CARACTERÍSTICAS DE JAMES BATCHELLER LAS ENZIMAS Y LA ENERGÍA

FRIEDRICH WILHELM SITIO ACTIVO DE UNA ENZIMA

LAS ENZIMAS SUMNER DE ACTIVACIÓN
KUHNE Las enzimas disminuyen la energía de activación
Moléculas que efectúan reacciones a velocidades SITIO ACTIVO: región o cavidad presente en
necesaria para transformar un reactivo en un
extremadamente rápidas, son catalizadores una molécula de enzima donde es acoplado
biológicos producto. La enzima se une al reactivo y facilita
su transformación en un producto. el sustrato para su transformación.
De naturaleza proteínica.

Estructuralmente complejos.
No se consumen durante la reacción.

Los grupos “R” de los aminoácidos que se

En 1878, propuso por primera vez el vocablo
“ENZIMA” para aplicarlo a las sustancias
catalíticamente activas de las levaduras
llamadas “Fermentos” por Pasteur.
proyectan hacia el sitio activo, establecen enlaces
no covalentes débiles con grupos presentes en el
sustrato formando un complejo enzima-sustrato
Ganador del Premio Nobel en Química 1946 firme.
por su descubrimiento de que las enzimas
pueden ser cristalizadas.

Complejo E-S
Cristales de
Ureasa

TÉRMINOS RELACIONADOS CLASIFICACIÓN DE LAS CLASE 1.OXIDOREDUCTASAS CLASE 2. TRANSFERASAS CLASE 3. HIDROLASAS
CON LAS ENZIMAS ENZIMAS
Enzimas que catalizan la transferencia de un Enzimas que catalizan la ruptura de enlaces
En 1956, la International Union of Biochemistry
grupo completo de átomos desde una químicos con la participación de un molécula
SUSTRATO: sustancia química que es tomada (IUB) creó la Comisión de Enzimas, que se
Enzimas que catalizan reacciones de molécula donadora hasta una molécula de agua. Ejemplo:
por una enzima y es transformada muy dedicó a la clasificación y nomenclatura de
oxidación-reducción. Ejemplo: receptora. Ejemplo:
rápidamente en una o varias sustancias nuevas. enzimas y coenzimas. Su reporte fue publicado
en 1961 y tras su presentación en el V
PRODUCTO: sustancia química nueva que es Congreso de la IUB celebrado en Moscú en ese
generada cuando una enzima actúa sobre una mismo año, la Comisión fue disuelta.
molécula. Considerando el tipo de reacción que catalizan,
la Comisión de Enzimas, clasifico a las enzimas
en 6 Clases que son:
En una reacción enzimática:
Nombre común: Nombre común: Nombre común:
CLASE 1. OXIDOREDUCTASAS
E + S  E-S  E + P CLASE 2. TRANSFERASAS
Malato Deshidrogenasa Transcetolasa Fructosa bisfosfatasa
Nombre sistemático: Nombre sistemático:
CLASE 3. HIDROLASAS Nombre sistemático:
L-Malato: NAD oxidoreductasa D-Psedoheptulosa-7-fosfato : D- D-Fructosa 1,6 bisfosfato 1-
CLASE 4. LIASAS
gliceraldehido-3-fosfato glicoaldehido fosfohidrolasa
ENERGÍA DE ACTIVACIÓN: es la cantidad de CLASE 5. ISOMERASAS transferasa
energía necesaria para llevar un reactivo a su Número sistemático:
Número sistemático: Número sistemático:
estado de transición y proceder a su CLASE 6. LIGASAS E.C. 1.1.1.37
transformación química inmediata. E.C. 2.2.1.1. E.C. 3.1.3.11.
 CLASE 4. LIASAS
Enzimas que catalizan la ruptura de enlaces
químicos sin la participación de una molécula
de agua, debido a que uno de los productos
lleva una doble ligadura. Ejemplo:
CLASE 5. ISOMERASAS CLASE 6. LIGASAS COFACTORES COENZIMAS
Enzimas que catalizan cualquier tipo de Enzimas que catalizan la unión de 2 o más Sustancias de naturaleza orgánica o Sustancias de naturaleza orgánica requeridas
isomerización como racemización, moléculas para formar una molécula de inorgánica que una enzima requiere para por una enzima para desempeñar su
epimerización, isomerización cis-trans, etc. producto. La unión requiere la participación de desempeñar su actividad catalítica. actividad catalítica.
Ejemplo: una molécula de ATP que aporta la energía
requerida para la formación de los enlaces Su ausencia limita la actividad de una Poseen un bajo peso molecular
químicos. Ejemplo: enzima. Son termoestables.
Son insustituibles. Unidos a la enzima mediante enlaces débiles
no covalentes, por lo que son dializables.

Nombre común: Nombre común: Nombre común:

Ribosa-5-fosfato isomerasa Piruvato carboxilasa
Tirosina descarboxilasa

Nombre sistemático: Nombre sistemático: Nombre sistemático:

L-Tirosina descarboxi-liasa D-Ribosa-5-fosfato aldosa-cetosa Piruvato : dióxido de carbono ligasa
(formación de tiramina) isomerasa (formación de ADP)
Número sistemático: Número sistemático:
Número sistemático:
E.C. 4.1.1.25. E.C. 5.3.1.6. E.C. 6.4.2.1.

GRUPOS PROSTÉTICOS
Sustancias de naturaleza orgánica requeridas
por una enzima para desempeñar su
actividad catalítica.
Poseen un bajo peso molecular
Son termoestables.
Unidos a la enzima mediante enlaces
covalentes, por lo que NO son dializables.
ACTIVADORES METÁLICOS
Sustancias de naturaleza inorgánica
requeridas por una enzima para
desempeñar su actividad catalítica.
Son iones metálicos, termoestables.
Unidos a la enzima mediante enlaces
iónicos, por lo que son dializables.
ISOENZIMAS o ISOZIMAS
Son aquellas enzimas oligoméricas que poseen
el mismo número de subunidades y catalizan la
misma reacción química, pero cuyas
subunidades constituyentes son
estructuralmente diferentes.
Cada isoenzima aparece en un tejido diferente,
pues está adaptada a funcionar bajo las
condiciones que prevalecen en ese tejido.
ISOENZIMAS o ISOZIMAS
Se conocen 5 Isoenzimas de la LDH, cada una
aparece en un tejido diferente, pues está
totalmente adaptada a funcionar bajo las
condiciones que prevalecen en ese tejido
específico.
EFECTO DEL pH SOBRE LA
ACTIVIDAD DE UNA ENZIMA
La mayoría de las enzimas poseen un pH
específico en el cual desarrollan su máxima
velocidad de catálisis. A ese valor se le
denomina pH óptimo. Bajo esas condiciones la
enzima presenta una cantidad especifica de
grupos cargados en el sitio activo. Si el pH se
acidifica, los grupos cargados negativamente
se protonan ocasionando una pérdida en la
actividad catalítica. Si el pH se alcaliniza, los
grupos protonados pierden sus protones
rompiéndose enlaces que desestabilizan la
estructura de la enzima afectando su actividad
catalítica.
 EFCTO DE LA TEMPERATURA
SOBRE LA ACTIVIDAD DE
UNA ENZIMA
La mayoría de las enzimas poseen un valor
específico de temperatura en el cual
desarrollan su máxima velocidad de catálisis. A
ese valor se le denomina Temperatura óptima.
Temperaturas superiores a ese valor
ocasionan la desnaturalización de las enzimas
manifestando una reducción dramática en la
actividad catalítica. Temperaturas por debajo
de ese valor reducen gradualmente la energía
cinética de las moléculas y por ende,
reduciendo notablemente la velocidad de la
reacción.
ECUACIÓN DE
MICHAELIS-MENTEN
MIchaelis y Menten dedujeron una ecuación
que permite calcular la velocidad de una
reacción enzimática (Vo) a cualquier
concentración de sustrato.
Sin embargo, debemos considerar que los
valores de Vmax y Km obtenidos a partir de
una hipérbola presentan un cierto grado de
incertidumbre que conducen a posible calcular con exactitud la Velocidad de
determinaciones inexactas de la Velocidad de
una reacción (Vo).
EFECTO DE LA
CONCENTRACIÓN DE ENZIMA
SOBRE LA ACTIVIDAD DE UNA
ENZIMA
Si todas las condiciones se mantienen
constantes, a medida que se incrementa la
concentración de enzima, la velocidad de la
reacción se incrementa de una manera
directamente proporcional.
ECUACIÓN DE LINEWEAVER-BURK
Hans Lineweaver y Dean Burk sometieron a la
Ecuación de Michaelis-Menten a un
reordenamiento algebraico, convirtiéndola en
la ecuación de una línea recta a partir de la
cual es posible determinar con precisión Vmax
y Km.
EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN
DE SUSTRATO SOBRE LA
ACTIVIDAD DE UNA ENZIMA
Los datos obtenidos generan una hipérbola. A
bajas concentraciones de sustrato, a medida
que se incrementa la concentración de
sustrato, la velocidad de la reacción se
incrementa de manera directamente
proporcional, hasta que con cierta
concentración de sustrato se alcanza la
Velocidad máxima (Vmax), si la concentración
de sustrato se aumenta, a Vmax ya no se
modifica.
REPRESENTACIÓN GRÁFICA DE
LA ECUACIÓN DE LINEWEAVER-
BURK
La representación gráfica de esta ecuación
será:
Con los valores precisos de Vmax y Km, es
una reacción enzimática.
CINÉTICA ENZIMÁTICA MECANISMO DE ACCIÓN
DE UNA ENZIMA
Parte de la bioquímica que estudia la velocidad
de las reacciones catalizadas por enzimas
En 1913, Leonor Michaelis y Maud Menten
(Vo).
desarrollaron un modelo para explicar la
cinética de las reacciones catalizadas por
enzima.
El análisis gráfico revela que:
La Velocidad máxima (Vmax), es la mayor
cantidad de sustrato que una enzima convierte
en producto por unidad de tiempo.
La Km, es la cantidad de sustrato con la cual
una enzima trabaja a la mitad de la Velocidad
máxima.
INHIBICIÓN CINÉTICA DE LA INHIBICIÓN
COMPETITIVA COMPETITIVA
El inhibidor posee una estructura análoga a del
Sustrato natural, por lo que compite con él por
ocupar el sitio activo de la enzima. Cuando éste
se introduce en el sitio activo, ocasiona la
inhibición de la actividad de la enzima.
El inhibidor y el sustrato son mutuamente
excluyentes.
El inhibidor sólo se une a las enzimas libres.
La unión E-l es reversible, por lo que, la
formación del complejo E-I puede ser revertida
aumentando la concentración de sustrato.
 INHIBICIÓN ACOMPETITIVA
El inhibidor sólo puede unirse al complejo Enzima-
Sustrato (E-S) y no a las enzimas libres.
Cuando se forma el complejo E-S, se genera una
cavidad en la Enzima donde se incorpora el Inhibidor,
formándose un trio de moléculas. (E-S-I).
El acoplamiento del Inhibidor, impide que la enzima
sufra el cambio conformacional necesario para
transformar el sustrato, por lo tanto, ocasiona la
inhibición de la actividad de la enzima.
CINÉTICA DE LA INHIBICIÓN INHIBICIÓN
ACOMPETITIVA NO COMPETITIVA
Cuando el Sustrato se introduce en el Sitio
activo tampoco ocasiona ninguna modificación
en la cavidad especial donde se asocia el
Inhibidor, por lo que el Inhibidor puede
acoplarse ahí. Sin embargo, su presencia evita
que la enzima sufra el cambio conformacional
necesario para transformar el sustrato,
ocasionando la inhibición de la actividad de la
enzima.
CINÉTICA DE LA INHIBICIÓN INHIBICIÓN NO
NO COMPETITIVA COMPETITIVA
El inhibidor puede unirse a la enzima libre o al
Complejo Enzima-Sustrato (E-S).
Cuando el Inhibidor se acomoda en una cavidad
especial que tiene la Enzima, no ocasiona ninguna
modificación en el Sitio activo, por lo que el Sustrato
puede acoplarse ahí. Sin embargo, su presencia evita
que la enzima sufra el cambio conformacional
necesario para transformar el sustrato, ocasionando la
inhibición de la actividad de la enzima.

El inhibidor y el sustrato se acomodan en sitios

diferentes de la enzima
La unión E-l es reversible, por lo que, la La unión E-l es reversible, por lo que, la
formación del complejo E-I puede ser revertida formación del complejo E-I puede ser revertida La unión E-l es reversible, por lo que, la formación del
aumentando la concentración de sustrato. aumentando la concentración de sustrato. complejo E-I puede ser revertida aumentando la
. concentración de sustrato.

ENZIMAS ALOSTÉRICAS CINÉTICA DE UNA REACCIÓN ACTIVACIÓN INHIBICIÓN COOPERATIVIDAD EN LAS

CATALIZADA POR ENZIMA
Son un grupo de enzimas que además de su
sitio activo poseen otra cavidad llamada sitio
alostérico, en el cual se acopla un ligando
(Efector o Modulador), el cual provoca un
efecto sobre la actividad de la enzima,
regulando su accionar.
ALOSTÉRICA
ALOSTÉRICA
Cuando el activador (Efector positivo) se une al
sitio alostérico de la enzima, induce un cambio
conformacional que ABRE el sitio activo
haciéndolo accesible al sustrato natural y la
enzima desarrolla su actividad catalítica.
ALOSTÉRICA
Cuando el Inhibidor (Efector negativo) se
asocia al sitio alostérico de la enzima,
promueve un cambio conformacional que
modifica el sitio activo haciéndolo inaccesible
al sustrato natural de la enzima, tornándola
inactiva.
ENZIMAS ALOSTÉRICAS
Dado que las Enzimas alostéricas son
oligoméricas, la unión del efector a una de
las subunidades induce cambios
conformacionales que se trasmiten a la
subunidades vecinas generando una
respuesta rápida, sin que, el efector tenga
que unirse a todas las subunidades. Este
fenómeno se llama Cooperatividad.

Las enzimas alostéricas desarrollan una

cinética sigmoidal. En ausencia de efector, a
bajas concentraciones de sustrato, exhiben
velocidades muy reducidas pero, a partir de
una determinada concentración de sustrato la
velocidad se incrementa conforme aumenta la
concentración hasta que alcanza su Velocidad
máxima (Vmax), la cual ya no se modifica si se
incrementa la concentración de sustrato.
Cuando el activador (Efector positivo) se separa
del sitio alostérico de la enzima, ocasiona un
cambio conformacional que DESAPARECE el
sitio activo haciéndolo inaccesible al sustrato
natural. En consecuencia, la enzima ya no es
capaz de asociar al sustrato y anula su actividad
catalítica.
Cuando el Efector negativo se desprende del
sitio alostérico de la enzima, promueve un
cambio conformacional en la molécula que
ABRE el sitio activo permitiendo la unión del
sustrato reasumiendo la enzima su actividad
catalítica.