INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA

NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL
"Práctica No.2 – “Reacciones de aminoácidos y proteínas" Becerra
Casolis Alejando, Rojas González Jocelyn Lili" Grupo: 3FM1
1. INTRODUCCIÓN sección 1
Las proteínas son macromoléculas formadas por cadenas
2. OBJETIVOS
lineales de aminoácidos que están unidos por un tipo de
• Reconoceré la presencia de aminoácidos
enlace conocido como enlace peptídico. Intervienen en
prácticamente todos los procesos que tienen lugar en la célula
mediante las diversas coloraciones.
y ejercen una gran diversidad de funciones dentro del • Aplicaré de forma correcta la metodología
organismo. Todas las proteínas están formadas a partir del descrita en el instructivo con el fin de obtener
mismo conjunto de 20 aminoácidos, pero en distintas resultados acertados y coherentes.
combinaciones. Cada aminoácido cuenta con un grupo amino, • Comprenderé cada uno de los fundamentos
una cadena lateral, un grupo carboxilo y un átomo de de las reacciones ejecutadas.
hidrógeno, todos ellos unidos al mismo carbono α. • Llevaré a cabo todas las medidas sanitarias
Lo que diferencia a cada aminoácido y le otorga propiedades necesarias para evitar accidentes dentro del
químicas diferentes entre sí es la cadena lateral o grupo R. laboratorio.
Existen distintos métodos para identificar a las proteínas y • Usare mis conocimientos obtenidos para
aminoácidos, la mayoría de ellas se basan en una reacción realizar un buen reporte de trabajo.
química característica de los grupos r de los aminoácidos, las
• Identificare los distintos grupos R que
que son importantes por conocer son las siguientes:
diferencian a los aminoácidos entre sí.
Reacción para grupos S-H
Esta reacción es específica para aminoácidos con azufre 3. RESULTADOS
presente en la molécula, tal como la cisteína, se produce la
hidrólisis alcalina del grupo Sulfidrilo. formándose sulfuro de I. Reacción del plomo para cisteína (grupos S-H)
sodio; posteriormente el plomo desplaza al sodio, dando como
resultado sulfuro de plomo que precipita en color gris o negro.
Reacción de la Ninhidrina
Se lleva a cabo gracias a la presencia del grupo amino (-NH2)
libre en los aminoácidos; En primer lugar, el aminoácido se
oxida, descarboxilandose y liberando amoniaco, mientras que
una de las moléculas de ninhidrina se reduce a hidrindantina
la cual reacciona a su vez con el amoniaco y otra molécula de
ninhidrina para dar un compuesto de adición doble que
Tabla 1. Resultados de la reacción del plomo para cisteína
presenta una coloración azul púrpura o bien conocido azul de
Ruhemann, a excepción de la prolina, ya que está presenta un Solución problema Observaciones
color amarillo. Gelatina Prueba negativa, no hubo ningún cambio
Reacción de Hopkins-Cole Peptona Prueba negativa, no hubo formación del
Es específica para el grupo indol característico del triptófano. precipitado esperado
El anillo indol reacciona con el ácido glioxílico en presencia de Albumina Prueba positiva, Se llevo a cabo la formación
de un precipitado de color gris-negro debido
ácido sulfúrico para formar un compuesto violeta en la
a que en su estructura tiene metionina
interfase entre la solución del aminoácido y ácido sulfúrico. La Cisteína Prueba positiva, se observó la formación de
naturaleza del compuesto colorido no se conoce aun un precipitado de color gris debido a la
totalmente. presencia de azufre en su molécula.
Reacción de Millón Agua Prueba negativa, Tubo control, no se
Es específica de grupos fenólicos como los presentes en la presentó la formación de un precipitado
tirosina. Primero se realiza la nitración de la tirosina, que
forma complejos con los iones mercurio (I y II) del reactivo, II. Reacción de la Ninhidrina
formando una solución o precipitado de color rojo, a veces es
blanca y se debe a calentar para que vire.
Reacción Xantoproteica Alb Trip Gel Pep Fenil Tiro Agua
Es útil para aminoácidos que tienen anillos aromáticos
derivados del benceno, por ejemplo, Fenilalanina, Tirosina y
Triptófano. En esta prueba se lleva a cabo la nitración del anillo
bencénico en presencia de ácido nítrico. La reacción positiva se
observa con la formación de un compuesto color amarillo.
Reacción de Biuret
Detecta la presencia de tres o más enlaces peptídicos, por lo
que es considerada la reacción general para proteínas. Una
prueba positiva se observará de color violeta, una prueba
negativa de color azul.
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sección 1
V. Reacción Xantoproteíca
Tabla 2. Resultados de la reacción de Ninhidrina
Pep Trip Tiro Gel Alb Agua Fenil
No. Solución Observaciones
tubo
problema
1 Albumina Prueba positiva
2 Triptófano Se observa un cambio de color a un
3 Gelatina azul- violáceo en todos los tubos
4 Peptona (excepto agua), esto se debe a la Tabla 5. Resultados de la reacción Xantoproteíca
5 Fenilalanina presencia de grupos amino libres de los
aminoácidos y proteínas. Solución Observaciones
6 Tirosina
problema
7 Agua Prueba negativa, no hay presencia de
Peptona Prueba positiva, Se observa un cambio a color
grupos amino
Triptófano amarillo en todos los tubos (excepto agua)
III. Reacción de Hopkins-Cole Tirosina debido a la reacción que se llevó a cabo entre
Gelatina el reactivo de la prueba Xantoproteíca y los
Albumina anillos aromáticos presentes en la estructura
Fenilalanina de los aminoácidos y proteínas.
Agua Prueba negativa, no existe cambios ya que el
agua no tiene anillos aromáticos en su
estructura.
VI. Reacción de Biuret

Agua Fenil Trip Asp Tiro Alb Gel Pep

Tabla 3. Resultados de la reacción de Hopkins-Cole

Solución Observaciones
problema
Triptófano Prueba positiva Se observa la formación de un
Peptona cambio de color lila en la interfase que pone en Tabla 6. Resultados de la reacción de Biuret
Albumina evidencia la presencia de grupos indol dentro de Solución Observaciones
Gelatina las estructuras de estas moléculas, algunos problema
anillos se observan más intensos que otros Agua Prueba negativa
debido a la a la concentración de triptófano o Fenilalanina Se observa en estos tubos una coloración azul
cantidad de grupos indol Triptófano que indica la ausencia de proteínas o bien
Fenilalanina Prueba negativa La reacción no se llevó a cabo Aspartame menos de tres enlaces peptídicos.
Agua debido a la ausencia de grupos indol, por lo que Tirosina
no se obtuvo ningún cambio en la interfase.
Albumina Prueba positiva
Gelatina Se observó un cambio de color a violeta y esto
IV. Reacción de Millón Peptona se debe a la presencia de más de tres enlaces
peptídicos formados dentro de la estructura de
las proteínas empleadas.

4. DISCUSIÓN

Las pruebas de identificación de aminoácidos y

proteínas basan su fundamento general en la reacción
de determinado reactivo con el grupo R o cadena lateral
Tabla 4. Resultados de la reacción de Millón de cada aminoácido, donde la reacción resultante en
una prueba positiva genera un viraje de determinado
Sustancia Observaciones color.
problema
Agua , tubo control sin cambios Tenemos, por ejemplo:
Fenilalanina No se llevó a cabo la reacción debido a la
ausencia de grupos fenólicos en este aminoácido La reacción de ninhidrina es positiva con viraje violáceo
Peptona Prueba positiva cuando se presenta una amina primaria en la estructura
Gelatina Se observó la formación de un precipitado rojizo de una molécula, por lo tanto, todas las sustancias
Tirosina que deja en evidencia la interacción entre el
reactivo de Millón y los grupos fenólicos
problema, al ser aminoácidos y proteínas que tienen
Albumina
presentes en la estructura de estas moléculas. esta característica, mostraran un resultado positivo.

En cuanto a la reacción de plomo para la cisteína, se

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presenta cuando el azufre de un grupo tiol (SH)
desprotonado reacciona con el plomo del reactivo,
formando un precipitado negro o grisáceo, tal como
en el caso de la albúmina y más específicamente en la
cisteína.
El grupo indol (grupo bicíclico, un anillo de 6 carbonos
y uno de 5) es característico de aminoácidos como el
triptófano, cuando el ácido glioxílico reacciona con
este grupo en la interfase de una solución bifásica con
ácido sulfúrico, se puede observar la presencia de un
anillo púrpura, por lo tanto, sustancias como el
triptófano, la gelatina y la albumina, que tienen en su
estructura cantidades considerables de triptófano,
mostraran el anillo característico.
Por otro lado, la tirosina tiene en su estructura un
grupo fenólico que es capaz de generar complejos
con los iones de mercurio presentes en el reactivo de
millón, de esta forma generando una solución y/o
precipitado color rojo, tal como el caso de los tubos
de peptona, albúmina, gelatina (que en su estructura
tienen tirosina), y evidentemente, el tubo que
contiene tirosina pura.
La prueba xantoprotéica es útil en la identificación de
aminoácidos cuya estructura tiene un anillo
aromático en su estructura, tal como la tirosina,
fenilalanina y triptófano, donde la nitración de dicho
anillo bencénico en presencia de ácido nítrico
formará un compuesto de color amarillo, tal es el
caso de los tubos con estos aminoácidos y
nuevamente los de gelatina, peptona y albumina, que
cuentan con estos mismos aminoácidos.
Finalmente, la prueba de biuret es considerada la
reacción general de proteínas, puesto que su
evaluación positiva es altamente específica de
sustancias donde se encuentran tres o más enlaces
peptídicos, por lo cual un solo aminoácido por sí solo
no podrá arrojar una prueba positiva, pero un
conjunto de ellos (proteína) si podrá, únicamente los
tubos con albumina, peptona y gelatina reaccionaran
formando una prueba positiva.
5. CONCLUSIONES
De acuerdo con los resultados obtenidos tras realizar
el procedimiento experimental, podemos concluir
que las técnicas empleadas dentro del laboratorio
fueron correctamente aplicadas, pues las
observaciones obtenidas corresponden a los
resultados teóricos esperados que se abordaron
previo a la práctica.
Además, se logró analizar y comprender cada una de
las reacciones que se llevaron a cabo como parte de
la identificación y los resultados nos permitieron
determinar la presencia o ausencia de aminoácidos
en las diferentes sustancias problema, esto se logró
entendiendo las interacciones entre estas sustancias
y las moléculas de los reactivos correspondientes a
cada reacción, de manera que el fundamento
también nos permitió hacer inferencias más
específicas sobre que aminoácido o proteína
específica se está trabajando.
6. BIBLIOGRAFIA
• Lehninger, A. L., Nelson, D. L., & Cox, M. M.
(2009). Lehninger : Principios de bioquímica.
OMEGA.0
• Karp, G. (1987). Biología molecular. Ed. MC
Graw Hill. USA.326-334 pp
• Armstrong, F.B. & Bennett, T.P. (1987).
Bioquímica general. Reverte. 317-322 pp
• Moreno, S. (2019). Temas selectos de
Bioquímica general. Consultado en:
https://dagus.unison.mx
• Yufera E. (2007). Química orgánica básica y
aplicada. 1ra Edición. Ed. Reverte 413-434 pp
• Nogueron, A. (2003)¿Qué son las proteínas
¿: MedlinePlus Genetics. Consultado en:
https://medlineplus.gov/spanish/genetica/enten
der/comofuncionangenes/proteina/
• Departamento de Bioquímica y Biología
Molecular (2001). Identificación de
aminoácidos. Facultad de Medicina,
Universidad de Córdoba, Avda. Menéndez Pidal
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