UNIVERSIDAD TCNICA DE

COTOPAXI
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y RECURSOS NATURALES

ALUMNA:

MALDONADO TOAPANTA NATALI MANUELA.

MTODOS DE IDENTIFICACIN Y RECUENTO DE BACTERIAS, HONGOS,

MOHOS Y LEVADURAS.

CATEDRA:

MIGROBIOLOGIA GENERAL

DOCENTE:

ING. ORLANDO ROJAS

CICLO:

TERCERO A

PERIODO:

MARZO 2017 AGOSTO 2017

MTODOS DE IDENTIFICACIN Y RECUENTO DE BACTERIAS, HONGOS,
MOHOS Y LEVADURAS.

Existen mtodos rpidos aplicables a la microscopa, tcnicas de identificacin

bioqumicas, pruebas de deteccin de antgenos y de anticuerpos. Incluso en las tcnicas
de diagnstico molecular existe una gradacin de celeridad, siendo algunas de estas
pruebas tan rpidas como la PCR a tiempo real. Los procedimientos microscpicos
que utilizan tinciones estndar y/o anticuerpos fluorescentes para detectar
microorganismos especficos se consideran mtodos rpidos y se utilizan para la
diferenciacin inicial o la identificacin presuntiva de ciertos grupos de
microorganismos. La identificacin rpida de los cultivos tambin incluye equipos de
identificacin comerciales e instrumentos o sistemas robticos e informticos
completamente automatizados.

las tinciones microbiolgicas permiten observar a los microorganismos en funcin de la

capacidad de los mismos para retener, o no, determinados colorantes (Tabla 3). Las
tinciones pueden realizarse siguiendo distintos mtodos, siendo las ms usadas las
tinciones diferenciales, que permiten distinguir a los microorganismos por alguna de sus
caractersticas tintoriales peculiares:

Tincin de Gram: es de gran importancia en Microbiologa, ya que permite hacer

diferenciaciones taxonmicas, separando dos grandes grupos de bacterias (gram-
positivas, de color violeta azulado, y gram-negativas, de color granate o rojo-rosado),
segn se comporten ante esta tincin.

Tincin cido-alcohol resistente: se basa en que ciertos microorganismos no pierden la

coloracin por una mezcla de cido y alcohol si han sido previamente teidos con fucsina
fenicada. Se dice que son microorganismos cido-alcohol resistentes.

Otras: hematoxilina frrica, tricrmica, May Grunwald-Giemsa, Wright-Giemsa.

La tincin ms utilizada en microbiologa para la identificacin es, sin lugar a dudas, la

tincin de Gram, que proporciona informacin sobre los siguientes aspectos:

Taxonmico: permite la clasificacin inicial de las bacterias usando criterios

morfolgicos (tamao, forma, agrupacin, carcter tintorial).

Clnico: permite un diagnstico presuntivo de bacteriuria significativa, tambin un

diagnstico etiolgico orientativo del lquido cefalorraqudeo (LCR) de un paciente con
sospecha de meningitis, etctera.

Control de calidad y validez de la muestra remitida para cultivo, como sucede con los
esputos y otras muestras del tracto respiratorio.

Gua para el procesamiento de la muestra: orienta sobre la eleccin de los medios de

cultivo, temperaturas y atmsferas de incubacin, requerimientos nutricionales
adicionales, etc. ms apropiados segn los microorganismos observados en la tincin.

En el recuento el anlisis de los alimentos para determinar la existencia, tipo y nmero de

microorganismos es bsico para la microbiologa de alimentos. Sin embargo, ninguno de
los mtodos utilizados habitualmente permite determinar el nmero exacto de
microorganismos que existe en un determinado alimento.

Son cuatro los mtodos bsicos utilizados para investigar el nmero total de
microorganismos:

1.- Recuento en placa (SPC) para la determinacin del nmero de clulas viables

2.- Mtodo del nmero ms probable (NMP) de grmenes como clculo estadstico del
nmero de clulas viables
3.- Tcnicas de reduccin de colorantes para el clculo del nmero de clulas viables con
capacidad reductora

4.- Recuento microscpico directo (DMC) tanto para clulas viables como para las no
viables

El recuento en placa es el mtodo ms utilizado para la determinacin del nmero de

clulas viables o unidades formadoras de colonias (u.f.c.) en un alimento.

Los recuentos totales deben hacerse en funcin de uno de los siguientes factores:

- mtodo de muestreo utilizado

- distribucin de los microorganismos en la muestra

- naturaleza de la microflora del alimento

- naturaleza del alimento

- antecedentes del alimento

- adecuacin nutricional del medio de cultivo

- temperatura y medio de incubacin

- pH, aw, potencial de oxidacin reduccin del medio

tipo de diluyente utilizado

- nmero relativo de microorganismos en la muestra.

Los recuentos de microorganismos viables se basan en el nmero de colonias que se

desarrollan en placas previamente inoculadas con una cantidad conocida de alimento e
incubadas en unas condiciones ambientales determinadas. Estos recuentos no pueden
considerarse como recuentos totales ya que solo son susceptibles del contaje aquellos
microorganismos capaces de crecer en las condiciones establecidas. Se puede conseguir
una amplia gama de condiciones variando la temperatura, la atmsfera, la composicin
del medio y el tiempo de incubacin. El intervalo de temperaturas en el que crecen los
microorganismos es muy amplio: de 34 C a > 90 C.

En funcin de esto se encuadra a los microorganismos en tres grupos:

a) los que crecen bien a 7 C o por debajo de esta temperatura cuya temperatura:
psicrtofos

b) los que crecen entre 20 30 C, con una temperatura ptima de crecimiento est entre
30 40 C: mesfilos

c) los que crecen por encima de los 45 C: termfilos

Recuento de aerobios mesfilos

En este grupo se incluyen todas las bacterias, mohos y levaduras capaces de desarrollarse
a 30 C en las condiciones establecidas. En este recuento se estima la microflora total sin
especificar tipos de microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de un alimento, las
condiciones de manipulacin, las condiciones higinicas de la materia prima. Un recuento
bajo de aerobios mesfilos no implica o no asegura la ausencia de patgenos o sus toxinas,
de la misma manera un recuento elevado no significa presencia de flora patgena.

BIBLIOGRAFIA

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