UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE EDUCACION Y CIENCIAS

DEPARTAMETO DE BIOLOGIA Y QUIMICA
PROGRAMA DE BIOLOGIA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA I
GRUPO LUNES 8-10 aM
GUIA DE LABORATORIO PRACTICA Nº5
IDENTIFICACION DE LIPIDOS

INTRODUCCION

Los lípidos biológicos integran un grupo de moléculas orgánicas diversas que se caracterizan
por su solubilidad en solventes orgánicos como cloroformo, benceno y otros. Entre las
funciones se pueden mencionar: Reserva energética (aceites, grasas, ceras), moléculas que
hacen parte de la estructura de las biomembranas (fosfolípidos, glucolípidos, lípidos éter en
Archea, esfingolípidos y esteroles); finalmente, entre un 5% a 10% actúan como cofactores
enzimáticos, transporte de electrones, emulsionantes, hormonas mensajeras intracelulares y
vitaminas liposolubles. Los lípidos por su estructura son moléculas insolubles en un ambiente
acuoso, por lo tanto para su reconocimiento, extracción e identificación se requiere de métodos
y solventes orgánicos que son poco usados para los estudios de carbohidratos, proteínas y
ácidos nucleicos; en consecuencia, entre los métodos mas comunes se encuentran las
pruebas de: Solubilidad, tinción (Prueba de Sudán), saponificación, instauración (Prueba de
Yodo), para la glicerina (Prueba de acroleína), glicerol, fusión (presencia de fósforo
inorgánico), valor de acidez, reacción de Lieberman; asimismo. Los lípidos se pueden extraer
con éter etílico, cloroformo, benceno, etanol, metanol y se separan mediante cromatografía de
capa fina, adsorción, gas-líquido, cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), finalmente
la espectrofotometría de masas revela la estructura molecular del lípido en forma completa.

OBJETIVOS
 Identificar la presencia de lípidos de origen vegetal y animal.
 Cada grupo elabora los objetivos específicos y los presenta al inicio del laboratorio.

HIPOTESIS
Cada grupo elabora la hipótesis correspondiente y la presenta al inicio del laboratorio.

MATERIALES, REACTIVOS y EQUIPOS

 POR GRUPO
- 2 Pipetas graduadas de 2 y 5 ml. - Gradilla para los tubos de ensayo.
- 6 tubos de ensayo por grupo. - Aceite vegetal. -
- 6 tapones para los tubos de ensayo. - Grasa animal usada.
- 1 pinza para tubos de ensayo. - Leche
- 1 Beaker de 50 o 100 ml. -

 DE USO COMÚN
- 4 Baños de agua hirviendo para el - Solución de NaOH al 20%
experimento. - Cloroformo.
- 4 Mecheros - Éter.
- Soluciones de sacarosa 1% p/v. - Solución alcohólica de Sudán III.
- Tinta china roja. - Anhídrido acético

PROCEDIMIENTOS
1. PRUEBA DE SOLUBILIDAD
RAMON LOZAA DEVIA
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 En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:

- Tubo 1: 2 ml de aceite vegetal y agregue 2 ml de eter o cloroformo
- Tubo 2: 2 ml de grasa animall y agregue 2 ml de éter o cloroformo
- Tubo 3: 2 ml de aceite vegetal y agregue 2 ml de agua.
- Tubo 4: 2 ml de grasa animal usada o no y agregue 3 ml de agua
 Agitar en forma muy fuerte y deje reposar
 Observe y anote los resultados.

2. ENSAYO DE TINCIÓN
 En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:
 Tubo 1: 2 ml de aceite vegetal y añada 0.25 ml de solución alcohólica de Sudán III.
 Tubo 2: 2 ml de grasa animal usada más 0.25 ml de solución alcohólica de Sudán III.
 Tubo 3: 2 ml de leche y añada 0.25 ml de solución alcohólica de Sudán III.
 Tubo 4: 2 ml de aceite vegetal agregue 0.25 ml de tinta roja.
 Agitar en forma muy fuerte y deje reposar
 Observe y anote los resultados.

3. SAPONIFICACIÓN
 En cuatro tubos de ensayo desarrolle el siguiente procedimiento:
 Tubo 1: 2 ml de grasa animal usada y añada 2 ml de una solución de NaOH 20%
p/v.
 Agitar vigorosamente hasta una mezcla completa
 Colocar el tubo en un baño maría durante 20 min.
 Observar el tubo al cabo de 15 min.
 Agitar fuertemente y ubicar los tubos en un baño de María por 20 a 30 minutos.
 Después del tiempo anterior (20 a 30 minutos), observe la formación de varias capas.
 Hacder unaprueba para comprobar que si se formo jabón.
 Agregar un poco de la `pasta fomadz en la fae intermedia a 2 ml de agua y agitar
fuertemente.
 Observar

4. ENSAYO DE LIEBERMAN-BURCHARD
 En un tuno de ensayo se agrega 1q ml de yema de hbeaker se colocan 10 ml de
cloroformo y se le agrega 1 ml de yema de huevo
 Agregar 10 ml de cloroformo
 Agitar fuertemente hasta solubilidad total
 Observar los cambios que se producen
 A un tubo de ensayo seco se le adiciona 1 ml de la solución anterior; posteriormente, se
adiciona 1 ml de anhídrido acético y enseguida se agrega 0.2 ml (4 gotas) de [H2SO4]
con precaución.
 Un color verde azuloso indica una prueba positiva para colesterol; mientras, la
formación rápida de un color rojo señala la presencia de ergosterol.

PREGUNTAS
 Cuál es el fundamento de todas las pruebas realizadas
 Escriba las reacciones de todas las pruebas realizadas
 En qué consiste el proceso de saponificación
 Cómo se define un jabón
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 Por qué los lípidos son insolubles en agua

 Por qué los lípidos se colorean con sudan III
 Qué aplicación puede cumplir la prueba de Liebermann-Burchard

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