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INTRODUCCIN
Hoy en da la industria licorera y alimenticia utiliza varios tipos de mtodos analticos para
la determinacin azcar y alcohol en los licores y/o bebidas a utilizar como medio de
venta. Uno de los mtodos ms acordes y con mejor resultados en la determinacin de los
azucares con carcter reductor, es el mtodo (DNS), mtodo que ha sufrido varias
modificaciones a travs de los aos para adecuarse al anlisis de diferentes materiales y su
principal ventaja radica en su alta sensibilidad y productividad debido a que es un mtodo
espectrofotomtrico; el procedimiento se basa en una reaccin redox que ocurre entre el
DNS y los azcares reductores presentes en la muestra, sin embargo a nivel industrial no es
recomendable utilizarlo cuando dicha trata sustancias tales como mieles y caldos de
fermentacin que lo contengan, esto debido a segn estudios realizados en la materia, a los
altos niveles de dispersin.
El presente informe desarrollara el procedimiento respectivo para la determinacin de
azucares reductores a partir de una solucin patrn de glucosa de concentracin 1g/L, que
permitir realizar y ajustar una curva de calibracin, y una solucin desconocida; por el
mtodo del cido 3,5 dinitro saliclico (DNS).
2. DATOS
Se utiliz una solucin patrn de glucosa ( l ) (1g/L)
En la Tabla 1.0 se muestra las cantidades de volumen de solucin de glucosa, agua
destilada y solucin DNS necesarias para la realizacin de las 5 soluciones y el blanco (que
5
0.5
0
2
2.5
(Ec. 1)
Esta es la ecuacin No. 1 (Ec. 1), despejando de esta ecuacin la C2, que es la de inters se
obtiene
V C
C2 = 1 1
V2
De esta ecuacin se sabe que la C 1 es la concentracin de la solucin patrn de glucosa
(1g/L), y el volumen final (V 2) que es 6,5mL que es el volumen obtenido despus de
agregar los 4mL de agua en todas las soluciones. A partir de esta ecuacin se determinan las
concentraciones de la siguiente manera:
0.1 mL1 g / L 1
= g/L
6.5 mL
65
Este proceso se repite hasta obtener las concentraciones de azcar de las 5 soluciones a
estudiar, los cuales estn registrados en la Tabla No. 2
Dilucin
Blanco
1
2
3
4
Concentracin (g/L)
0
1/65
2/65
3/65
4/65
Tabla No. 2 Concentracin de azcar de las 5 soluciones.
5
5/65
Dilucin
Blanco
1
2
3
4
5
Absorbancia (Abs)
0
0.029
0.178 0.396 0.571 0.778
Tabla No. 3 Datos de absorbancia tomados con el espectrofotmetro.
Con estos datos tomados durante la prctica se construye la curva de calibracin, que
relaciona las concentraciones de las diferentes soluciones y la absorbancia medida en cada
una de ellas. La tabla No. 4 nos relaciona estos datos.
No.
Solucin
Concentracin Absorbancia
Blanco
0
0
1
0,015384615
0,029
2
0,030769231
0,178
3
0,046153846
0,396
4
0,061538462
0,571
5
0,076923077
0,778
Tabla No. 4 Datos para la construccin de la curva de calibracin
Para el estudio de la muestra es necesario hacer una dilucin ya que los azucares estn muy
concentrados y se obtendran resultados que no se ajustan a la curva de calibracin.
Las dos diluciones realizadas para la muestra fueron 1:20 y 1:30
1:20 Por 1mL de muestra, se agregan 19mL de agua.
1:30 Por 1mL de muestra, se agregan 29mL de agua.
Para estas dos diluciones se realiza el mismo procedimiento que con las soluciones
anteriores y se mide la absorbancia en el espectrofotmetro, utilizando el mismo blanco
utilizado en las anteriores soluciones. De estos datos tomados se obtiene la Tabla No. 6, que
muestra las absorbancias tomadas para las muestras.
No. De Muestra
Dilucin
Absorbancia (Abs)
1
1:20
0.944
2
1:30
0.410
Tabla No. 5 Datos de absorbancia tomados para la muestra
3. RESULTADOS
Con la (Tabla No.4) se obtiene la (Grfica No. 1) que es la curva de calibracin obtenida
de acuerdo con los datos tomados durante la prctica.
Curva de Calibracin
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
Absorbancia
0.4
0.3
0.2
0.1
0
Concentracin de azucar
Muestra problema
Para la muestra a estudiar se tienen los datos mostrados en la Tabla No. 5, que es la
informacin obtenida de la informacin nutricional que viene del fabricante de la
muestra, con la cual se podr comparar con los resultados obtenidos durante la
realizacin de la prctica.
Muestra: jugo de naranja sinttico marca Cifrut de la compaa AJE; cuyo
concentracin de azucares es de 27g/240ml es decir 112,5g/L
Dilucin
Volumen de solucin 1:20 (mL)
Volumen de DNS (mL)
Volumen total (mL)
Absorbancia a (540nm)
Y +0,0842
10,649
0,944 +0,0227
=0,0770 g/ L
12,551
0,410+ 0,0227
=0,0344751 g /L
12,551