Carbohidratos 3

UNIVERSIDAD DE SONORA
DIVISION DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y DE LA SALUD

LABORATORIO DE BIOQUIMICA
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
REV NO. 0 FECHA DE ELABORACIÓN: FECHA DE PRÓXIMA SUBSTITUYE A:

2010/ 09/08 REVISIÓN: 2010/09/22 NINGUNA
AREA: BIOQUIMICA CLAVE: Pág. 1 de 9
1. INTRODUCCIÓN
Todos los carbohidratos son polihidroxicetonas y polihidroxialdehidos y se pueden

hidrolizar a compuestos más sencillos. Cuando ya no se pueden hidrolizar más
sencillos, estamos hablando de los Monosacáridos, los cuales pueden ser
Aldosas o Cetosas según el grupo funcional que contengan en su estructura,
además de clasificarse también por el número de carbonos que tengan en la
misma se les agrega el sufijo triosa, tetrosa, pentosa, hexosa o heptosa.
Todos los monosacáridos son reductores. Los disacáridos que contengan el

hidroxilo del carbono anomerico de alguno de los monomeros libre, tambien seran
reductores, aunque más lentamente. A medida que el numero de monomeros
aumenta, las características reductoras se van haciendo más y más debiles.
2. OBJETIVO
El alumno debe estar seguro que tiene claro los conceptos y que recuerda los
ejemplos cocretos de cada una de las categorías de la clasificación de los
carbohidratos.
ELABORÓ: REVISÓ: AUTORIZÓ:

Integrantes del equipo Dr. Gerardo Paredes Dr. Gerardo Paredes
Jiménez Moreno Juan Pablo
Maytorena Velarde Gerardo

3. MATERIALES Y MÉTODOS
1 Gradilla
2 Pipetas 5 ml.
2 Pipetas 1 ml.
1 Mechero Bunsen, con tripie y tela.
1 Vaso de precipitado de 600 ml.
1 Vaso de precipitado de 100 ml.
1 Pinza para tubos de ensaye.
10 tubos de ensaye de 18 x 150.
6 Tubos de ensaye de 13 x 100.
Compuestos proporcionados:
Glucosa
Fructosa
Sacarosa
Lactosa
Maltosa
Xilosa
Reactivos preparados:
Reactivo de Fehling
Reactivo de Barfoed
Reactivo de Bial
Reactivo de Seliwanoff


4. RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Reactivo de Fehling
Tubo No. Carbohidrat Color Tiempo

o
1 Glucosa Rojo Café Menos de 1 min
2 Fructosa Menos de 1 min
3 Sacarosa Ninguno
4 Lactosa Rojo Café 1 minuto
5 Maltosa Rojo Café Menos de 1 min
Reactivo de Barfoed

o
1 Glucosa Azul a Rojo Café 4 minutos
2 Fructosa Incoloro
3 Sacarosa Precipitado rojo 11 minutos
4 Lactosa Rojo café 11 minutos
5 Maltosa Rojo café 5 minutos


Reactivo Sewilanoff

o
1 Glucosa Negativo
2 Fructosa Rojo Intenso 5 minutos
3 Sacarosa Leve decoloración* + 10 min
*Observamos mal, o es posible debido a que contiene una unidad de fructosa.
Reactivo Bial

o
1 Glucosa Verde-amarillo + 5 min
2 Fructosa Verde-amarillo + 6 min
3 Xilosa* Negativo
* Debió haber una confusión en el etiquetado, o contaminación de reactivos,

esperábamos que la xilosa fuese la única debido a que la glucosa y la fructosa
son hexosas (solo difieren en forma cíclica que uno es piranosa y la otra furanosa)
y la xilosa es una pentosa; reactivo de bial se inclina a este tipo de azucares.


5. FUNDAMENTO TEORICO
Rección de Fehling
Cuando se calienta un carbohidrato reductor en una solucioin alcalina de cobre,

se inestabiliza la doble ligadura, que cambia constantemente de posición dando
origen a los compuestos llamados enedioles. Los enedioles en algun momento se
rompen por la doble ligadura dando fragmentos de gran potencia reductora. Esos
fragmentos, en presencia de iones cupricos, se convierten en fragmentos ácidos,
a la vez que los iones cupricos pasan a Cuprosos. Los iones cuprosos entonces
se combinan con los hidroxilos de la solución para formar Hidróxido Cuproso que
es de color amarillo. El Hidróxido Cuproso con el calor se convierte a Oxido
Cuproso que precipita dando el color rojo ladrillo característico que lo identifica.
Reacción de Barfoed
La reacción utliza un reactivo oxidante más debil, por lo que las condiciones de
reacción son más bien ácidas que alcalinas. Es una reacción un poco m´+as lenta
que la de Fehling. El reactivo es Acetato Cúprico disuelto en Ácido Acético diluido.
El carbohidrato reductor, al contacto con el reactibvo da el característico
precipitado de color rojo ladrillo. Los monosacáridos reductores dan la reacción
positiva en poco tiempo, (de dos a cinco minutos), mientras que los disacáridos
reductores la dan positiva pero más lentamente.


Reacción de Seliwanoff
Al reaccionar con una cetohexosa, con ácido clorhídrico, el carbohidrato pierde

moléculas de agua, dasndo como resultado el 5-hidroximetilfurfural. Esta molécula
reacciona con el Resorcinol dando un complejo color rojo intenso. La reacción es
muy rápida en cuanto a la formación del comlejo, lo que varia, en cuanto a tiempo,
es la formación del 5-hidroximetilfurfural. Las cetohexosas lo dan rápidamente
mientras que las aldohexosas lo dan lenta y débilmente, por lo que esta reacción
es característica para la identificación de fructosa.
Reacción de Bial
Al reaccionar una aldopentosa con Ácido Clorhídrico, pierde moléculas de agua y

produce la sustancia conocida con el nombre de furfural. El furfuralk puede
reaccionar en medio ácido con el Orcinol. Si en esas condiciones de agrega una
pequeña cantidad de Cloruro Férrico se ormara un complejo de color verde. Las
cetopentosas no dan esta reacción, si no que dan un complejo de color rojo. Las
cetohexosasd y las metilpentosas dan un color naranja, y al reposar producen un
precipitado de color verde oscuro. Esta reacción sirve para identificación de Ácido,
puesto que las condiciones ácidas hidrolizantes del Ácido Nucleico y sus Ribosas
libres darán positiva a la reacción.


6. CUESTIONARIO
1.- ¿Cuál es la diferencia entre el reactivo de Fehling y el de Barfoed, en cuanto a

composición y en cuanto a su capacidad de reconocer carbohidratos?
El reactivo de Fehling es un tartrato de Hidróxido de Sodio y Potasio con sulfato

cúprico hidratado, mientras en Barfoed se trata de Acetato de Cobre, donde en
ambos el cobre se reducira a oxido de cobre y precipitará a rojo, pero con Fehling
lo hará más rápido, mientras que en Barfoed sera relativamente más lento en
monosacáridos, y notoriamente más lento en disacáridos.
2.- En la reacción de Fehling, ¿qué pasaría sin calentamiento?
Tardaría mucho en reaccionar; sin calor, el rendimiento de la reacción es

deficiente.
3.- ¿Se podría usar la prueba de Seliwanoff para distinguir sacarosa de fructosa?
Podría ser difícil ya que ambas dan positivas a la reacción, aunque puede
esperarse que la fructosa de positivo más rápido porque su cetona se
deshidrataría un poco más rápido al ser unidad monomerica. La Sacarosa daría
positivo porque es un disacárido compuesto por fructosa y glucosa.


6. CUESTIONARIO
4.- Tengo tres frascos, uno con glucosa, otro con manosa y otro con fructosa. A
los tres les añado hidróxido de sodio 0.05 N. ¿Qué obtengo como producto en
cada uno de los tres tubos y por que?
Se obtienen enodioles intermediarios para después rearreglarse y formar una

mezcla de Glucosa, Fructosa y Manosa. Esto fundamentado por la transformación
de Lobry-de Bruyn-van Ekenstein.
5.- En un frasco tengo glucosa y en otro manosa y los quise tratar con álcali 0.01
N, pero me equivoqué de frasco y lo que añadí fue ácido clorhídrico 0.01 N. ¿Qué
sucedera en cada frasco?
No sucedería nada, los monosacáridos en medio ácido no reaccionan; si se

tratara de polisacáridos, los enlaces glucosidicos podrían verse afectados.
6.- En el laboratorio habia un frasco rotulado lactosa + fructosa, y otro rotulado

glucosa + ribosa, pero al hacerse la limpieza del laboratorio se cayeron las
etiquetas y ahora no se sabe cual es cual. ¿Qué se puede hacer para etiquetarlos
correctamente?
Tomar una muestra representativa de ambos frascos y someterlos al reactivo de

Barfoed, aquel que de positivo será la glucosa+ribosa.


7. BIBLIOGRAFÍA
1.- PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA DESCRIPTIVA – Vejar Rivera, Eva Irma
2.- PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY – Lehringer
3.- MCGILVERY, R. W., J. BIOL. CHEM., 200,835


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*Observamos mal, o es posible debido a que contiene una unidad de fructosa.

Tubo No. Carbohidrat Color Tiempo

* Debió haber una confusión en el etiquetado, o contaminación de reactivos,

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Al reaccionar una aldopentosa con Ácido Clorhídrico, pierde moléculas de agua y

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1.- ¿Cuál es la diferencia entre el reactivo de Fehling y el de Barfoed, en cuanto a

El reactivo de Fehling es un tartrato de Hidróxido de Sodio y Potasio con sulfato

2.- En la reacción de Fehling, ¿qué pasaría sin calentamiento?

Tardaría mucho en reaccionar; sin calor, el rendimiento de la reacción es

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Se obtienen enodioles intermediarios para después rearreglarse y formar una

No sucedería nada, los monosacáridos en medio ácido no reaccionan; si se

6.- En el laboratorio habia un frasco rotulado lactosa + fructosa, y otro rotulado

Tomar una muestra representativa de ambos frascos y someterlos al reactivo de

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1.- PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA DESCRIPTIVA – Vejar Rivera, Eva Irma

2.- PRINCIPLES OF BIOCHEMISTRY – Lehringer

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