Centro: Instituto de Enseanza Secundaria Francisco de Goya Asignatura: Biologa y Geologa Profesora: Ana Mara Vecina

Identificacin de glcidos reductores

Por la reaccin de Fehling

Marina Aledo Serrano 1 de Bachillerato IC

Parte 1: Reconocimiento de azcares reductores por la reaccin de Fehling

Los monosacridos y disacridos (glcidos compuestos por una o dos molculas), formados por carbono, hidrgeno y oxgeno, se caracterizan porque son azcares: tienen sabor dulce, son solubles en agua y forman slidos cristalinos de color blanco. Adems, la mayora poseen poder reductor. Esto es debido a que el grupo aldehdo que contienen (-COH) se oxida transformndose en un cido (grupo carboxilo, -COOH) y reduciendo a otro elemento, en un medio alcalino y a altas temperaturas.

1. Objetivo:
El objetivo de esta prctica es averiguar qu glcidos poseen poder reductor. Para ello, utilizaremos el reactivo de Fehling. El reactivo est formado por dos soluciones, llamadas A y B. La primera es una solucin que contiene una sal cprica (Cu2+) soluble. La B se compone de hidrxido de sodio y una sal orgnica llamada tartrato de so-dio y potasio, tambin conocida como sal de Seignette. Tambin tienen distintos colores:

La solucin A tiene color celeste, y la solucin B es transparente, pero cuando se unen y se agitan ligeramente dan lugar a un azul elctrico intenso. Su reduccin da lugar a un compuesto cuproso (Cu+) que forma un precipitado rojo de xido cuproso Cu2O. R-CHO
Monosacrido cobre

reactivo de Fehling

CuSO4

grupo carboxilo

R-COOH

xido de

Cu2O

grupo aldehido ROJO

Cu

2+

AZUL

Cu+

Esta reaccin se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede transformarse a la forma aldehdo (isomerizacin) dando lugar a un falso positivo. El experimento se realizar con dos tipos de glcidos: maltosa y sacarosa. Se esperan obtener los siguientes resultados: La maltosa debe dar positivo, ya que es un disacrido formado por dos glucosas unidas, mediante enlace O-glucosdico, por el OH del carbono 1 (anomrico) de la primera glucosa, y el OH del carbono 4 del segundo monosacrido, por lo que el OH del carbono anomrico de este ltimo queda libre para reducir al otro elemento (en este caso la sal cprica de la solucin de Fehling). Por otro lado, la sacarosa debe dar negativo. Est formada por un monosacrido de glucosa y otro de fructosa mediante enlace oglucosdico, pero en esta ocasin intervienen los dos OH de los carbonos anomricos de ambos monosacridos, por lo que no puede reducir al otro elemento.

2. Materiales:
Los materiales a usar en este esta prctica son los siguientes: Tubos de ensayo. Gradilla. Pinzas de madera. Pipeta.

Vaso de precipitados. Mechero Bunsen. Trpode y rejilla. Vaso de precipitados grande. Reactivos Fehling A y B. Agua destilada (para preparar la disolucin) Maltosa y sacarosa. Esptula (tambin puede servir una cucharilla)

3. Mtodo:
El procedimiento a seguir, se compone de las siguientes fases:
1) Preparamos 3 mL de agua destilada en un tubo de ensayo,

echamos en ste un poco de maltosa con la esptula, ponemos el tapn al tubo y agitamos suavemente hasta disolver la muestra.
2) Retiramos el tapn y aadimos a la disolucin 1 mL de Fehling A

y otro mililitro de Fehling B (siempre con pipetas distintas para evitar la contaminacin). Tras esto la disolucin adquirir el color azul intenso nombrado anteriormente.
3) Ponemos a calentar el tubo de ensayo al bao mara, marcando

anteriormente el tubo para evitar confusiones. Tambin se puede calentar sobre la llama del mechero. Tras diez minutos calentando (el tiempo depende de la cantidad de glcido se haya aadido), tendremos la respuesta: Si el glcido es reductor, el azul del tubo de ensayo tornar a rojizo, mientras que si el resultado en negativo, el tubo apenas cambiar de color y permacer

azul o un poco verdoso. A continuacin, se lleva a cabo el mismo procedimiento pero cambiando la muestra: la maltosa por la sacarosa.

4. Resultados y conclusiones:
Maltosa: La maltosa reacciona como esperbamos. Su resultado es
positivo en la prueba. Al comenzar a calentar, el azul va tornando verdoso de arriba hacia abajo, y poco a poco este verde tambin se va convirtiendo en rojo. Conclusin: La maltosa es un disacrido que posee poder reductor.

Sacarosa: Con la sacarosa realizamos la experiencia en dos

ocasiones: 1: La primera experiencia con la sacarosa resulta errnea. Como se ha nombrado anteriormente, la sacarosa no tiene poder reductor, ya que en el enlace O-glucosdico participan los OH de los dos carbonos anomricos. Sin embargo, al poner al bao mara el tubo de ensayo tras haber realizado todo el procedimiento sin problemas, la sacarosa presenta un comportamiento extrao. Comienza a transformarse a verdoso de arriba hacia abajo, como le ocurre a la maltosa, y conforme pasan los minutos ese verdoso torna a marrn arcilla que, aunque no sea tan vivaz como el de la maltosa, sigue siendo un claro positivo. Esto podra deberse a que los materiales, los glcidos o los reactivos usados se encontraban contaminados, por lo que nos vimos obligados a repetir la prueba. 2: La segunda experiencia result todo un xito. Utilizamos unos materiales y reactivos distintos para realizarla, lo que dio lugar al resultado que esperbamos. Al colocarla al bao mara, la sacarosa torna a un azul grisceo. No cambia a rojo, a excepcin de una pequea cantidad de precipitado rojizo que se observa en la parte inferior del tubo del ensayo. Conclusin: La sacarosa es un disacrido que carece de poder reductor. Los resultados con otros azcares son los siguientes: Disolucin Color Reductor

Glucosa Fructosa Lactosa

Rojo Rojo Rojo

S S S

Parte 2: Poder reductor de la sacarosa mediante hidrlisis.

Como ya hemos observado en la experiencia anterior, la sacarosa carece de poder reductor debido a que en el enlace O-glucosdico participan los -OH de los dos carbonos anomricos de la glucosa y fructosa que la forman. Sin embargo, al aadir cido clorhdrico y a altas temperaturas, la sacarosa se hidroliza, dando lugar a dos monosacridos (glucosa y fructosa) que s son reductores.

1: Objetivos
El fin de esta prctica es observar el fenmeno de la hidrlisis. La primera parte de la experiencia consiste en hidrolizar la sacarosa, mientras que la segunda parte corresponde a la comprobacin de sta: si ha concluido bien. Para ello utilizamos de nuevo la prueba de Fehling. Si la hidrlisis ha finalizado de manera correcta, la prueba de Fehling dar lugar a resultado positivo, mientras que si la prueba sigue dando un resultado negativo, indica que la hidrlisis no se ha completado. Rojo: Se ha producido la hidrlisis correctamente. Azul: No se ha producido la hidrlisis Verde: Se ha producido una hidrlisis parcial.

2: Materiales
Los materiales a usar durante esta prctica son:

Tubos de ensayo. Gradilla. Pinzas de madera. Pipeta. Vaso de precipitados. Mechero Bunsen. Trpode y rejilla. Dos vasos de precipitados grandes. Reactivos Fehling A y B. Agua destilada (para preparar la disolucin). Esptula (tambin puede servir una cucharilla) Sacarosa cido clorhdrico (HCl) y NaOH o Bicarbonato (opcional)

+
3: Mtodo
El procedimiento utilizado es el siguiente:
1) Preparamos una disolucin de 2 cucharaditas de sacarosa en

unos 60mL de H2O. 2) Con la ayuda de una pipeta, depositamos tres mililitros de la disolucin de un tubo de ensayo.
3) Aadimos con otra pipeta 1mL de HCl. 4) Marcamos el tubo de ensayo y lo ponemos al bao mara

durante diez minutos.

5) Pasados los diez minutos, ponemos el tubo a enfriar en un vaso

con agua.
6) Al finalizar esta fase, muchos de nuestros compaeros aadieron

a la disolucin un 20% de NaOH neutralizador, y otros con un poco de bicarbonato. Nosotros no neutralizamos la disolucin.

7) Aadimos 1mL de Fehling A y otro de Fehling B, le ponemos el

tapn al tubo de ensayo, agitamos un poco y lo ponemos de nuevo al bao mara durante otros diez minutos. (En este momento la disolucin es azul debido a la solucin de fehling)
8) Al retirar el tubo de ensayo del bao mara a los diez minutos,

observaremos los resultados.

4: Resultados y conclusiones
Al finalizar la prctica, se nos muestran tres tipos de tonos: Neutralizada No S S Neutralizador NaOH Bicarbonato Color Rojo chilln Marrn oscuro Naranja Hidrolizada S S S

En los tres casos, el color pas por verde de arriba hacia abajo antes de finalizar al color de la tabla. Tambin coincidieron en el precipitado: en los tres se observaba una pequea cantidad de ste en la parte inferior del tubo de ensayo.

5. Referencias bibliogrficas (1 y 2 parte)

Wikipedia: http://es.wikipedia.org/wiki/Reactivo_de_Fehling Blog dedicado a los glcidos: http://carbohidratosytemasrelacionados.blogspot.com/2011/04/tiposde-carbohidratos.html Yahoo respuestas: http://es.answers.yahoo.com/question/index? qid=20061204175910AAUruI7 Profes.net, pgina dedicada a propuestas de actividades para profesores: http://www.profes.net/rep_documentos/Propuestas_2%C2%BA_ciclo_ES

O/BA%20Glucidos.%20determinaci %C3%B3n_de_glucidos_reductores_por_Fehling.pdf Blog dedicado a la Bioqumica : http://sara-dita5.blogspot.com/2008_04_01_archive.html Selectividad.net, pgina dedicada a los contenidos de la PAU: http://www.selectividad.net/cem/apuntesexamenes/apuntes/biologia/gl ucidos.pdf