LABORATORIO DE QUMICA ORGANICA 502502

GUA No 7: RECONOCIMIENTO Y DIFERENCIACIN DE CARBOHIDRATOS

I. PROBLEMA
Reconocer los carbohidratos por medio de reacciones coloreadas de carcter cualitativo.
Diferenciar Hexosas de pentosas
Diferenciar e identificar azucares reductores y no reductores
Diferenciar monosacridos, disacridos y polisacaridos
Diferenciar aldosas de cetosas.

II. FUNDAMENTO TEORICO

Los carbohidratos tambin llamados azcares, osas o sacridos, son polihidrxialdehidos o
polihidroxicetonas o compuestos polimricos que por hidrlisis producen polihidroxialdehidos y
polihidroxicetonas.
Segn el nmero de unidades de azcares sencillos que posean se clasifican en:
MONOSACRIDOS o azcares sencillos, que a su vez pueden ser ALDOSAS cuando contienen
el grupo aldehdo o CETOSAS cuando contienen el grupo cetona. Los monosacridos naturales
pertenecen a la serie D de los azcares y pueden tener entre tres y hasta siete tomos de
carbono.
DISACRIDOS que estn formados por dos monosacridos unidos entre s por enlaces
glucosdicos.
OLIGOSACRIDOS que tienen entre tres y diez monosacridos unidos tambin por enlaces
glucosdicos.
POLISACRIDOS que son polmeros naturales con varios miles de unidades de azcar sencillo
ligadas entre s.
De acuerdo con lo anterior, adems de reconocer si un compuesto pertenece a la familia de los
carbohidratos, es necesario diferenciar si se trata de un monosacrido tipo aldosa o cetosa, si es
fcilmente oxidable o no, es decir si es un AZCAR REDUCTOR o no lo es, si es de cinco
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tomos de carbono (pentosa) o de seis tomos de carbono (hexosa), si es disacrido o

polisacrido.
Una secuencia que permite hacer el reconocimiento y diferenciacin de carbohidratos se
esquematiza en la FIGURA 1.
Ensayo de Molisch: Este ensayo es un ensayo para reconocimiento general de carbohidratos en
el que los polisacridos y disacridos se hidrolizan con cido sulfrico concentrado hasta
monosacridos y se convierten en derivados del furfural o 5-hidroximetil furfural los cuales
reaccionan con -naftol formando un color prpura violeta.
Ensayo de Benedict: El ensayo de Benedict permite el reconocimiento de carbohidratos
reductores, al igual que el reactivo de Felhing, el de Benedict contiene ion cprico en medio
alcalino que se reduce hasta xido cuproso en presencia de azcares con el hidroxilo
hemiacetlico libre.
Ensayo de Barfoed: Esta prueba permite diferenciar entre monosacridos y disacridos
reductores, tambin contiene ion cprico que se reduce hasta xido cuproso ms rpidamente
con los monosacridos que con los disacridos.
Ensayo con Lugol: El reactivo de Lugol que contiene una mezcla de yodo y yoduro, permite
reconocer polisacridos, particularmente el almidn por la formacin de una coloracin azlvioleta intensa y el glicgeno y las dextrinas por formacin de coloracin roja.
Ensayo de Seliwanoff: Este ensayo es especfico para cetosas y se basa en la conversin de la
cetosa en 5-hidro-metil-furfural y su posterior condensacin con resorcinol formando as
complejos coloreados.
Ensayo de Bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en cido clorhdrico, el cual forma complejos
de coloracin slo con las pentosas.
De otro lado una propiedad importante que permite identificar los carbohidratos, y determinar el
grado de pureza de los mismos, particularmente monosacrios es la rotacin ptica ocasionada
por la presencia de centros asimtricos o quirales en la estructura molecular, los cuales desvan
el plano de luz polarizada.
Esta propiedad no es exclusiva de los carbohidratos pues la presentan todas aquellas sustancias
denominadas ptimamente activas, por tener en su estructura centros quirales.
Para la medicin de la rotacin ptica los factores importantes a tener en cuenta son: La longitud
de onda de luz polarizada, la cantidad de material ptimamente activo, y la naturaleza del
solvente cuando se usa. Los cambios en la temperatura ocasionan solo pequeas variaciones en
las medidas de la rotacin.
Los datos de rotacin ptica se representan como | ] = rotacin especfica o | M ] = Rotacin
molecular, donde:
||=
LC

: Rotacin observada en grados angulares

L : Longitud en decmetros del paso de luz
polarizada a travs de la muestra
C : Concentracin en gramos por mililitro.
M : Peso molecular

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|M|=Mx||
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cuando el plano de luz polarizada se desva en el sentido de las manecillas del reloj se antepone
un signo positivo al nmero de grados que fue rotado el plano de luz y la sustancia se denomina
como DEXTRO ROTATORIA, en el sentido contrario se antepone un signo negativo y se
denomina LEVO-ROTATORIA.
III. TEMAS DE CONSULTA
Elabore el preinforme con las siguientes indicaciones:
Frmulas estructurales en proyeccin de FISHER y de HAWORTH de la glucosa, galactosa,
fructosa, ribosa.
Frmula estructural en proyeccin de HAWORTH de la sacarosa.
Breve descripcin de los polisacridos: almidn y glicgeno.
Reacciones de oxidacin de monosacridos reductores, ilustradas con la estructura en
proyeccin de FISHER de la glucosa.
Funciones e importancia biolgica de los carbohidratos.
Fundamentos de polarimetra que debe incluir: diferenciacin entre luz monocromatica y luz
polarizada. Funcionamiento y partes del polarmetro.
Extraccin y refinamiento del azcar de caa (sacarosa).
Aplicaciones industriales de la celulosa
Construya las tablas de identificacin y diferenciacin de azucares, puede usar los modelos de
los preinformes anteriores.1
Tabla No 1: Identificacin de monosacaridos
compuesto
frmula
reactivo

observaciones

Reaccin qumica

IV. MATERIALES
Por grupo
16 tubos de ensayo
Una pipeta graduada de 1 ml
Una pipeta graduada de 5 m
Un vaso de precipitados de 500 ml
Una varilla de vidrio
Una placa de calentamiento
Una gradilla para tubos de ensayo
Una pinza metlica para tubo de ensayo
Un aro con nuez
Una esptula
Perlas de vidrio
De uso comn
Plancha de calentamiento
Una pipeta para cada reactivo.
Polarmetro

Estas tablas debe traerlas con el preinforme, debidamente diligenciadas

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Reactivos
Muestras problema2
Alfa-naftol al 10%
cido clorhdrico concentrado
cido sulfrico concentrado
Rreactivo de Felhing A
Reactivo de Felhing B
Rreactivo de Tollens
Reactivo de Seliwanoff
Reactivo de Bial
Lugol
Soluciones acuosas al 1% de: almidn, glicgeno, sacarosa, maltosa, glucosa, galactosa,
fructosa, ribosa, arabinosa.
Solucin de glucosa al 10%.
Solucin de sacarosa al 10%.
Solucin fructosa al 10%.
Solucin de sacarosa al 10% en cido clorhdrico 0.5M
V. PROCEDIMIENTO
Realice los ensayos que se describen a continuacin, en tubos de ensayo LIMPIOS Y SECOS,
con las soluciones patrn de los carbohidratos que se indican en cada caso y la muestra
problema.
Ensayo de Molisch:
Soluciones patrn de carbohidratos : ARABINOSA, GLUCOSA, FRUCTOSA, SACAROSA Y
ALMIDN.
Coloque en un tubo de ensayo 2.0 mL de la solucin del carbohidrato y agregue 0.2 mL de naftol al 10%, mezcle bien y luego adicione CUIDADOSAMENTE POR LAS PAREDES DEL
TUBO, 1 mL de cido sulfrico concentrado, la formacin de un anillo violeta en la interfase es
prueba positiva para carbohidratos.
Ensayo de Lugol
Soluciones patrn de carbohidratos: ALMIDN Y GLICGENO.
Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solucin del carbohidrato y agregue 0.2 ml de Lugol,
mezcle y observe la formacin de los colores rojo para glicgeno, azul-violeta para almidn como
pruebas positivas.
Ensayo de Benedict:
Soluciones patrn de carbohidratos: GLUCOSA, MALTOSA Y SACAROSA.
Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solucin del carbohidrato y agregue 0.1 ml del
reactivo de Benedict, caliente al bao mara. La formacin de un precipitado amarillo o rojizo, es
prueba positiva para carbohidratos reductores.

El profesor asignar muestras problema para cada grupo

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Ensayo de Barfoed:
Soluciones patrn de carbohidratos: GLUCOSA, MALTOSA Y SACAROSA.
Coloque en un tubo de ensayo 2.0 mL de la solucin del carbohidrato y agregue 2 ml del reactivo
de Barfoed, caliente en bao mara a ebullicin. La formacin de un precipitado rojo entre 5 y 7
minutos, es prueba positiva para MONOSACRIDOS REDUCTORES. Si el precipitado se forma
entre 10 y 12 minutos, la prueba es positiva para DISACRIDOS REDUCTORES.
Ensayo de Seliwanoff:
Soluciones patrn de carbohidratos:

FRUCTUOSA Y GLUCOSA.

Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solucin del carbohidrato y agregue 2 ml del reactivo
de Seliwanoff, caliente en bao mara a ebullicin por dos minutos. La formacin de una
coloracin roja es prueba positiva para cetosas.
Ensayo de Bial:
Soluciones patrn de carbohidratos:

RIBOSA, ARABINOSA Y GLUCOSA.

Coloque en un tubo de ensayo 2.0 ml de la solucin del carbohidrato y agregue 3 ml del reactivo
de Bial, caliente en bao mara a ebullicin y observe. La formacin de una coloracin verdosa
es prueba positiva para pentosas.
Medicin de la rotacin ptica:
Segn la instruccin del profesor proceda a medir la rotacin ptica en el polarmetro para las
soluciones de glucosa al 10%, fructosa al 10% sacarosa al 10% y sacarosa al 10% en HCl.
Muestra problema
El profesor le asignar una muestra problema para identificar y clasificar.
En un papel escriba el nmero de la muestra problema, las reacciones que utiliz y los
resultados que obtuvo, diga si el problema corresponde a: un monosacrido, un disacridos, un
polisacrido, un pentosa, una hexosa una cetosa una aldosa o una combinacin de alguno de
ellos. y entrguelo antes de terminar el laboratorio. Use las indicaciones de la Figura 1 para
realizar las pruebas.

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Figura No 1 RECONOCIMIENTO DE CARBOHIDRATOS

REACCIN DE MOLISCH
Anillo rojo violeta
Si es Carbohidrato

Incoloro
No es Carbohidrato

REACCIN DE BENEDICT

Reaccin negativa:
Grupos reductores no libres
REACCIN CON LUGOL

Color Azul:
Al id

Color amarillo naranja:

Grupos reductores libres
REACCIN DE BARFOED

No precipitado:
No reductores o Sacarosa

Color rojo:
Glicgeno o Dextrina

Reaccin negativa:
Monosacridos o Disacridos no
reductores

Precipitado rojo
ladrillo en 5-7
minutos:
Monosacrido
reductor

Precipitado rojo
ladrillo en 7-12
minutos:
Disacrido reductor

Formacin de Osazonas

Cristales de color amarillo:

REACCIN DE SELIWANOFF

Negativo: Aldosas

Negativo:
Hexosas

Color rojo: Cetosas

Color verde: Pentosas

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VI. GUA DE INFORME

Elabore tablas3 con los resultados de los ensayos realizados.
Anlisis de los resultados obtenidos en cada ensayo para la muestra problema, comparando con
los resultados obtenidos para las soluciones patrn de carbohidrato correspondiente.
Con base en el anlisis, caracterizar la sustancia problema; si es polisacrido, disacrido,
monosacrido. En caso de ser disacrido o monosacrido si es o no reductor. Si se trata de un
monosacrido indicar si es aldopentosa, cetopentosa, aldohexosa o cetohexosa.
Analizar los resultados obtenidos de la medicin de las rotaciones pticas en las diferentes
soluciones medidas.
Describa el anlisis y las reacciones que sigui para identificar la muestra problema, si ya
conoce el nombre del compuesto problema discuta los resultaos reportados.
VII. BIBLIOGRAFA
Hart H., Craine L. y Hart. D. Qumica Orgnica. McGraw Hill. Novena edicin. Espaa. 1997.
McMurry, J. Qumica Orgnica. Quinta edicin, Thomson editores, Mxico, 2001
The Merck Index: an encyclopedia of chemical. Drugs and Biologicals. Budavari S. Guide for
safety in the Chemical Laboratory.
Carey Francis A. Qumica Orgnica Mc Graw Hill , Tercera Edicin . Espaa. 2000

Estas no pueden ser las mismas tablas que present en el preinforme, por que ya conoce los resultados del
laboratorio.
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