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UNIVERSIDAD TÉCNICA DE AMBATO

FORMULARIO DE GUÍAS PRÁCTICAS DE APLICACIÓN Y


EXPERIMENTACIÓN DE LOS APRENDIZAJES

APE # 6

Facultad: Ciencia e Ingeniería en Carrera: Biotecnología


Alimentos y Biotecnología
Nivel: Segundo UOC: Asignatura: Bioquímica
CICLO ACADÉMICO: abril – septiembre 2020

I. TEMA:

Taller: Introducción a titulaciones ácido-base y titulación de aminoácidos para la


determinación del punto isoeléctrico

II. OBJETIVO:

Comprender el fundamento de la titulación ácido base y aplicarlo en la determinación del


punto isoeléctrico de aminoácidos

III. MODALIDAD:
No Presencial

IV. TIEMPO DE DURACIÓN: 5 horas


# DE HORAS ASISITIDAS: (PAEs ASISTIDAS): 4 horas
# DE HORAS NO ASISITIDAS: (PAEs NO ASISTIDAS): 1 hora

V. INSTRUCCIONES:

El punto isoeléctrico (pI) es el punto en el cual la carga neta en una molécula es cero. el pI
se examina de manera común para los aminoácidos y las proteínas. Cada uno de los
aminoácidos en una proteína lleva una carga distinta, y la carga total de una proteína es la
adición de las cargas individuales en cada aminoácido. Esta carga es también relacionada
en el pH de la solución circundante.

El punto isoeléctrico corresponde a qué se conoce como la forma zwitterion de una


proteína. Un zwitterion posee los grupos funcionales que llevan una carga positiva o
negativa. Un aminoácido zwitterion consiste en un ión negativo del carboxilaato y un ión
de amonio positivo junto a una carga en su cadena lateral, que varía entre los
aminoácidos.

El presente taller tiene como objetivo determinar los valores del punto de ionización (PK)
y el punto isoeléctrico (PI) de un aminoácido, por medio de una titulación ácido-base.
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Las titulaciones ácido-base se pueden realizar empleando compuestos indicadores del


cambio de pH o mediante el uso de potenciómetro. Los indicadores muestran el punto de
neutralización cambiando de color, mientras que un potenciómetro registra los valores de
pH de la solución que se esté titulando, al agregar pequeños volúmenes del titulante. Con
los valores de pH obtenidos para cada volumen de titulante se realiza una gráfica (pH vs
volumen de titulante agregado) y se analiza con detalle la misma a fin de determinar los
valores de equivalencia del aminoácido en cuestión.

VI. LISTADO DE EQUIPOS, MATERIALES Y RECURSOS:

Computador, Tablet o teléfono con conexión a internet

Links de videos:

Introducción a la titulación: Preparación de disoluciones y valoraciones ácido-base


https://www.youtube.com/watch?v=XTRFBXmpj-8

Titulación del aminoácido glicina


https://www.youtube.com/watch?v=-b02S9cbN9Y

Obtención de la caseína y determinación de su punto isoélectrico


https://www.youtube.com/watch?v=cs11GHd6EIs

VII. ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

- Observar los videos explicativos sobre los métodos de caracterización de lípidos


- Tomar apuntes sobre los métodos descritos y los pasos a seguir en cada uno de ellos
- Discutir el contenido de los videos presentados durante la clase

VIII. RESULTADOS OBTENIDOS:

Comprender el fundamento de la titulación ácido base y aplicarlo en la determinación del


punto isoeléctrico de aminoácidos

IX. CONCLUSIONES:

Producto APE asistida: Elabore un informe de laboratorio siguiendo el formato


previamente establecido.
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Reporte los resultados de los experimentos realizados en el video.


Producto APE no asistida: Por favor responda el siguiente cuestionario y adjunte sus
respuestas al final del informe:
1. Explique qué es el punto isoeléctrico y que propiedad presenta un aminoácido a dicho
valor de pH
2. Dibuje los estados de ionización de la glicina que se generan durante la determinación
de su punto isoeléctrico
2. ¿Qué es la caseína y cual es su importancia biológica?

X. RECOMENDACIONES:
- Tener un cuaderno de apuntes específico para los talleres y prácticas de la asignatura
- Revisar el material enviado antes del taller o práctica

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