción con el sulfato de plomo debido a que la gelatina es una proteína fibrosa.
En la precipitación con reactivos ácidos se pudo observar que después de
adicionar los reactivos correspondientes a cada tubo se formó un precipitado en y
un olor desagradable debido a los sulfuros presentes en la proteína, lo que indica
la desnaturalización de la caseína y la albumina.

En la prueba de Biuret que se le realizó a la solución proteica nos dio un resultado

positivo, lo cual indica la presencia de enlaces peptídicos en esta solución al
reaccionar con el sulfato de cobre en medio alcalino, formando un complejo con el
ion Cu 2+ que rompen los enlaces de la proteína formando un color a azul o
violeta.
 CONCLUSIONES

 Las proteínas están constituidas por aminoácidos, por los cuales algunos
de los métodos se basaron en el reconocimiento de aminoácidos.
 Las proteínas, como la albumina son sensibles con las sales metálicas
pesadas, formando precipitados, como se pudo observar en la experiencia.
 El reactivo de Biuret es un método que detecta la presencia de compuestos
con dos o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las
proteínas y péptidos cortos. Por lo tanto, se pudo comprobar la presencia
de estas por el cambio de color que se obtuvo.
 PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS

1. Consultar en forma clara y breve en que consiste la desnaturalización

de las proteínas.

La desnaturalización es un cambio estructural de las proteínas o ácidos nucleicos,

donde pierden su estructura nativa, y de esta forma su óptimo funcionamiento y a
veces también cambian sus propiedades físico-químicas.

2. Explique qué sucede cuando el cabello se somete a los tintes, de ris y

alisado, este proceso es reversible o irreversible.

Es reversible, y pasa por la formación o rupturas de enlaces de sulfuros en  la

alfaelice de la proteína queratina.

3. Explique por qué las pezuñas, los cuernos, las uñas, el cabello y las
plumas no se disuelven con el agua.

La Queratina es una sustancia proteica, muy rica en azufre, que constituye el

componente principal de las capas más externas de la epidermis de los
vertebrados y de otros órganos derivados del ectodermo, como pelos, uñas,
plumas, cuernos o pezuñas. 
La queratina es la responsable de la dureza y resistencia de los cuernos y uñas 
La queratina es una proteína que forma parte la estructura del cabello y uñas.

4. Consultar de qué depende la solubilidad de las proteínas.

La solubilidad de una proteína depende la composición iónica del medio ( K, Na,

Ca, Hg), de la fuerza iónica y del pH, como también de la temperatura y
distribución de los grupos hidrofílicos polares de los hidrofílicos no polares en la
molécula y del momento dipolar de la proteína.

5. Explique cuando es positiva la reacción de Biuret, escriba la reacción

 La reacción o prueba de BIURET es un método que detecta la presencia de

compuestos con dos o más enlaces peptídicos y, por tanto, sirve para todas las
proteínas y péptidos cortos. 
El reactivo del Biuret (sulfato de cobre en una base fuerte) reacciona con los
enlaces del péptido y cambia el color cuando entra en contacto con otra sustancia,
tornándose VIOLETA. Mientras más cantidad de proteína esté presente en la
solución, más oscuro es el color. 
Por ejemplo, cuando se calienta la urea a 180 Celsius, se descompone
transformándose en un compuesto llamado "Biuret", el cual en presencia de Cu2+
en solución alcalina forma un complejo color violáceo ya que reconoce los enlaces
peptídicos de las proteínas, no es específico para identificación de proteínas con
dos o más enlaces peptídicos.

6. Consulte otras técnicas utilizadas para la cuantificación de proteínas.

 Método de Bradford
 Valoración de proteínas por el método de Lowry – UAH
 Western Blot o ELISA
 Ácido bicinconínico
 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Página web

http://informedelaboratorioproteinas.blogspot.com/

https://botplusweb.portalfarma.com/documentos/2002/11/19/14684.pdf

https://sites.google.com/site/cienciasguardo/laboratorio/reconocimento-principios-
inmediatos

http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212-16112006000500002

https://www.academia.edu/23063615/Informe_de_laboratorio_desnaturalizaci
%C3%B3n_de_prote%C3%ADnas_y_reconocimiento_de_aminoacidos