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FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

BIOLOGÍA CELULAR Y MOLECULAR - PRÁCTICA


“OBSERVACIÓN DE CÉLULAS: EUCARIOTES”

INTEGRANTES

2019205038 AYALA PALACIOS VÍCTOR MANUEL

2020154556 CHINGO TORRES PERCY ALEJALDER

2020228482 CUEVA RAMOS MARÍA ALEJANDRA

2020235252 CUSTODIO CHUQUILIN YOHANA ELIZABETH

2020228492 GARCÍA MEJÍA KATHERINE CESIA

2020235368 GASTULO BALDERA ANGÉLICA JOSEFA CORAL

2020235465 HUANCAS TORRES HERLY ANGHELYN

2020235497 LAMA ESPINOZA JOSE ALEXANDER

2020235514 LIZA LIZA MARIA FERNANDA

2020235634 MIO HERNÁNDEZ MIRTHA MARIANELLA

2020235252 POMARES JACINTO ROSA DORA MACIEL

2020123681 SALAZAR DÍAZ FIORELLA DEL MILAGRO

2020154915 SAMAMÉ SÁNCHEZ VICTORIA LISBANIA

2020229077 TINTINAPON LLONTOP BERTHY SOLEDAD

2018161362 VILLALOBOS CORONADO MÓNICA YULISSA

DOCENTE

LOAYZA ESTRADA CAROLINA SUSANA

CHICLAYO - 2021
OBJETIVOS

1. Observar y caracterizar células eucariotas de tipo vegetal (epidermis de


cebolla)
2. Observar y caracterizar células eucariotas de tipo animal (epitelio bucal, tejido
adiposo y sangre)

RESULTADOS

Dibuje las distintas muestras observadas en la práctica:

MUESTRA: Hojas internas del bulbo MUESTRA: Agua estancada


de la cebolla COLORACIÓN: ---
COLORACIÓN: Safranina Aumento: 400x
Aumento: 400x
MUESTRA: Levadura de pan MUESTRA: Epitelio bucal

COLORACIÓN: --- COLORACIÓN: Azul de metileno

Aumento: 100x Aumento: 400x

MUESTRA: Tocino MUESTRA: Sangre


COLORACIÓN: Sudan III COLORACIÓN: Wright
Aumento: 400x Aumento: 1000x
CUESTIONARIO

1. ¿Por qué los Eritrocitos se tiñen con Eosina y los Leucocitos con
Hematoxilina?

Eosina es un colorante ácido de color rosado oscuro en el cual


predomina densidad de cargas negativas y es usado en
preparaciones histológicas cuya propiedad está basado en su
polaridad negativa lo que le permite enlazarse con
constituyentes celulares de carga positiva. Por ello colorea
componentes y orgánulos citoplasmáticos y matriz extracelular,
más no los nucleares, por estar el ADN cargado
negativamente. Aquellos componentes que se tiñen con eosina
son conocidos como aliadófilos o eosinófilos.

La coloración resultante de la tinción con eosina es


rosada-anaranjada para citoplasmas, pero colorea de
rojo intenso a los eritrocitos debido a que en su mayoría
son anucleados, estas características son fácilmente
distinguibles al microscopio óptico, bajo el cual se
observa también un citoplasma acidófilo, se caracteriza
por ser muy electrodenso, debido al acumulo de
hemoglobina y ribosomas en el citosol.

Hematoxilina es un colorante básico de color azul purpura, en


el cual predomina densidad de cargas positivas es decir
catiónicas y es usado en preparaciones histológicas cuya
propiedad básica hace que se tiña estructuras ácidas o
basófilas como son los núcleos celulares (1).
Los leucocitos, también denominados
glóbulos blancos, son células presentes en
la sangre en concentraciones muy
inferiores a las de los eritrocitos, que se
clasifican en cinco tipos los cuales son
neutrófilos, eosinófilos o acidófilos,
basófilos, linfocitos y monocitos. Los tres
primeros forman los denominados
leucocitos granulares o granulocitos, ya que presentan gránulos citoplasmáticos
específicos visibles a microscopía óptica, cuyas características tintoriales definen el
tipo al que pertenecen. Los linfocitos y monocitos forman los leucocitos agranulares
o agranulocitos, debido a que no presentan gránulos citoplasmáticos visibles al
microscopio óptico; debido a su núcleo que es acido se tiñen de color azul púrpura
(1).

2. ¿Para qué sirve el FORMOL en la coloración de adipocitos?

Formol o formalina. Está considerado


como la sustancia fijadora de mayor uso en
los laboratorios que realizan técnica
histológica. El formol comercial consiste en
una solución acuosa del gas formaldehido
al 39 - 40%. Se presenta como un líquido
claro, incoloro, que emite vapores
sumamente irritantes para las conjuntivas y
la mucosa respiratoria. Su acción fijadora
se ejerce coagulando las proteínas. Es un fijador que posee un buen poder de
penetración y difusión. Mantiene de manera adecuada la estructura y facilita la
coloración posterior de los componentes celulares y tisulares. Endurece bien las
muestras. Conserva bastante bien a las grasas (2).

Se sabe que los adipocitos acumulan las grasas en su citoplasma en forma de


gotas más o menos grandes, quiere decir que no están rodeados por membrana con
estructura equivalente a la membrana celular. El uso del formol en la coloración de
adipocitos va a ayudar a fijar la muestra, deshidratarla y evitar que se rompa la
muestra que se está analizando

VENTAJAS:

● Es un buen fijador único que determina una moderado conversación de la


estructura tisular.
● Por ser buen desinfectante y no endurecer excesivamente los tejidos, es un
medio óptimo para conversar y almacenar biopsias y piezas quirúrgicas.
● Provoca escasa retracción tisular
● Posee una velocidad de penetración intermedia entre la de los alcoholes y la
del sublimado
● Tiene aproximadamente una velocidad de un milímetro por hora apenas
altera la coloración tisular, por eso es el agente de elección para fijar grandes
piezas quirúrgicas.
● Es excelente fijador para el tejido adiposo y para lípidos en general y se
emplea como agente de elección para fijar el tejido nervioso (3).

3. ¿Cuál es el proceso de fijación para la observación de las células de la


sangre?

La preparación, fijación y tinción de alta


calidad de un frotis de sangre constituye una
experiencia fundamental que permite
identificar y detallar las células de este tejido
de manera directa. Esta técnica es de gran
importancia para cualquier laboratorio de
diagnóstico ya que se utilizan para evaluar
los glóbulos rojos (eritrocitos), glóbulos
blancos (leucocitos) y plaquetas
(trombocitos) y, además, estos son de gran
ayuda para detectar parásitos en la sangre
tales como Babesia, Anaplasma y Trypanosoma. A continuación, se procederá a
detallar el proceso de fijación (4).

En primer lugar, se coloca una pequeña gota de sangre en un extremo del


portaobjeto. Cabe resaltar que esta puede ser obtenida por punción directa en el
pulpejo del dedo o por previa recolección en un tubo con anticoagulante. Hay que
tener en cuenta que debe cuidarse el tamaño de la gota que se colocará, porque si
es demasiado grande se crea un extendido muy largo y grueso. Por el contrario, si
la gota es muy pequeña, el extendido será corto.

Luego de colocada la gota, se toma el portaobjeto extensor de manera lateral con su


mano dominante, a un ángulo de 45 º aproximadamente y se deja que la gota se
extienda a lo largo del borde del portaobjeto extensor.

Una vez que la gota haya bañado todo el borde lateral, es decir, todo lo ancho del
extensor, se procede a deslizarlo con firmeza, rapidez y suavidad sobre toda la
superficie del portaobjeto, a modo de obtener una película fina de sangre. Lo que
sigue, es esperar a que se seque la lámina. Una vez que el frotis se haya secado se
procede a realizar a la fijación del mismo y para eso debemos tener en cuenta dos
cosas: si se emplean colorantes hematologicos habituales, la fijación se produce
durante la aplicación del colorante concentrado, ya que estos colorantes llevan
alcohol metílico absoluto como disolvente. Cuando se prefiere trabajar con un
colorante acuoso diluido, los frotis secados al aire deben ser fijados con alcohol
metílico absoluto. Para realizar esta fijación lo primero que se realiza es sumergir la
lámina portaobjeto que contiene al frotis sanguíneo a un recipiente que contenga
alcohol metílico absoluto y lo dejamos actuar tres minutos aproximadamente para
luego retirar y proceder con la tinción. Mediante este proceso se preservan y se fijan
en una posición los microorganismos de la forma más parecida posible a la de las
células vivas; esta fijación química tiene como objetivo proteger las subestructuras
celulares finas y la morfología de los microorganismos más grandes. Los fijadores
químicos penetran en la célula y reaccionan con los componentes celulares
uniéndose a proteínas y lípidos para inactivarlos, insolubilizarlos e inmovilizarlos.
Realizar este procedimiento es necesario para la posterior tinción de la muestra.
Existen varios tipos de colorantes los cuales pueden ser ácidos que se unen a
componentes básicos de la célula como el citoplasma o básicos que atraen
principalmente a los componentes ácidos como el núcleo. A continuación, se
detallará los procedimientos que se realizan para la coloración tanto en Wright como
hematoxilina – eosina (5).

Tinción Wright

Coloree con unas gotas de colorante Wright, luego agregar el


mismo número de gotas de agua destilada y mezclar
rápidamente, soplando hasta formar una capa plateada.

Reposar la mezcla por 8 - 10 min., observando la intensidad de


color.

Lave con agua corriente y dejar secar al medio ambiente, en forma vertical.

Observe al microscopio. Utilice el objetivo de 100X.

Tinción con Hematoxilina – eosina

1. Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tinción y añadir


unas gotas de alcohol absoluto dejando secar hasta que este
se evapore.

2. Cubrir con unas gotas de hematoxilina y dejar actuar durante


15 min. Evitar la desecación del colorante agregando más líquido.

3. Lavar la preparación y añadir unas gotas de eosina dejándola actuar 1 minuto.

4. Volver a lavar hasta que no queden restos de colorante.

5. Dejar secar el portaobjeto ya sea al aire o aplicando calor y observar al microscopio


usando el objetivo de 100x

Cabe resaltar que un frotis sanguíneo siempre


tiene tres partes la cabeza que es donde se colocó
la gota de sangre y donde se encuentra la mayor
concentración de eritrocitos; el cuerpo, esta es la
parte donde no hay gran concentración de eritrocitos, es por ello que se usa para la
observación en el microscopio y por último la cola y la zona terminal que vienen
hacer la parte final de la extensión por lo que no viene hacer ideal para la
observación a través del microscopio ya que los leucocitos son grandes, los
eritrocitos están deformados y encontramos abundantes plaquetas (6).

4. ¿Qué diferencias hay entre las células animales y vegetales?

La célula animal se caracteriza por la presencia de núcleo, membrana plasmática y


citoplasma. Se diferencia de la célula vegetal por la ausencia de pared celular y
cloroplastos. Además se pueden encontrar vacuolas más pequeñas y más
abundantes en comparación con las de una célula vegetal, ya que estas contienen
una gran vacuola única que se usa para el almacenamiento y para mantener la
forma de la célula (7).

● Cuando colocamos células animales y vegetales en un microscopio podemos


apreciar sus diferencias, estas son (7):

CÉLULA ANIMAL CÉLULA VEGETAL

Pared celular Ausente Presente: porque es de


soporte y protección, a la
vez que permite la
comunicación celular.

Nutrición Heterótrofa: quiere decir Autótrofa: quiere decir


que necesitan obtener que son independientes
nutrientes y energía del de otros seres vivos para
material orgánico de otros obtener sus nutrientes.
seres vivos.

Vacuolas Pequeñas: poseen una o Una gran vacuola


más, ya que funcionan de central: Su función es
almacenamiento de agua, almacenar agua y
iones y desechos mantener la turgencia de
intracelulares. la célula.
Centriolos Presentes: ya que son Ausente
estructuras cilíndricas
involucradas en la división
celular animal

Cloroplastos Ausentes Presentes: son los


orgánulos celulares que
en los organismos
eucariotas foto
sintetizadores se van
ocupando de la
fotosíntesis.

Membrana plasmática Presente. Contiene Presente. No contiene


colesterol. colesterol.

Almacenamiento Glucógeno Almidón.


energético

Plasmodesmata Ausente Presente: son poros de la


pared celular que
permiten el paso de
moléculas entre las
células vegetales.

Glioxisomas Ausente Presente: En estas


estructuras se almacenan
y degradan los lípidos,
principalmente en las
semillas en proceso de
germinación.

5. ¿Qué diferencias existen entre los glóbulos rojos y glóbulos blancos?

Los glóbulos rojos o eritrocitos son las células sanguíneas más abundantes (5
millones mm3 en promedio). Los glóbulos blancos o leucocitos, son menos
numerosos a comparación de los eritrocitos (5000 a 10000 mm3 en promedio). La
cantidad de eritrocitos y leucocitos es importante para la lectura de un hemograma
porque por medio de estos se pueden determinar afecciones como una anemia o
una infección respectivamente (8).

Cuando observamos las células sanguíneas en un microscopio, glóbulos rojos y


blancos, podemos apreciar diferencias claramente notables. Estas son:

Glóbulos rojos Glóbulos blancos

● Presentan un color rojo debido a ● Presentan un color morado debido


la tinción con “eosina” a la tinción con hematoxilina.
● Cuando son observados de perfil ● Presentan núcleo de color morado.
presentan una forma bicóncava
Existen leucocitos granulosos y
(tiene una curva hundida en el
agranulocitos (10).
centro); y vistos de frente es
discoidal (forma de disco). I. Granulocitos: son granulados
● Carecen de núcleo (9). por la presencia de lisosomas

● Neutrófilos:
presentan núcleo
segmentado
lobulado. Cuando
son jóvenes presenta
núcleo no
segmentado llamado abastonado.

● Eosinófilo: Presentan
núcleo bilobulado de
color azul marino y
gránulos voluminosos
de color rojizo y el
núcleo teñido de azul
marino.
● Basófilo: presentan un
núcleo segmentado
teñido de rojo y el
citoplasma presenta
gránulos teñidos de
azul oscuro que cubren el núcleo.

II. Agranulocitos: estos carecen


de granulaciones específicas.

● Monocitos: son
leucocitos de mayor
tamaño, presentan un
núcleo en forma de riñón
teñido de color violeta.

● Linfocitos: presentan
núcleo redondo y un
citoplasma basófilo (que
se tiñe fácilmente con
colores básicos).

6. ¿Cuántos son los tipos de glóbulos blancos y sus funciones en el


organismo?
Los glóbulos blancos, también llamados leucocitos son una parte muy importante de
nuestro sistema inmunológico. Se definen como las células sanguíneas encargadas
de defender el organismo de infecciones y otros cuerpos extraños. Asimismo, son
producidos y almacenados en la médula ósea. Además, su cifra normal está entre
5000 a 10 000 por milímetro cúbico (11).
Existen cinco tipos:
● Neutrófilos: Los más numerosos y también llamados granulocitos.
Constituyen cerca del 60 y 70% de leucocitos y son los primeros en acudir a
una infección.(12)
Su función es localizar y neutralizar las bacterias o células que hayan sido
dañadas, por lo que se mantienen en la sangre unos días para así romper y
liberar sustancias para aumentar la circulación de sangre en la zona y atraer
más de ellos mismos. Cabe recalcar que existe el factor estimulante de
crecimiento granulocítico (G-CSF), el cual aumenta la producción de
granulocitos y su actividad contra las infecciones.

● Linfocitos: Son cerca del 30% del total de los glóbulos blancos. Se dirigen
de la médula ósea hacia los ganglios linfáticos, bazo, amígdalas, timo y en
realidad a cualquier parte del cuerpo. A diferencia de los granulocitos, los
linfocitos viven mucho tiempo, así como también maduran y se multiplican
ante estímulos determinados. No sólo luchan contra infecciones sino que son
células especializadas en el sistema inmunitario.

● Monocitos: Forman parte del 5% - 12% de los leucocitos. Su función no solo


consta en defender el organismo y destruir células infectadas o dañadas, sino
que también ejercen distintas funciones como macrófagos (células que
engullen y procesan todos los desechos de células moribundas) o se
convierten en células especializadas, como los osteoclastos, que remodelan
el tejido óseo envejecido. (12)

● Eosinófilos: Su porcentaje normal en sangre es de 2%. Responden a


reacciones alérgicas. Inactivan sustancias extrañas en el cuerpo y poseen
gránulos tóxicos que matan a las células invasoras y limpian el área de
inflamación.

● Basófilos: Representan menos del 2% y al igual que los eosinófilos


intervienen en las reacciones alérgicas. Para esto liberan histamina, una
sustancia que aumenta la circulación sanguínea en la zona para favorecer la
aparición de otro tipo de glóbulos blancos y, facilitan que éstos salgan de los
vasos sanguíneos y avancen hacia la parte que se encuentra dañada.
También liberan heparina, una sustancia que disuelve los coágulos. (12)

7. ¿Existen diferencias entre forma y tamaño de las células observadas?

Hojas internas del bulbo de la Agua estancada:


cebolla: Tamaño : suelen ser de 10-50 μm
Tamaño : 5-100 μm Forma : forma alargada y ovalada
Forma : su forma es ovalada

Levadura de pan: Epitelio bucal:


Tamaño : miden entre 3 y 30 micras Tamaño : 6-8 a 10-20 micras
Forma : Las células de las levaduras Forma : forma ameboide
son redondas u ovales
Tocino: Sangre:
Tamaño : 5 - 100 micras Tamaño : 2–3 µm
Forma : poliédricas Forma : En el caso de los glóbulos rojos
tienen forma de disco aplanado con una
ligera depresión en el centro, mientras
que los glóbulos blancos poseen forma
ovalada con núcleo

8. Investiga si el tamaño de las células está en relación al tamaño de los


seres vivos al que pertenece.

Esto es totalmente falso ya que no importa si un ser vivo es más grande que el otro
los dos tendrán el mismo tamaño de célula lo único que cambia es la cantidad de
células que se asocian para formar sus tejidos y órganos más no el tamaño de
estas. Las células solo varían de tamaño de acuerdo al tipo de célula que
pertenezcan cada una ya sean eucariotas y procariotas.

Ejemplo: entre una ballena, una persona y una hormiga cuál de estas tiene células
más grandes
La respuesta sería ninguna ya que todos tienen el mismo tamaño de células que es
la célula eucariota y solo varía en la cantidad por el tamaño de cada uno de estos.

CONCLUSIONES

● Las células de tejido animal y vegetal tienen formas muy variables y están
constituidos por un núcleo y gran variedad de organelos, sin embargo en el
microscopio el más diferenciado fue el núcleo.

● Las células animales son más complejas que las vegetales, una diferencia
que los caracteriza es la pared celular vegetal. Al observar al microscopio las
células de la cebolla se pudo identificar que son mononucleadas y están
ubicadas en forma de celdas.

● Al observar la sangre al microscopio se identificaron diferentes tipos de


células sanguíneas como leucocitos (neutrófilos, basófilos, linfocitos,
eosinófilos y monocitos) y eritrocitos. Además los leucocitos presentaron
coloración violeta, en menor proporción y los eritrocitos un color rojo pálido,
en mayor proporción.
● Las células del epitelio bucal presentan estructuras como el núcleo y
granulaciones. Al ser teñidas con azul de metileno estas toman coloración
celeste y se facilita la distinción de sus núcleos y formas que tienen

● El empleo de colorantes en la observación de células representa una gran


ventaja ya que permite identificar con mayor facilidad las estructuras básicas
de la misma, siempre y cuando se empleen de la forma correcta, de lo
contrario se convierte en problema porque si el colorante es muy concentrado
no deja diferenciar nada en la célula.
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

1. Geneser R. Histología. 4a ed. España: McGraw-Hill; 2007.

2. Tècnicas Histológicas [Internet].[citado 5 abril 2021]. Disponible en:


http://michellesanchez-th.blogspot.com/2016/02/formol.html#:~:text=Tiene
%20aproximadamente%20una%20velocidad%20de,para%20fijar%20el
%20tejido%20nervioso.
3. Técnica Histológica. Procedimientos inmediatos o vitales [Internet]. [citado 5
abril 2021]. Disponible en:
http://www.facmed.unam.mx/deptos/biocetis/PDF/Portal%20de%20Recursos
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4. Pérez T. Preparación de Frotis Sanguíneo: Protocolo de Laboratorio con


Apoyo en Video Tutorial Científico, Imágenes y Texto [Internet]. Steemit. 2019
[citado 1 abril 2021]. Disponible en:
https://steemit.com/spanish/@tomastonyperez/preparacion-de-frotis-
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imagenes-y-texto

5. Contreras A. Preparación y tinción de muestras [Internet]. Seramix. 2013


[citado 1 abril 2021]. Disponible en:
https://seramix.blogs.uv.es/2013/05/08/preparacion-y-tincion-de-muestras/

6. Serna E, Megías J, San Miguel Teresa. Frotis sanguíneo y tinción Giemsa.


[Video]. España: Universidad de Valencia; 2016. Disponible en
https://www.youtube.com/watch?v=rmKx5JWmo4I

7. Zita A. Diferencia entre una célula animal y un vegetal [Internet]. Internet.


2021 [citado 4 abril 2021]. Disponible en:
https://www.diferenciador.com/celula-animal-y-vegetal/#:~:text=La%20c
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8. Instituto de Ciencias y Humanidades. Anatomía y fisiología humana. 2.ª ed.
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9. Glóbulo rojo [Internet]. Instituto Nacional del Cáncer. 2019 [citado 2 abril
2021]. Disponible en:
https://www.cancer.gov/espanol/publicaciones/diccionarios/diccionario-
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10. Guyton y Hall. Tratado de fisiología médica. [Internet]; 12 edición: 413 pág.
[Citado 2 abril 2021] Disponible en:
http://www.untumbes.edu.pe/bmedicina/libros/Libros10/libro125.pdf

11. Glóbulos blancos: ¿qué son y qué información aportan sobre tu salud?
[Internet]. Medical Assistant. 2020 [citado 3 abril 2021]. Disponible en:
https://ma.com.pe/globulos-blancos-que-son-y-que-informacion-aportan-
sobre-tu-salud#:~:text=Los%20gl%C3%B3bulos%20blancos%20son
%20parte,c%C3%A9lulas%20T%20y%20c%C3%A9lulas%20B

12. ¿Qué son los glóbulos blancos o leucocitos? | Día Mundial de la Leucemia
Mieloide Crónica [Internet]. Día Mundial de la Leucemia Mieloide Crónica.
2013 [citado 3 abril 2021]. Disponible en: http://aeal.es/dialmc2013/2-3-2-que-
son-los-globulos-blancos-o-leucocitos/#:~:text=Los%20gl%C3%B3bulos
%20blancos%20son%20las,cuando%20el%20organismo%20los
%20necesita.

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