INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

BIOQUÍMICA GENERAL
“Separación de fosfolípidos por cromatografía en capa fina ”.
Pacheco Mendoza Stephany, Ruiz Osnaya José Dynarko, 4QV1, Sección: A.

Introducción
Resultados
Los lípidos son un grupo de
compuestos químicamente diverso,
éstos tienen una gran variedad de
funciones en los organismos, desde
moléculas estructurales de membrana
(fosfolípidos, esfingolípidos) hasta
reservas energéticas (grasas y
aceites, derivados de ácidos grasos)
así como mensajeros químicos
(hormonas esteroideas), entre otros.

Estos compuestos esta conformados

por cadenas de tamaño variable de Figura 1. Resultados de corrimiento de fosfolípidos
carbono (entre 12 a 24 comúnmente), en la placa de cromatografía al revelarse con
diferentes reactivos, donde se indican posiciones
presentándose como hidrocarburos de los fosfolípidos (negro) y su Rf ( rojo),
saturados, además de insaturados considerando un frente de 6.5 cm.
(presencia de dobles enlaces, ácidos
grasos poliinsaturados), debido a su
composición (primordialmente
cadenas saturadas de C-H), son
compuestos no polares, insolubles en
agua y compuestos polares.

La yema de huevo (fracción lipídica)

está formada primordialmente por
colesterol, fosfatidilcolina (fosfolípido)
y trioleína (triacilglicérido).
Figura 2. Lisofosfatidilcolina y fosfatidilserina
Objetivos

Probar la presencia de fosfolípidos

(simples, así como dobles enlaces y/o
grupos amino libre) en extracto de
yema de huevo, a partir de una
cromatografía en capa fina.

Figura 3. Fosfatidiletanolamina.

Figura 4. Fosfatidilcolina.
Figura 5. Esfingomielina.
Figura 6. Ejemplo de cálculo de Rf.
Discusión
La ninhidrina es un reactivo empleado
en la identificación de grupos amino
libre, por lo que al rociar una de las
placas cromatográficas se obtuvieron
2 manchas correspondientes a
fosfatidiletanolamina (Rf: 0.54) y
fosfatidilserina (Rf: 0.23) debido a los
grupos aminos que presentan (figura 2
y 5), siendo de los fosfolípidos con
grupos amino libre más abundantes en
la yema de huevo [2] [3].
El yodo es empleado para la
identificación de dobles enlaces
(mediante una reacción de
halogenación). Al colocar una de las
placas en la cámara con cristales de
yodo, se obtuvieron 5 manchas
correspondientes a los fosfolípidos de
mayor abundancia en la yema de
huevo (lípidos neutros,
fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina y
serina, esfingomielina así como
lisofosfatidilcolina), ya que dichas
insaturaciones son dadas gracias los
carbonilos, fosfatos y dobles enlaces
C-C presentes en los fosfolípidos
(figura 2, 3, 4 y 5).
La prueba de bismuto, es una prueba
general para aminas cuaternarias
presentes en alcaloides, mediante el
reactivo de Dragendorff, en este caso,
se identifica a la colina [4].
Figura 6. Reacción entre el reactivo de Dragendorff
y una amina cuaternaria (como la presente en
colina).
De acuerdo con la literatura [3], los
fosfolípidos con colina (figura 2, 4 y 5)
más abundantes en la yema de huevo
son: fosfatidilcolina y serina (Rf: 0.4),
lisofosfatidilcolina (Rf: 0.09) y
esfingomielina (Rf: 0.21), por lo que se
prevé que estos son los fosfolípidos
con colina obtenidos en la
cromatoplaca [2].
Para la identificación general de
fosfolípidos se empleó el molibdato,
donde, se encontraron 4 manchas, las
cuales, corresponden a los 4
fosfolípidos con grupos fosfato (Figura
2,3,4 y 5) más abundantes en la yema
de huevo, se identifican (al comparar
el Rf con otras cromatoplacas; bismuto
y ninhidrina) como: lisofosfatidilcolina
(Rf: 0.12), esfingomielina (Rf: 0.27 ),
fosfatidilcolina y serina (Rf: 0.4), así
como fosfatidiletanolamina (Rf: 0.66).
Conclusiones en:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov
/1429609/
Se comprueba la presencia de
fosfolípidos en la yema de huevo,
éstos, puede tener dobles enlaces
(fosfatidilserina), grupos amino libre
(fosfatidiletanolamina), presencia de
colina (fosfatidilcolina, fosfatidilserina,
esfingomielina y lisofosfatidilcolina) y
grupos fosfato (todos los fosfolípidos
encontrados a excepción de los lípidos
neutros). Esta identificación de
fosfolípidos en una cromatografía en
capa fina es posible gracias a la
afinidad de los fosfolípidos por la fase
móvil y fase estacionaria.

Bibliografía

1. UNAM (2009) Cromatografía en

capa fina. Separación de
lípidos. Departamento de
Farmacoquímica. Recuperado
de depa.fquim.unam.mx
(Octubre, 2021).
2. Hanson, V. L., Park, J. Y., Osborn,
T. W., & Kiral, R. M. (1981).
High-performance liquid
chromatographic analysis of egg
yolk phospholipids. Journal of
chromatography. Disponible en:
https://doi.org/10.1016/s0021-9673
(00)82666-7 (Octubre,2021).
3. Ali, A.H., Zou, X., Lu, J., Abed, S.
M., Yao, Y., Tao, G., Jin, Q.,
Wang, X. Identification of
phospholipids classes and
molecular species in different types
of egg yolk by using
UPLC-Q-TOF-, (2017) Disponible
en:
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/71
94352/
4. Sugita M, Fujii H, Inagaki F, Suzuki
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the earthworm.(1992). Disponible