UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

E.A.P. DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

Fisiología y Genética Bacteriana

DOCENTES:

 Dr. Mercado Martínez, Pedro

 Dr. Llenque Díaz, Luis Alberto
 Mg. Zavaleta Verde, Edgar David
INTEGRANTES:

Briones gallo, Weti del Pilar

García Vásquez, Karla Graciela
Laynes León, Juan Pablo
Meléndez Ningle, Alexandra
Rojas Gutiérrez, Yenifer Maricruz
Tandaipan Avalos, Emily

Trujillo – 2018
 METABOLISMO AERÓBICO Y ANAERÓBICO EN BACTERIAS
I. INTRODUCCIÓN:

La respiración es una serie de procesos celulares utilizados por los organismos para
obtener energía mediante la oxidación de diferentes moléculas. Esta energía es
almacenada en enlaces de alta energía (ATP y GTP) y en moléculas reductoras (NADH
y FADH2), para ser utilizada posteriormente de forma controlada.

En función de quien sea el agente oxidante podemos clasificarlo en 2 tipos de respiración:

A. RESPIRACIÓN AEROBIA: si utiliza el 𝑶𝟐 como aceptor de electrones. Propia

de todos los eucariotas y de muchos procariotas.
B. RESPIRACIÓN ANAEROBIA: en la respiración anaerobia no se usa oxígeno,
sino que para la misma se emplea otra sustancia oxidante distinta, como sulfato o
el nitrato. En las bacterias con respiración anaerobia interviene también una
cadena transportadora de electrones en las que reoxidan las coenzimas reducidos
durante la oxidación de los substratos nutrientes, es análoga a la respiración
aerobia, ya que se compone de los mismos elementos.
 Utilización del nitrato como aceptor de electrones.
La desnitrificacion es la utilización del nitrato como receptor terminal de
electrones. Es un proceso extensamente distribuido y utilizado por muchos
miembros de Proteobacteria. Muchos anaerobios facultativos utilizan la
desnitrificación porque el nitrato, como el oxígeno, tienen un bajo
potencial de reducción.
 Utilización del sulfato como aceptor de electrones.
La utilización del sulfato como aceptor de electrones es una habilidad rara,
restringida al género Disulfovibrio y algunas especies de Clostridium.
Todas estas bacterias son anaeróbicas estrictas, de modo que la reducción
del sulfato no es una alternativa de su metabolismo, como lo es en la
reducción del nitrato.
Las bacterias reductoras de sulfatos atacan sólo unos pocos compuestos
orgánicos, siendo el ácido láctico y los ácidos dicarboxílicos de 4 carbonos
sus principales sustratos.
 Utilización de dióxido de carbono como aceptor de electrones Un
pequeño grupo de procariotas anaerobias estrictas, las arqueas productoras
 de metano utilizan dióxido de carbono como aceptor de electrones; la
reducción da lugar a un metano (CH4).
El hidrógeno es un gas común en la biosfera, de modo que estos
microorganismos habitan lugares muy específicos como en sedimentos
anaerobios del fondo de lagos y pantanos, o el tubo digestivo de los
rumiantes, donde otros microorganismos producen el H2 libre que
precisen.

II. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO:

Material biológico:
 Cultivo joven de Echerichia coli.
Material y equipo de laboratorio:
 Placas de Petri
 Pipetas de 1,5 y 10 ml
 Tubos de ensayo 13 x100 ml
 Matraz de 250 ml
 Balón de 500 ml
 Biorreactor tipo agitado
 Biorreactor estático

Medios de cultivo y reactivos

 Agar nutritivo
 Caldo nutritivo
 Solución salina fisiológica estéril
 Vaselina estéril
 Solución estándar
 Reactivo de trabajo
Equipo empleado
 Espectrofotómetro
 Centrifuga
 Balanza
 Estufa
2.5. PROCEDIMIENTO:
 Se preparó un cultivo joven de Echerichia coli. Con el cultivo se realiza una
suspensión tomando como referencia el tubo N°3 del nefelómetro de Mac
Farland.

 Inoculación de los birreactores:

Se preparó dos biorreactores: tipo agitado y biorreactor estático, a cada uno
de los biorreactores, que contienen 195 ml de caldo nutritivo- KNO3 al 0,5%
 y glucosa al 0,5%, inocular 5 ml de la suspensión de Echerichia coli. Solo al
biorreactor estático se le agrega una capa de vaselina estéril.

 Determinación de Densidad Óptica, Biomasas y consumo de Glucosa :

De los biorreactores, muestrear 5 ml a las 0, 2, 4, 6, 8,10 y 12 horas, medir la
densidad óptica a 560 nm, la medida se realizara en unas pequeñas cubetas.
Luego centrifugar a 2500 rpm durante 20 min, separar el sobrenadante para
medir la concentración de la glucosa. Los reactivos que se utilizan son una
solución estándar y un reactivo de trabajo.
Para realizar el experimento se tiene un tubo marcado como blanco, otro como
standard y otro como desconocido (serán las muestras).
Colocar las cantidades según el cuadro.

 Para determinación de glucosa

Componentes
B S D
Solución estándar, ----------- 10 ---------
uL
Muestra , uL ----------- ---------- 10
Reactivo de trabajo, 1 1 1
mL

 Incubar 10min en baño de agua a 37°C.

Luego leer en el espectrofotómetro a 505
nm.

III. RESULTADOS :
IV. DISCUSIÓN:

El trabajo experimentalmente realizado del metabolismo aeróbico y anaeróbico

en bacterias comprobó las teorías acerca del mismo, en la que la respiración
aeróbica utiliza el O2 como aceptor de electrones propia de todos los eucariotas
y de muchos procariotas. La respiración anaeróbica no usa oxígeno, sino que
para la misma función se emplea otra sustancia oxidante distinta, como el
sulfato o el nitrato. En las bacterias con respiración anaerobia interviene
también una cadena transportadora de electrones en la que se reoxidan los
coenzimas reducidos durante la oxidación de los substratos nutrientes.

Se realizó un ambiente aeróbico utilizando un biorreactor de agitación con el

medio de cultivo más la bacteria y un biorreactor estático que contenía una capa
de vaselina para hacer un ambiente en anaerobiosis. Del cual se observó un
crecimiento en ambos ambientes lo que se comprueba la funcionalidad de E.
coli como bacteria anaerobia facultativa; es decir, que puede desarrollarse tanto
en presencia como en ausencia de oxígeno. Las bacterias anaerobias
facultativas pueden obtener energía en ausencia de oxígeno, pero el oxígeno no
les es tóxico

En los resultados obtenidos se observó un mayor crecimiento en un ambiente

aeróbico, es decir, en el birreactor agitado, lo que se aprecia mucho mejor en
la gráfica realizada para los tres parámetros: peso seco, densidad óptica y
consumo de glucosa utilizando el programa de Excel.

V. CONCLUSIONES

o Se estableció diferencias entre los metabolismos aeróbica y

anaeróbica, en relación a la medición de la densidad óptica,
biomasa y consumo de glucosa en los biorreactores de tipo estático
y agitado utilizando la bacteria E.coli.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:

o Brock, D. T.Madigan. MICROBIOLOGÍA.6ta. ed. Edit. Prentice

Hall Hispanoamericana, S.A. México D.F. Mexico.1993.
o Madigan, M y cols. BIOLOGIA DE LOS
MICROORGANISMOS. Edit. Pearson Prentice Hall S.A. Madrid.
España. 2006