UNIVERSIDAD DEL SINÚ – ELÍAS BECHARA

PROGRAMA DE OPTOMETRÍA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA I

INFORME PRÁCTICA
IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS
Miranda Camilo1, Peñaloza Luz1, PhD. Ospino Laura.
1Estudiante de I Semestre de Optometría, 2Docente de la Universidad del SINÚ.

RESUMEN

Dentro de la ejecución de la práctica de laboratorio se utilizó 5 gotas del reactivo de Molish

para el reconocimiento de la presencia de Carbohidratos presentes en 1 ml de leche con
ácido sulfúrico como agente donde se evidenciaron dos capas. Por otro lado, se realizó la
diferenciación de los azucares no reductores mediante el test en el reactivo de Benedict con
tres muestras de lactosa, glucosa y sacarosa, todas utilizando 0.5 ml de muestra y;
finalmente se realizó el reconocimiento de la presencia de polisacáridos en una solución de
almidón, a la cual se le agregó 1 gota de yodo.

Palabras clave: Carbohidratos, Glucosa, Almidón, Sacarosa, Maltosa, Reactivo de Molish,

Reactivo de Yodo, Reactivo de Benedict, Ácido sulfúrico, Aldosas, Cetosas,
Monosacáridos, Disacáridos, Oligosacáridos, Polisacáridos.

ABSTRACT

Within the execution of the laboratory practice, 5 drops of Molish's reagent were used for
the recognition of the presence of carbohydrates present in 1 ml of milk with sulfuric acid
as an agent where two layers were evidenced. On the other hand, the differentiation of non-
reducing sugars was carried out by means of the Benedict's reagent test with three samples
of lactose, glucose and sucrose, all using 0.5 ml of sample; and finally, the recognition of
the presence of polysaccharides in a starch solution, to which 1 drop of iodine was added.

Keywords: Carbohydrates, Glucose, Starch, Sucrose, Maltose, Molish's Reagent, Iodine

Reagent, Benedict's Reagent, Sulfuric Acid, Aldoses, Ketoses, Monosaccharides,
Disaccharides, Oligosaccharides, Polysaccharides.

1. INTRODUCCIÓN

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Los hidratos de carbono son la agrupación de biomoléculas más presente sobre la
tierra, con una representación aproximada del 75 % de la materia orgánica real.
Algunas veces, son denominados como carbohidratos, azúcares, sacáridos o
glúcidos. Todos hacen alusión a su sabor dulce, o a que contienen la composición
Cn(H2O)n. Aunque dicha nomenclatura subsiste, no todos poseen sabor dulce ni
manifiestan tal composición. En los animales los hidratos de carbono son esenciales
desde la visión energético, debido a que órganos y células del cuerpo humano, como
el cerebro y los glóbulos rojos, adquieren su energía principalmente de la glucosa.
Sin embargo, sus funciones no se limitan a ser únicamente fuente de energía, sino
que también pueden desenvolver funciones estructurales, de reconocimiento celular
y adhesión.

Dicho de otro modo, son una forma importante de almacenar energía; los que
conocemos como las azúcares y polímeros de azúcares. Estas moléculas usualmente
contienen carbono, hidrógeno y oxígeno en una proporción de 1:2:1. Los
carbohidratos se clasifican como monosacáridos, oligosacáridos, disacáridos o
polisacáridos, dependiendo del tamaño y la complejidad de la molécula. Los
monosacáridos contienen de 3 a 8 átomos de carbono. Son las unidades básicas y no
pueden hidrolizarse para dar azúcares más sencillos. Los oligosacáridos son
compuestos formados por uniones de algunos monosacáridos. Los más importantes
tienen sólo 2 unidades y reciben el nombre de disacáridos. Por último, los
polisacáridos están constituidos por un alto número de unidades de monosacáridos.
Son largas cadenas lineales o ramificadas, dependiendo del tipo de unión entre las
unidades. Se dividen en homopolisacáridos y heteropolisacáridos según estén
formados por el mismo tipo de monosacárido o por varios diferentes.

2
Reactivo de Molish: Este permite evidenciar la presencia de carbohidratos en una
muestra, bajo hidrolización y deshidratación en medio de ácido sulfúrico sobre estos
compuestos. Es sabido que los ácidos en alta concentración, dan paso a una
deshidratación de azucares para rendir furfurales (derivados del furano); Estos se
condensan con los fenoles para la producción de productos de colores
caracteristicos, usados comúnmente en el análisis colorimétrico.

Las aldosas (monosacárido (cierto tipo de azúcares) conteniendo un grupo

aldehído por molécula . Su fórmula química de la forma genérica C n H 2n O n
(n>=3). Los carbonos se van numerando desde el grupo aldehído (el más oxidado
de la molécula) hacia abajo), y cetosas (monosacáridos que contienen al menos un
grupo “cetona” en su estructura molecular, es decir, a un grupo caracterizado
como RC (=O)R’, que representa el grupo funcional más oxidado de la molécula)
en presencia de ácidos minerales como el sulfúrico y expuestos a altas temperaturas,
sufren deshidratación originando furfural.

La reacción de Molish es una reacción que tiñe cualquier carbohidrato presente en

una disolución; es llamada así en honor del botánico austríaco Hans Molisch

La presencia de carbohidratos en una muestra se pone de manifiesto por la reacción

de Molish que a cierto punto es la reacción universal para cualquier carbohidrato

Reactivo de Yodo: Se usa para detectar almidón. El almidón es un polímero de

glucosa producido por las plantas y es una fuente importante de energía
almacenada. La molécula de almidón forma hélices entre las cuales se inserta el
yodo, tiñendo el almidón de azul oscuro a negro.

Reactivo de Benedict: Muchos monosacáridos, como la glucosa y la fructosa, y

algunos disacáridos, son azúcares reductores porque poseen un aldehído libre (no
enlazado a los otros grupos en la molécula). La Prueba de Benedict se usa para
detectar la presencia de azúcares reductores porque el reactivo de Benedict contiene
cobre que se reduce en presencia de azúcares reductores. Durante esta reacción el
azúcar se oxida. La reacción antes mencionada se conoce como una reacción
oxidación-reducción (―REDOX‖) porque la oxidación del azúcar sucede
simultáneamente con la reacción de reducción del cobre.

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  Cuando se añade el reactivo de Benedict al azúcar reductor, y se aplica
calor, el color de la mezcla cambia a naranja o ladrillo intenso mientras
mayor sea la abundancia de azúcares reductores.
 Un cambio a color verde indica la presencia de menos azúcares reductores.
 Las azúcares que no reducen, como la sacarosa, no producen cambios en
color y la solución se mantiene azul.
 Los monosacáridos que forman anillos no son azúcares reductores porque no
tienen un grupo aldehído libre, pero pueden reducir si se convierten en
monosacáridos abiertos.

La ejecución de esta práctica de laboratorio, consiste en estudiar algunas reacciones

químicas en las que participan estos hidratos de carbono, que constituyen la base
para la caracterización cualitativa de cada uno de los grupos principales y de
reconocimiento de los distintos tipos de azúcares.

2. OBJETIVOS

2.1. GENERAL

2.1.1. Determinar carbohidratos en una matriz biológica utilizando métodos químicos

cualitativos

2.2. ESPECIFICOS

2.2.1. Reconocer la presencia de carbohidratos en una muestra problema mediante la

prueba de Molish.

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2.2.2. Diferenciar carbohidratos reductores de no reductores por su comportamiento frente
al reactivo de Benedict.
2.2.3. Realizar ensayos cualitativos para el reconocimiento de carbohidratos específicos.

3. METODOLOGIA

3.1. EQUIPOS Y MATERIALES

 Estufa  H2SO4
 Tubos de Ensayo  Solución de Yodo
 Guantes  R de Benedict
 Gradilla Plástica  Solución de glucosa
 Pipeta  Solución de glucosa
 Beaker  Solución de almidón
 Tapabocas  Solución de sacarosa
 Reactivos R de Molish  Solución de Maltosa

3.2. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

3.2.1. Prueba de Molish: Agregue 5 gotas del reactivo de Molish a 1 ml de una muestra
que contenga carbohidratos (Leche). Añada cuidadosamente por las paredes del
tubo 1ml de ácido sulfúrico concentrado, hasta que se formen dos capas. Observe
cualquier cambio de color en la interface de los dos líquidos.

3.2.2. Prueba para polisacáridos: Coloque 1ml de solución de almidón, añada 1 gotas de
solución de yodo. Observe la producción de un color azul. Caliente el tubo ¿Qué
observa? Deje enfriar y observe nuevamente, ¿Qué ocurre? Explique sus
observaciones.

3.2.3. Prueba de Benedict: Tome 3 tubos de ensayo; agregue al primero 0.5 ml de

solución de lactosa, al segundo 0.5 ml de solución de glucosa y al tercero 0.5 ml de
solución de sacarosa. Adicione 0.5 ml del reactivo de Benedict a cada tubo y
colóquelos en un baño de agua hirviendo por 3 min. La formación de un precipitado
de color rojo ladrillo indica la presencia de azúcar reductor.

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 4. CONSIDERACIONES EN SEGURIDAD

Revisar la guía de trabajo y la metodología experimental antes de iniciar la sesión.

 Llegar puntualmente al laboratorio. Para aprovechar al máximo el tiempo disponible

para el trabajo en el laboratorio.
 Evitar la manipulación del equipo sin la protección adecuada: guantes para
protección de calor
 Mantener limpia el área de trabajo del equipo.
 Evitar tocar los componentes eléctricos y panel de control teniendo las manos o el
cuerpo mojado.
En cuanto a la seguridad del personal se debe tener en cuenta las siguientes
recomendaciones:

 Usar todo el tiempo una bata de laboratorio manga larga.

 Utilizar zapatos cerrados y medias largas.
 Usar pantalón largo y sin ningún tipo de abertura.
 Identificar las salidas de emergencia y la ubicación de los extintores de incendios.
 Previo al uso y manipulación de los equipos se debe tener conocimiento del manejo
y funcionamiento de estos.

5. RESULTADOS Y ANALISIS DE DATOS

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6. CONCLUSIONES
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7. REFERENCIAS

 CHANG WILLIAMS, Raymond. QUIMICA SEPTIMA EDICION.Colombia; McGraw-Hill

MAYO 2005.

 ORTON ROBERT. BIOQUIMICA. México; Prentice-hall Hispanoamericana, 1995.

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  Reacción de Molish: https://sites.google.com/site/bioquia9/reaccion-de-molish

 Briceño, C.O y Rodríguez de Cáceres Lilia. Química General. Curso universitario De

Pime, 1988.

ANEXOS