Práctica Nº 3

Keyla García Villaman, Mabel García Calcaño y Gliseline Almonte Sánchez.

Laboratorio de Bioquímica, Recinto Luis Napoleón Núñez Molina ISFODOSU
(17/03/2021)

RESUMEN
Caracterizamos los carbohidratos presentes en una solución desconocida sobre la base
de varios ensayos químicos. Nos sometimos a varios procedimientos para detectar la
concentración o presencia de una propiedad química en una sustancia determinada.
Dentro de estas pruebas se encuentran varias que tienen como objetivo identificar o medir
la presencia de alguna sustancia en una solución de carbohidratos. La prueba Molisch,
Fehling, Benedict, Barfoed, Seliwanoff, Bial, Yodo y prueba de Asazone. Cada una de
esas fueron utilizadas para llevar a cabo este procedimiento de medición de sustancias.
Palabras claves: ensayos químicos, carbohidratos, sustancias y detención.

OBJETIVO METODOLOGÍA EXPERIMENTAL

Caracterizar los carbohidratos presentes
en una solución desconocida sobre la
base de varios ensayos químicos.
INTRODUCCIÓN
Los carbohidratos son compuestos de
gran importancia, se encuentran
distribuidos en sustancias de tipo familiar
como la celulosa, los azucares y los
almidones.
Los carbohidratos poseen una estructura
basada en una cadena de carbonos con
los siguientes grupos funcionales:
Alcohol
Aldehído
Cetona
Los carbohidratos son polialcoholes,
aldehídos o polialcoholes cetona o el
resultado de procesos de hidrolisis.
1) Prueba de Molisch:
En un tubo de ensayo, agregamos 2 ml
de la solución de carbohidratos de
prueba y 2 gotas de solución de α-naftol.
Inclinamos con cuidado el tubo y
vertimos gota a gota el H 2 SO 4, usando
un gotero luego observamos el resultado.
2) Prueba de Fehling:
En un tubo de ensayo, agregamos 2 ml
de la solución de carbohidratos de
prueba y agregamos volúmenes iguales
de Fehling A y Fehling B y colocamos en
un baño de agua hirviendo durante unos
minutos. Cuando el contenido del tubo de
ensayo hierva, mezclamos juntos y
observamos un cambio de color del
precipitado.
3) Prueba de Benedicto:
En el tubo de ensayo con 2 ml de
reactivo de Benedict, agregamos de 5 a
6 gotas de la solución de carbohidratos
de prueba y mezclamos bien. Colocamos
el tubo de ensayo en un baño de agua
hirviendo durante 5 minutos
observamos cualquier cambio de color
del precipitado. Pusimos a enfriar la
solución. Observamos el cambio de color
de azul a verde, amarillo, naranja o rojo
dependiendo de la cantidad de azúcar
reductor presente en la muestra de
prueba.
4) Prueba de Barfoed:
A 2 ml de la solución de prueba,
agregamos aproximadamente de 2 a 3
ml de reactivo de Barfoed. Mezclamos
bien y hervimos durante un minuto al
baño María y dejamos reposar unos
minutos. Luego observamos el resultado.
5) Prueba de Seliwanoff:
A 2 ml de reactivo de Seliwanoff,
agregamos dos gotas de solución de
prueba. La mezcla la calentamos hasta
que hierva. Luego observamos un
producto de condensación de color rojo
cereza que indica la presencia de cetosis
en la muestra de prueba.
6) Prueba de Bial:
A 5 mL de reactivo de Bial agregamos de
2 a 3 mL de solución de prueba y
caliente suavemente en un baño de agua
caliente durante 2 minutos. Luego
observamos la formación de un producto
a verde azulado lo cual es indicativa de
pentosas.
7) Prueba de yodo:
Agregamos 2 gotas de solución de yodo
a aproximadamente 2 ml de la solución
de prueba que contiene carbohidratos.
Luego observamos un color negro
azulado que es indicativo de presencia
de polisacáridos.
8) Prueba de Osazone:
A 0,5 g de clorhidrato de fenilhidrazina,
y agregamos 0,1 gramos de acetato de
sodio y diez gotas de ácido acético
glacial luego Agregamos 5 ml de solución
de prueba a esta mezcla y calentamos
en baño de agua hirviendo durante
aproximadamente media hora. Enfriamos
la solución lentamente y examinamos los
cristales con un microscopio.
TABLA DE DATOS EXPERIMENTALES
Sustancia Cantidad
Reactivo de Molisch 2 ml
Solución de yodo 2 gotas
Reactivo de Fehling A 3 ml
Reactivo de Fehling B 3 ml
Reactivo cualitativo de 5-6 ml
Benedict
Reactivo de Barfoed 2-3 ml
Reactivo de Seliwanoff 2 ml
Reactivo de Bial 5 ml
Clorhidrato de 0,5 gramos
fenilhidrazina
Acetato de sodio 0,1 gramos
Acido glacial 10 gotas
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
Luego de haber conocido sobre la
prueba TLC y su procedimiento,
observamos como utilizando un
adsorbente como gel de sílice se pueden
separar los aminoácidos de una mezcla
dada de una manera precisa, rápida y
observable a simple vista.
Antes de eso visualizamos las
precauciones que se deben tomar al
momento de realizar esta o alguna otra
prueba de laboratorio, dentro de estas
están: utilizar bata manga larga, bajo
ninguna circunstancia se debe ingerir
ninguna de esas sustancias, es
importante tener en un lugar de fácil
acceso los utensilios de emergencia CONCLUSIONES Y
(extintores, neutralizadores, ducha de RECOMENDACIONES
seguridad etc.) y lavarse las manos
Cuando hablamos de caracterizar nos
correctamente antes de abandonar el
referimos al proceso de determinar los
laboratorio.
rasgos presentes en una cosa, en este
También, los daños que producen alguna caso, los carbohidratos. Por otra parte,
de estas sustancias o riesgos para la los carbohidratos son
salud, resaltando que el butano es un polihidroxialdehídos y cetonas, los
gas inflamable y su exposición puede aldehídos y las cetonas son los grupos
provocar vómitos, mareos y vertigo, así principales de los carbohidratos. Estos se
como también el ácido acético, de otro dividen principalmente en
lado destacados la ninhidrina que es una monosacáridos, disacáridos y
de las sustancias más peligrosas en el polisacáridos, los monosacáridos que se
experimento, que también puede encuentran comúnmente incluyen
producir los efectos anteriormente glucosa, fructosa, galactosa y ribosa; los
mencionados e irritación en los ojos. dos monosacáridos se combinan para
formar disacáridos que incluyen
Dentro de los materiales que se utilizaron
sacarosa, lactosa, y maltosa. Finalmente,
están: vasos, cámara TLC, placas TLC,
el almidón y la celulosa entran en la
el matraz cónico, botella de spray de
categoría de polisacáridos, que consisten
reactivo y tubos capilares. Ya después
en muchos residuos de monosacáridos.
de conocer todas esas cosas se procedió
Por lo que cada una de estas pruebas
a entrar al laboratorio para realizar la
que llevamos a cabo contenía un reactivo
práctica prevista.
el cual al fusionarlo con la solución de
carbohidratos detectaba la presencia de
una sustancia determinada en ese
TABLA DE RESULTADOS compuesto.
Sustancia Cantidad
Prueba de Molisch Pres. de Car.
Prueba de yodo No contiene REFERENCIA BIBLIOGRÁFICA
polisacáridos Rodríguez, P. & Luna, A. (2015). Práctica
Prueba de Fehling Presencia de 1 de laboratorio (los carbohidratos).
reducción de Obtenido un 15 de marzo del año 2021
azúcar
de https://es.slideshare.net/Pedro-
Prueba de Benedict Presencia de
juli/informe-practica-1-carbohidratos
reducción de
azúcar
Prueba de Barfoed Presencia de
reducción de Laboratorio virtual Amrita. (s.f.). Análisis
azúcar cualitativo de carbohidratos. Obtenido un
Prueba de Seliwanoff Ausencia de 15 de marzo del año 2021 de
cetosa https://vlab.amrita.edu/?
Prueba de Bial Presencia de sub=3&brch=63&sim=631&cnt=1
pentosa