Está en la página 1de 78

INMUNOLOGÍA

ERITROCITARIA

Dra María Elena Alfonso

Objeto de la Inmunohematología

Antígenos

Anticuerpos

Reacciones

inmunológicas

de

todos

componentes de la sangre.

los

APLICACIONES

Herramientas para el diagnóstico, prevención y tratamiento de la aloinmunización

Diagnóstico

y

seguimiento

de

las

enfermedades autoinmunes relacionadas con

las células sanguíneas

Estudio de los problemas relacionados con la exclusión de la paternidad.

APORTES

Genética humana Antropología Criminalística Medicina legal.

Grupos sanguíneos eritrocitarios

Características inmunoquímicas en la membrana de los eritrocitos de algunos de los miembros de la especie y ausentes en otros.

Bajo estricto control genético, heredándose de acuerdo a las leyes de Mendel.

Características permanentes de los individuos, se nace y se muere con ellos.

Membrana eritrocitaria

Compuesta por doble capa de lípidos y proteínas

Lípìdos:

• Fosfolípidos 60% .. • Colesterol- 30% • Glicolípidos- 10%

Monosacáridos de la superficie externa de la membrana

• El ácido N-acetil neuroamínico (NANA) o ácido siálico

• Fucosa • Galactosa • Manosa • N-acetil glucosamina (NacGlc) • N-acetil galactosamina (NacGal) .

Transferasas

• Los monosacáridos se unen unos a otros por enzimas glucosiltransferasas.

• Cada transferasa está bajo control genético

• La transferasa recibe el nombre del azúcar específico que une a la cadena de carbohidratos.

Citoesqueleto

• Red de de proteínas debajo de la membrana celular.

• Brinda resistencia y deformabilidad al hematíe.

• Principal componente: espectrina

• La espectrina interactua con proteínas como la actina (proteína 4.1), , dematina (prot 4.9), tropomiosina y aducina

Citoesqueleto

• La espectrina se une a la membrana plasmática a través de la ankirina (prot 2.1) y la actina

• La ankirina , en asociación con la prot 4.2 une los tetrámeros de espectrina a la proteína de transmembrana banda 3 .

• La proteína 4.1 además interactúa con la proteína transmembrana glicoforina C

Principales proteínas de la superficie del eritrocito

Proteína

sinónimo

Ag que contiene

Transp de aniones Glicoforina A Transp de glucosa Glicoforina B

Banda 3 SPG banda 4.5 SPG

ABH, Ii M,N ABH, Ii Ss, “N”

Polipéptidos Rh Glicoforina C

SPG

Rh Ge

Glicoforina D

SPG

Ge

Otras proteínas de la superficie del eritrocito

Proteína

sinónimo

Ag que contiene

Acetilcolinesterasa

AchE

Yt a , Yt b

Dombrock

Do a , Do b , Gy a , Hy, Jo a

Duffy

DARC

Fy a , Fy b , etc

Kell

K

Kx

Kx

Kidd

Jk a , Jk b , Jk 3

Luteran

Ags luteran

LW

ICAM-4

LW a , LW b , Lw a+b

Otras proteínas de la superficie del eritrocito

Proteína

sinónimo

Ag que contiene

Xg a

CD 99

Xg a

JMH

JMH

Ok a

CD147

Ok a

Scianna

Sc1, Sc2

CD 35

CR 1

Kn a ,McC a , Sl a , Yk a

CD 44

In a , In b

CD 55

DAF

Ags cromer

JMH

Otras proteínas de la superficie del eritrocito

Proteína

Banda 3 Acuaporina 1 C4a, C4b

sinónimo

Ag que contiene

Diego

Colton

Chido/Rodger

Determinantes antigénicos

• Región del Ag que se une al Ac

• Epítope: sitio de unión al Ac en un DA ( 1-7 resíduos de azúcares o 4-5 aa )

• Pueden ser secuenciales (Ej en polisacáridos o polipéptidos lineales) o conformacionales (proteínas)

Localización de los antígenos de los grupos sanguíneos en la membrana de los hematíes

Glúcidos: H, A, B, P, P 1 , I e i

• Sobre cadenas de oligosacáridos, unidas directamente a los glicofingolípidos o a los dominios de las membrana asociados a la banda 3 y 4.5.

Localización de los antígenos de los grupos sanguíneos en la membrana de los hematíes

• Glicoproteícos

asociados a las glicoforinas.

• Glicoforina A (GPA): antígenos M y N • Glicoforina B (GPB): antígenos S, s y U. • Glicoforinas C y D: antígenos del sistema Gerbich Otras proteínas de membrana : restantes antígenos de los grupos sanguíneos.

Estructura y función de los componentes de la membrana que representan a los sistemas de grupos sanguíneos eritrocitarios.

No

Sistemas

Estructuras

Función

  • 001 ABO

Carbohidratos

Desconocida

  • 002 MNS

Glicoforina A y B

Desconocida

  • 003 P

Carbohidratos

Desconocida

  • 004 Rh

Polipéptidos Rh

Transportadores?

  • 005 Lutheran

Super familia de las Igs

R de lamininas

  • 006 Kell

Glicoproteína

endopeptidasa?

  • 007 Lewis

Carbohidratos

Ligando (s-Le x )

  • 008 Duffy

DARC

Receptor de citocinas

  • 009 Kidd

Glicoproteína

Transporte de urea

  • 010 Diego

Banda 3

intercambio de aniones

  • 011 Cartwirg

Acetilcolinesterasa

Desconocida en hematíes

  • 012 Xg

Glicoproteína (CD99)

Receptor

  • 013 Scianna

Glicoproteína

Desconocida

Estructura y función de los componentes de la membrana que representan a los sistemas de grupos sanguíneos eritrocitarios.

No

Sistemas

Estructuras

Función

  • 014 Dombrock

Glicoproteína

Desconocida

  • 015 Colton

Acuaporina-1

Canales de agua

  • 016 LW

Superfamilia de las Igs

Ligando de integrinas

 

(ICAM-4)

CD11/CD18

  • 017 Chido/Rodger

Complemento C4A/C4B

Componentes del C

  • 018 H

Carbohidratos

Desconocida

  • 019 Kx

Polipeptido

Transporte?

  • 020 Gerbich

Glicoforina C/D

Esqueléticas de memb.

  • 021 Cromer

DAF

Regulador del C

  • 022 Knops

CR1

Receptor del C

  • 023 Indian

CD44

R del hialuronato

  • 024 Ok

Superfamilia de las Igs

Receptor

(CD147)

  • 025 RAPH

Desconocida

Desconocida

Desarrollo de Ags de eritrocitos.

  • 1 a semana de fertilización:

ABH, Le

Recién nacido Débil expresión de:I, Le y Sd a Más débiles que en adultos: A, B, P1, Lu a , Lu b, Yt a, y Ch/Rg Bien expresados: Rh, K, Fy, MNSs, Di, Sc, Do, Co, Ge

Moléculas de Igs

Isotipo. Caracterizan clases y subclases de Igs en una misma especie.

Alotipo. Variaciones en las cadenas pesadas y ligeras , y , no relacionadas con la especificidad antigénica, presentes en algunos indivíduos de una especie. Ej G1m(z), G1m (f)

Idiotipo. Cofiguración del sitio de unión al Ag que le da a la molécula su especificidad.Está determinada por una secuencia de aa que interactuan con el Ag-.

Los Acs IgG de un mismo indivíduo tiene igual isotipo y alotipo pero difrerentes idiotipos

Red idiotipo-anti idiotipo

• Red de autorregulación

• Ac1 dirigido contra un Ag

• Ac2 dirigido contra región Fab del Ac1

• El Ac2 regula la producción de Ac1 (su idiotipo es igual al del Ag )

Anticuerpos

IgG

IgM

IgA

Cad pesada

Cad ligera

y

y

y

Subclases

IgG1, IgG2, IgG3, IgG4

-

IgA1, IgA2

Forma molecular

PM

monómero

pentámero

150 000

970 000

monómero y dímero 160 000

Anticuerpos

 

IgG

IgM

IgA

Conc en plasma (g/L) Adulto

8 -16

0.5 -2.0

niño

similar

aprox 0.1

1.4 -4.0 indetectable

T 1/2 (dias)

21

5

6

% intravascular

52

74

40

Unión a Fc

si

no

si

Anticuerpos

IgG

IgM

IgA

Comportamiento serológico usual

Actividad serológica despues de 3h a 56 0 C

Agentes reductores (2 ME, DTT)

Ac incomp. Aglutinina

No se afecta Reducido

Aglutinina (dímeros) No se afecta

aglutina

No aglutina

Pcialm.

inactivada

Anticuerpos

Presente en

Paso placentario

Fijación de C

IgG

IgM

IgA

intravascular

extravascular

intravascular

intravascular

secreciones

si

no

no

IgG3>IgG1>IgG2>IgG4

+++

si (via alterna)

Anticuerpos (continuaciòn)

Estructura de la molècula de anticuerpo

Anticuerpos (continuaciòn) Estructura de la molècula de anticuerpo

Anticuerpos (continuaciòn)

Flexibilidad de las molèculas de anticuerpo

Anticuerpos (continuaciòn) Flexibilidad de las molèculas de anticuerpo

Anticuerpos (continuaciòn)

Isotipos de inmunoglobulinas

Anticuerpos (continuaciòn)

Fragmentos de una IgG tras proteòlisis

Anticuerpos (continuaciòn)

Anticuerpos (continuaciòn)

Interacciòn antìgeno anticuerpo (continuaciòn)

Avidez.

La afinidad en un sitio de uniòn no siempre refleja la verdadera

fuerza de la interacciòn Ag - Ac. Antìgenos complejos conteniendo mùltiples determinantes antigènicos se mezclan con anticuerpos conteniendo mùltiples sitios de uniòn, la interacciòn del anticuerpo con el antìgeno en un sitio incrementarà la probabilidad de reacciòn en un segundo sitio.

La fuerza de esas interacciones mùltiples entre un anticuerpo multivalente y un antìgeno se denomina avidez. La avidez de un anticuerpo es una mejor medida de su capacidad de uniòn en un sistema biològico que la afinidad de sus sitios de uniòn individuales. Una elevada avidez puede compensar una baja afinidad.

Interacciòn antìgeno anticuerpo (continuaciòn)

Algunas propiedades de los Acs

Avidez. Tiempo que media entre la mezcla del reactivo con los eritrocitos y la aparición de la aglutinación.

Especificidad. Capacidad para identificar correctamente las muestras carentes del antígeno en cuestión.

Potencia. reciproco de la mayor dilución del reactivo que provoca una reacción de aglutinación de 1+.

ANTICUERPOS DE GRUPOS SANGUÍNEOS ERITROCITARIOS

Aloanticuerpos: reconocen antígenos que no

están

presentes

individuo.

en

los eritrocitos del

Autoanticuerpos:

reaccionan

con

los

antígenos eritrocitarios del propio individuo.

Aloanticuerpos naturales: se desconoce el estímulo antigénico que los generó. Aparecen en el suero de individuos que carecen de los antígenos correspondientes Ej: anticuerpos ABO.

Acs naturales contra Ags de grupo sanguíneo

Acs presentes en el suero de indivíduos dirigidos contra Ags eritrocitarios sin evidencia de exposición al aloAg

Ej anti

A y anti B

Ejemplos de Acs naturales

Sistema o Ag ABO H/h

Lewis

P/P 1

MnSs

Sd

Especificidad del Ac A, B, H A 1 HI Le Le P k , PP 1 , p k M N S Sd a

a

b

  • Di Wr a

Ge

Kk

Lu

K

Lu a

Indivíduos Todos los que carecen del Ag 1-8% de A 2 y 22-35% de A 2 B Ocasional en A 1 y A 1 B 20% de le (a-b-), ABH secretores A menudo acompañado de - Le a Todos los carentes de los Ags 0.02%de M-N+ 0.02%de M+N- Muy raro en S- 1-2% de la población 1% de la población raro raro 0.02% de la población

Acs naturales.

Posible orígen

• Heteroaglutininas dirigidas contra sustancias ambientales que tienen similitud antigénica con los aloAgs eritrocitarios.Ej E coliAlgunos son espontáneos.

Naturaleza

• La mayoría son aglutininas frias IgM, pero tambien oueden ser IgG e IgA

Respuesta inmune a Ags eritrocitarios Ag- CPA

Respuesta inmune a Ags eritrocitarios Ag- CPA linfocito T LinfocitoB Célula plasmática célula B de memoria
Respuesta inmune a Ags eritrocitarios Ag- CPA linfocito T LinfocitoB Célula plasmática célula B de memoria

linfocito T

Respuesta inmune a Ags eritrocitarios Ag- CPA linfocito T LinfocitoB Célula plasmática célula B de memoria

LinfocitoB

Respuesta inmune a Ags eritrocitarios Ag- CPA linfocito T LinfocitoB Célula plasmática célula B de memoria

Célula plasmática

célula B de memoria

Acs

Interacciòn antìgeno anticuerpo (continuaciòn)

Opsonizaciòn y fagocitosis de microorganismos mediada por anticuerpos

Interacciòn antìgeno anticuerpo (continuaciòn) Opsonizaciòn y fagocitosis de microorganismos mediada por anticuerpos

Interacciòn antìgeno anticuerpo (continuaciòn)

Opsonizaciòn y fagocitosis de microorganismos mediada por complemento.

Respuesta primaria

• Al primer contacto con el Ag • Inicio más lento • Menos potente • Menos duradera • Generalmente IgM • Se producen células B de memoria • Detección de Acs: dias o semanas

Respuesta secundaria

Al segundo contacto con el Ag

Las células b de memoria proliferan y producen Acs

Inicio más rápido inicio Más potente Más duradera Generalmente IgG Detección de Acs:

Propiedades generales de la respuesta (continuaciòn) Cinètica de las respuesta humorales primarias y secundarias

Propiedades generales de la respuesta (continuaciòn)

Especificidad,memoria y autolimitaciòn de las respuestas inmunitarias.

Propiedades generales de la respuesta (continuaciòn) Especificidad,memoria y autolimitaciòn de las respuestas inmunitarias.

Regulación de la respuesta inmune humoral por Acs eritrocitarios.

• Vmedia de célula plasmática • Unión de Ag -Ac a los macrófagos • Supresión activa por células T • Degradación y eliminación del Ag • Acs anti idiotípicos

PRODUCCIÓN DE ALOANTICUERPOS

– Resultado

de

eritrocitos por:

la

inmunización

con

Transfusiones de sangre

Paso trasplacentario de hematíes fetales durante el embarazo o el parto.

La aloinmunización eritrocitaria

selección de componentes sanguíneos carentes de los Ags específicos

Clases de Igs en la aloinmunización eritrocitaria.

Anti A y anti B

• En indivíduos A y B: preferentemente IgM

• En indivíduos O: predominantemente IgG y parcialmente IgA

Clases de Igs en la aloinmunización eritrocitaria.

Acs anti Rh

• Generalmente Ig G

• IgM (resp primaria)

• IgG, en ocasiones IgA

Clases de Igs en la aloinmunización eritrocitaria.

Anti K, Fy a y Jk a • Predominantemente IgG • En algunos indivíduos mezcla IgM-IgG

Anti Lu • A veces parcialmente IgA

Indivíduos hiperinmunizados • Mayor diversidad de clases y subclases.

Persistencia de Acs según clase.

• IgM. Tiende a concentración despues del último estímulo y generalmente indetectable en 1-2 años.

• Algunos IgG (Ej anti D). más lentamente y pueden detectarse a los 30 años

• Otros IgG (Ej -Jk a ).Indetectables en pocos meses

Fases de la destrucción inmune de los hematíes

Anticuerpos + Ag eritrocitario + C´ Interacción eritrocitos / fagocitos Liberación de mediadores inflamatorios

Hemólisis intravascular

Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B)

C3a y C5a

hemólisis

Hemólisis intravascular Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B) C´  C3a y C5a hemólisis FNT IL-1
FNT IL-1 IL-8
FNT
IL-1
IL-8
Vía Extrínseca CID
Vía
Extrínseca
CID
Hemólisis intravascular Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B) C´  C3a y C5a hemólisis FNT IL-1

Vía

intrínseca

Expresión trombomodulina

Supresión proteína C

Generación de trombina

Hemólisis intravascular Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B) C´  C3a y C5a hemólisis FNT IL-1
Hemólisis intravascular Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B) C´  C3a y C5a hemólisis FNT IL-1

P.

Vascular

Vaso

constricción

Hemólisis intravascular Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B) C´  C3a y C5a hemólisis FNT IL-1

hipotensión

  • Fallo renal

Hemólisis intravascular Eritrocitos + Ac (IgM anti-A, -B) C´  C3a y C5a hemólisis FNT IL-1

Acciones de C3a y C5a

• En fagocitos mononucleares y neutrófilos: estallido respiratorio, R C3b

• En neutrófilos y basífilos: Activación y producción de mediadores solubles

• C5a: Activa la fagocitosis y producción de mediadores inflamatorios.

Mecanismo de hemólisis extravascular

• Hemólisis

Causada

por

los

auto

o

aloanticuepos IgG e IgA fijadores o no

del complemento.

Los

hematíes

se

destruyen

en

el

hígado o el bazo en dependencia de las

inmunoproteínas presentes eritrocitos.

en

los

Hemólisis extravascular

Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk)

Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b

E +IgG

E +IgG + C´

Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b

Hemólisis

IgG +C3b factores IgG + C3bi factor H
 
IgG +C3b factores IgG + C3bi factor H

IgG +C3b

IgG +C3b
IgG +C3b factores

factores

IgG + C3bi factor H

IgG + C3bi

factor H

intravascular

H e I

C3dg

Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b
Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b

RFc

Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b

RFc+ RC1 (C3b) RC3 (C3bi)

Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b

Macrófagos

Hemólisis extravascular Eritrocitos + Ac (IgG anti-Rh,-K,-Fy-Jk) E +IgG E +IgG + C´ Hemólisis IgG +C3b

Fagocitosis/ ADCC

Destrucción

bazo

Destrucción

bazo/hígado

extravascular

 

IL-8

IL-8

   

IL-6

IL-6

 

IL-1B

IL-1B

IL-1ra

IL-1ra

 

2424

 

horas

horas

IL-8

IL-8

 

IL-6

IL-6

 
IL-6 IL-6

IL-1B

IL-1B

IL-1ra

IL-1ra

 

alo alo

FNT FNT

 

Activación Activación dede

células células B, B,

producción producción dede

yy

autoanticuerpos autoanticuerpos

patogenicidad dede los

patogenicidad

los anticuerpos

anticuerpos

eritrocitarios

eritrocitarios

1-

1-

Características

Características

dede

los

los

anticuerpos

anticuerpos

Clases yy subclases,

Clases

subclases, especificidad,

especificidad, rango

rango térmico,

térmico,

activación

activación del

del complemento,

complemento, afinidad

afinidad

2-

2-

Concentración

Concentración

dede

inmunoproteínas

inmunoproteínas

unidas unidas

unidas

unidas aa los

los hematíes

hematíes inin vivo

vivo

  • 3- 3- Características

Características del

del antígeno

antígeno

Densidad yy distribución

Densidad

distribución dede los

los antígenos

antígenos

  • 4- 4- Presencia

Presencia dede los

los antígenos

antígenos enen los

los tejidos

tejidos yy

secreciones

secreciones

5-

5-

Fragmento del

Fragmento

del complemento

complemento unido

unido aa lala

célula

célula

6-

6-

Actividad

Actividad

del

del

sistema

sistema

mononuclear

mononuclear

fagocítico

fagocítico dede los

los pacientes

pacientes

Relación entre clase de Ig y comportamiento serológico

Acs IgM

La mayoría aglutinan eritrocitos resuspendidos en salina Ej -A, -B

IgM anti-D mejor con Ac diluído en suero.Títulos mayores frente a eritrocitos tratados con enzimas

Acs IgM naturales de los sistemas ABO, Le, P aglutinan más fuertemente a 4 0 C, aunque -A y -B aglutinan tambien a 37 o C

Anti A 1 , -HI, -Le a , -Le b y -P 1 . Aglutinan mejor entre 20-

25

0 C

Aglutininas anti D: A 37 0 C

Relación entre clase de Ig y comportamiento serológico

Acs IgG

Generalmente no aglutinan hematíes resuspendidos en

salina, no aglutinantes o incompletos.

Se han descrito IgG antiD, -K y - M potentes que

pueden aglutinar en salina

Acs IgA

Algunas IgA antiA pueden aglutinar en salina

IgA anti D generalmente no agñutinan en salina

Diferencias en respuestas individuales.

Diferencias genéticas: HLA, otros gene´.

Alteraciones en algunas enfermedades

Ej: Enf. Autoinmunes tendencia a formar

aloAcs

Hipoganmaglobulinemia. capacidad de

formación de Acs

LLC.

< formación de Acs que otros tipos

leucemias.

de

Diferencias en respuestas individuales.

En recien nacidos. La respuesta típica: Acs

IgM de bajo título. Raras veces IgG en los

primeros meses contra especificidades

diferentes de -A y -B

En algunos pacientes aparecen debilitación de

Ags y presencia de Acs cotra ellos.

Frecuencia de aloinmunización eritrocitaria

Frecuencia de anti D inmune (incluyendo- DC y - DE)

En donantes: 0.16 -0.25% En embarazadas: 1/500 - 1/1600 En receptores de transfusión: 0.56%

Datos de Blood Transfusion in Clinical Medicine

Frecuencia de aloinmunización eritrocitaria

Frecuencia de otros Acs

En donantes: 0.10 -0.19%. Especificidades más frecuentes: -E y -K

En embarazadas: 0.14%. Especificidades más frecuenters:-E, -K

En receptores de transfusión: 0.0.39 -1.12%

En Talasemia: > 20%

En anemia drepanocítica: 18- 32%

Datos de Blood Transfusion in Clinical Medicine

Activación del C por Acs eritrocitarios

Hemólisis en células no tratadas.

Casi todos son dirigidos contra los grupos

ABO, lewis, P e Ii

Ocasionalmente -Jk a

Activación del C por Acs eritrocitarios

Hemólisis en células tratadas con enzimas

Algunos de los anteriores producen una lisis

más rápida y extensa. Otros como el -Jk a que

generalmente no producen lisis de células no

tratadas.

Algunos Acs fijan C hasta C3

Ej -Lea, -Jk a y pocofrecuente- K y Fy a