PRACTICA N° 6: RECONOCIMIENTO DE PROTEÍNAS

MSc. Rosa María Liñán Abanto

OBJETIVOS:

o Reconocer algunas propiedades físico químicas

de las proteínas

o Reconocer cualitativamente proteínas mediante la

prueba de Biuret

o Reconocer proteínas mediante la prueba

xantoproteica y la prueba de la cistina
MATERIALES Y METODOS:

Materiales Vidrio

Biológico

Sol. de ovoalbumina Leche

Otros
Reactivos

CuSO4
Métodos: CUALITATIVOS

Propiedades Prueba de
fisicoquímicas Biuret

Prueba Prueba de la
Xantoproteica cistina
PREPARACION DE LA SOLUCION DE OVOALBUMINA

Clara del huevo

+ H2O destilada

FILTRACIÓN

Solución de
ovoalbúmina
PROPIEDADES FISICOQUIMICAS
H20 HCl Calor
Procedimiento

I IIII III
TUBOS DE ENSAYO
COMPONENTES
I II III

Sol. de albumina 2 ml 2 ml

Leche fresca 2 ml

Agua 2 ml

HCl 2 ml
Ovoalbúmina Leche Ovoalbúmina
Calor leve +
 RESULTADOS
H2O HCl Calor

Ovoalbúmina Leche Ovoalbúmina

Reacción
 PRUEBA DE BIURET

o Se basa en la reacción que se da entre el nitrógeno del enlace peptídico

de una proteína o péptido con el Cu++ en medio alcalino, produciéndose
una coloración violácea por formación de un complejo de coordinación
entre el Cu++ y los pares electrónicos libres de los nitrógenos de la unión
peptídica.
o Son necesarias por lo menos dos uniones peptídicas para que tenga lugar
la reacción.
 Procedimiento

TUBOS DE ENSAYO Reactivo de Biuret

COMPONENTES
I II
- Ovoalbúmina 2, 5 m -
- Agua destilada - 2, 5 ml.
CuSO4 + H2O Cu+2 + SO4-2
- NaOH 20% 2, 5 ml. 2, 5 ml.
- Dejar reposar 3 min. NaOH 20%
- CuSO4 5 gotas. 5 gotas.
- Observar lo que sucede en cada tubo
- La reacción positiva, se manifiesta con la aparición
de un color azul violeta.
Solución de CuSO4 10%
NaOH 20%

I I

Ovoalbúmina H20
RESULTADOS

I II

o La reacción del biuret no es

una reacción específica para
proteínas.

Ovoalbúmina H2O
 PRUEBA XANTOPROTEICA

o Se basa en que los anillos

aromáticos presentes en algunos
aminoácidos reaccionan con ácido
nítrico concentrado formando
nitroderivados de color amarillo o
anaranjado.

o Esta reacción da positiva si en la

proteína se encuentran los
aminoácidos fenilalanina, tirosina o
triptófano.
Procedimiento RESULTADO
HNO3 NaOH 30%

I I I I

Ovoalbúmina
 PRUEBA DEL ACETATO DE PLOMO

o Es una prueba cualitativa que permite identificar aminoácidos

azufrados
o Los Aminoácidos azufrados se reconocen por la formación de
precipitados de Sulfuro de Plomo de color gris oscuro o negro que
se forman cuando reacciona con Acetato de Plomo en medio
alcalino

Cistina
Procedimiento
Solución de
Pb(CH3COO)2 Solución de NaOH RESULTADO

Ovoalbúmina

Reacción
https://www.youtube.com/watch?v=6k0Orb
ZI074

https://www.youtube.com/watch?v=GzGMb
w5w4Wo