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2022
1. INTRODUCCIÓN
La cromatografía es la técnica de análisis químico utilizada para separar sustancias
puras de mezclas complejas. Esta técnica depende del principio de adsorción
selectiva. Fue descubierta por el botánico ruso, de origen italiano, Mijaíl Tswett en
1906, pero su uso no se generalizó hasta la década de 1930. Tswett separó los
pigmentos de las plantas (clorofila) vertiendo extracto de hojas verdes en éter de
petróleo sobre una columna de carbonato de calcio en polvo en el interior de una
probeta. A medida que la disolución va filtrándose por la columna, cada componente
de la mezcla se precipita a diferente velocidad, quedando la columna marcada por
bandas horizontales de colores, denominadas cromatogramas. Cada banda
corresponde a un pigmento diferente este método se utiliza para separar y purificar
mezclas basándose en la velocidad con la que se mueven los componentes dentro
de ella, esto puede hacerse usando una fase llamada móvil (líquido o gas) y una
fase estacionaria(sólido).
2. OBJETIVOS
1. Extraer y separar, los pigmentos involucrados en la fotosíntesis.
2. Reconocer la separación de los pigmentos naturales
3. Determinar propiedades de los pigmentos naturales
3. MATERIALES
– Material fresco de espinaca (1 o 2 hojas) y zanahoria (cruda, la mitad).
– Frasco largo (preferencia de vidrio, como el de mermelada grande
– Cartulina blanca (2 cortes de 15 cm x 5 cm)
– Solventes orgánicos: alcohol puro o medicinal (Etanol 96°), agua mineral o hervida
fría.
4. PROCEDIMIENTO
Se trituró en el mortero tanto la espinaca como la zanahoria y se agregó una
cucharada de alcohol.
Preparar los 2 papeles de cartulina con una dimensión de 5cm x 15 cm, con marcas
de lápiz a 1cm y 13.5 cm.
Saturar el ambiente con 2 cucharadas de alcohol durante 30 min
Iniciar el proceso de depósito de los extractos vegetales. Para esto se debe retirar el
alcohol que se agregó antes.
10min:
20min
40min
6. DISCUSIÓN
Una vez cerrada el frasco se observa que los pigmento empiezan a subir debido a la
polaridad de los compuestos, así los compuesto más polares empiezan a subir con
mucha mayor rapidez que las menos polares, para el primer experimento con las
espinacas se usó mucha muestra y alcohol y por eso no se obtuvo los resultados
esperados, en el segundo caso con la zanahoria se observa que los carotenos se
difunden rápido pero con menos intensidad.
7. CONCLUSIÓN
En ambiente del frasco saturado ayuda a que la difusión de los pigmentos sea mas
eficas y rapido, en el experimento con las espinacas se observa una difusión
fraccionada por los pigmentos siguientes, xantofilas, clorofila B y A respectivamente,
y finalmente con una mayor altura los carotenos de la zanahoria.
8. PREGUNTAS
Elegimos la luz color azul, ya que la luz azul (entre 400 y 500 nm) al tener una
longitud de onda más corta posee mayor energía y es responsable del
crecimiento vegetativo que se da tras germinar hasta la floración.
9. BIBLIOGRAFÍA
Dixon RA, Gonzales RA. (eds.). Plant Cell Culture. A practical approach. 2.a ed.
Oxford, IRL Press, 1994.