UNIVERSIDAD

CENTRAL DEL
PARAGUAY
BIENVENIDOS a la
Cátedra de Histología

Dra. Sahide Quevedo

 REGLAS PARA EL SALON DE AULA
VIRTUAL

1. Apaga tu cámara y tu micrófono.

2. Atiende la explicación y toma notas.

3. Aclarar dudas altavoz

4. Al terminar la clase, realiza las tareas que se

proponen.

5. Al finalizar, tendrás la clase grabada.

 Primer Semestre
Unidad 1

TEMA: Introducción a la Histología – Técnicas

Libro Ross
7ma edición
 Objetivo de la Histología
• Conducir al estudiante a comprender la microanatomía de las células,
tejidos y órganos

• Correlacionar la estructura con la función.

Competencia de la histología
• El estudiante identifica con certeza los diferentes tejidos del cuerpo
humano, comprende claramente su función.
La importancia de conocer la Histología es que te permite asomarte a
un mundo microscópico, en el cual podrás estudiar las características
propias de cada órgano. El saber la estructura y función de cada órgano
en forma normal, te permitirá más adelante entender la Patología y otras
disciplinas.
• La célula es la unidad básica, estructural y funcional de los seres
vivos.

• Los tejidos son conjuntos de células similares que cumplen con una
función específica.

1.CÉLU
5.ORGANISMO LAS

4.SIST 2.TEJ
EMAS IDOS
3.ÓRG
ANOS
 ¿Que es la Histología?
• La palabra histología proviene del griego histos que significa
‘tejido’. Incluye el sufijo logia, que significa ‘estudio o ciencia’.

• También llamada de anatomia microscópica; es el estúdio de

estructuras microscópicas de los tejidos y órganos del cuerpo.

• Por lo tanto, la histología estudia las estructuras mínimas que

conforman los organismos de los seres vivos.
• Para su estudio es necesario el aparato microscópio, ya que
las piezas que se estudian tienen estructuras que no pueden
ser vistas a ojo desnudo.

• Y para conseguir visualizar las piezas se emplea una serie de

técnicas que preparan a los componentes del tejido.
Técnicas Histológicas
1. Fijación
2. Deshidratación
3. Aclaramiento
4. Inclusión
5. Corte
6. Tinción
7. Montaje
1- Fijación
• Su propósito es mantener la morfología del tejido lo más parecida posible a lo que ésta
tenía antes de hacer la extracción.

• Prevenir la degradación enzimática.

• Destruir microorganismos patógenos

• Ejemplos de fijadores:
- Formalina (uso mas comun): solucion acuosa de formaldehido al 37%
FIJACIÓN:
Mantener la morfología
parecida a la estructura viva

Químico Físico

Formaldehido Glutaraldehído Congelación

Calor
2- Deshidratación
• Se elimina completamente el agua para que se pueda embeber
adecuadamente el tejido en aquellos medios de inclusión que
no sean hidrosolubles. (Alcohol etilíco en concentraciones
crecientes hasta alcanzar el 100%)
3- Aclaramiento
• Se llama aclaramiento ya que el tejido se torna transparente o
claro.
• Se utilizan solvents organicos: xileno o tolueno
4- Inclusión
• Proceso que tiene por objeto “rellenar o infiltrar” completamente
la muestra histológica.
• Método: inclusión en parafina fundida.
5- Corte
• El tejido fijado en parafina se corta en secciones delgadas que permiten el paso de
la luz. La mayoría de los preparados para microscopía óptica tienen un espesos de
alrededor 5-10µm, para lo que se requiere un micrótomo, instrumento similar a
una cortadora de fetas.
 Cortes
Histológicos
• Los cortes obtenidos se montan sobre un portaobjetos de vidrio
utilizando pineno o resinas de acrílico como adhesivo.
6- Tinción
Para colorear y teñir los cortes histológicos, la parafina debe disolverse y extraerse, con xileno o tolueno y los
tejidos deben rehidratarse mediante el uso de una serie de soluciones de alcohol de concentración decreciente.

Se tiñe con HEMATOXILINA en agua, debido a que el colorante de contraste LA EOSINA, es mas soluble en
alcohol

Se vuelve a deshidratar la muestra a través de una serie de soluciones alcohólicas de concentración creciente y
después se tiñe con la EOSINA
6- Tinción
• Los métodos de tinción histológicos se desarrollaron en función de su
capacidad para teñir selectivamente los distintos componentes tisulares.

• El método de tinción mas utilizado es la combinacion de HEMATOXILINA

Y EOSINA
7- Montaje
• Se monta y se pone en el porta objeto, se agregan unas gotas de bálsamo de
canadá y se pone el cubre objetos
Histoquímica y citoquímica
• Los procedimentos histoquímicos y citoquímicos se basan en la unión especifica de un
colorante con un componente celular particular que exhibe actividad enzimática inherente de
um elemento constitutivo de la célula.

Fundamentos químicos de la tinción:

Se basa en colorantes básicos y ácidos.
• Um colorante ácido como la eosina tiene uma carga neta negativa en su parte coloreada.
• Um colorante básico tiene una carga neta positiva en su parte coloreada.

• ACIDOFILIA: afinidad por lo ácido.

• BASOFILIA: afinidad por lo básico.
 APRENDIENDOO..
La eosina es un colorante ácido
(rosa) y tiene una carga neta
negativa. Reacciona con grupos
amino-proteínas y catiónicos
cargados positivamente en células y
tejidos. (citoplasma celular y
componentes extracelulares: fibras)
Color Colorante Qué tiñe? Entonces las estructuras teñidas
Rosado Eosina BASE (colorante acido) quedan acidófilas o eosinófilas.
(sustancia
acidófila)Citoplasma
Violeta Hematoxilin ÁCIDO (colorante La hematoxilina actúa como
a basico)basidofila.Nucleo. un colorante básico (azul) y
tiene una carga neta positiva
reacciona con grupos fosfato
ionizados cargados
negativamente de los ácidos
nucleicos y entonces décimos
que las estructuras quedan
basófilas.
Hematoxilina Eosina

Básico Ácido

Núcleo (ácido) Citoplasma (básico)

Basófilo Acidófilo
Basófilo Ácido

Básico Acidófilo
núcleo

citoplasma

Núcleo(-): HEMATOXILIN
Citoplasma(+): EOSINA
 Hematoxilina
Eosina

H-E
 Son colorantes más utilizados en la práctica
histológica.
Se utilizan principalmente para poner em
evidencia
EN SINTESIS.... las características estructurales.
No permiten ver de forma adecuada ciertos
componentes estructurales de los cortes
histológicos tales como, elastina, fibras reticulares,
membranas basales y lípidos.
No son específicos para dilucidar componentes
químicos de las células.
Muchos de los componentes de los tejidos se
pierden durante la preparación de rutina de los
cortes teñidos con H&E.
La hematoxilina se usa como un mordiente, es
decir cumple función de algo que estrictamente no
es.
Cuando la H&E no exhibe los componentes celulares o adyacentes se dice
que es por la presencia de polianiones en el tejido, asi que se incrementa
una reacción llamada Metacromasia

Se utiliza colorante
básico concentrado.

Azul de toluidina

Se tiñe de rojo o
púrpura cuando
se impregna.
Para estructuras ácidas también tenemos reactivos como el:

ÁCIDO PERYÓDICO REACTIVO DE SHIFF-PASS

Tiñe los hidratos de carbono y macromoléculas con
abundancia de ellos.
Ej: glucógeno en células, moco en diversas células y tejidos, la
membrana basal subyacente, epitélios y fibras reticulares en el
tejido conjuntivo.
Este reactivo también se usa en la reacción de FEULGEN
La misma se basa en la separación de purinas de la
desoxirribosa mediante una hidrólisis ácida débil.
Ej: tiñe ADN celular
Otras citoquímicas que también pueden
utilizarse con el fín de exhibir otros
componentes y diferenciarlos del color
rutinario, son ellas: