Enzimas

- Son proteínas catalíticas.

- Aceleran la velocidad de las reacciones en un
medio con temperatura y pH controlados.
- No modifican la Keq.

¿Cómo modifican la cinética de las reacciones?

En la siguiente animación,podemos ver graficado el

efecto de una enzima en la cinética ( velocidad) de la
reacción.
 Especificidad de las enzimas

• Las enzimas interaccionan con los

sustratos a través de las numerosas
interacciones débiles, que se establecen
por complementariedad estructural.
• Las enzimas son esteroespecíficas
• El sitio de unión de la enzima con el
sustrato se llama SITIO ACTIVO (S.A)
• El S.A es una pequeña porción de la
enzima.
Ejemplo de estructura de una enzima: la quimotripsina ,
una enzima digestiva que hidroliza proteínas.

• La estructura primaria de
esta enzima consta de 245
aminoácidos.
• La estructura cuaternaria
de consta de tres cadenas
polipeptídicas: a, b y c.
• Los enlaces disulfuro unen
las cadenas a,b y c entre sí.
• Los aminoácidos del Sitio
Activo son tres: His, Asp y
Ser.
• De 245 aminoácidos totales,
solamente los grupos R de
tres de ellos conforman el
sitio activo de esta enzima.
Modelo espacial de la Quimotripsina
• La enzima tiene un
aspecto globular,
dado por el
plegamiento de las
subunidades a,b y
c.
• El S.A se muestra
en naranja.
• Esta enzima tiene
un solo S.A.
• Las enzimas
pueden tener un
S.A por subunidad.
 Modelo del esqueleto polipeptídico en forma de
cinta
• Los grupos
funcionales que
componen el S.A
Lámina plegada están en rojo, y los
puentes disulfuro
en amarillo.
• Puede observarse
en detalle las
superestructuras
secundarias en alfa
hélice y lámina
plegada.
- hélice
Un acercamiento al sitio activo
• En detalle pueden
verse los grupos
funcionales dela
enzima que toman
contacto con el
sustrato de la
reacción
• En la siguiente
animación se ve un
modelo de enzima
en acción.
 CLASIFICACION INTERNACIONAL DE ENZIMAS
Existen 6 categorías:
1- Oxidoreductasas:
2-Transferasas
3- Hidrolasas
4- Liasas
5- Isomerasas
6- Ligasas

Nomenclatura
La nomenclatura internacional reconoce a las enzimas mediante
4 números. Por ejemplo:
Anhidrasa carbónica es la enzima 4.2.1.1
Cinética de saturación: curva experimental.
La tangente de la
curva en este punto
es la V0
• Normalmente hay más
sustrato que enzima en los
sistemas de reacción,lo
que explica el “efecto de
saturación” observado en
la curva de M.Menten.
• Ni siquiera una alta
concentración de sustrato
influirá en la Vmax de la
reacción.
• Este tipo de curvas se
conocen como Cinética
Michaeliana.
Ecuación de Michaelis Menten
• Este es el algoritmo de
la curva experimental.
• La V0 es la velocidad
instantánea, o
aceleración a tiempo
cero según la cantidad de
enzima.
• La Km es una constante
para cada enzima con un
determinado sustrato, en
condiciones de pH y tºC
fijas.
 ¿Qué pasa cuando la V0 es 1/2 de la
Vmax?
• Veamos qué ocurre con la ecuación de M.Menten
en este caso.
• Si V0 es 1/2 de la Vmax, entonces:

• 1/2 Vmax= Vmax. [S] / Km + [S]

• Km + [S] = 2 [S]

• Km = [S] Cuando V0 es 1/2 de la Vmax

• La concentración intracelular de los metabolitos están en el

orden de los valores de Km de sus enzimas.
 ¿Cuándo se alcanza la Vmax?
• La Vmax se alcanza para valores muy altos de sustrato.
Veamos en el cálculo.
• Si V0 es el 99% de Vmax, entonces:

• 0,99 Vmax = Vmax. [S] / Km + [S]

• 0,99 Km + 0,99 [S] = [S]

• 0,99 Km = 0,01 [S]

• [S]= 99 Km
• Las reacciones enzimáticas generalmente no operan a su
Vmax
 La Km es una constante para cada tipo de
sustrato
• Gráficamente puede
verse que la mitad de la
Vmax se alcanza con una
determinada
concentración de
V inicial (V0)
Moles/tiempo sustrato, cuyo valor es
el de la Km.
E1
• La Km no cambia para
distintas
E2
concentraciones de
E3 enzima,lo que
evidencia una elevada
aceleración del
Km Sustrato (moles)
proceso.
 Variación de la velocidad en función de la
concentración de la enzima
• La tangente de cada
una de las curvas
Producto representa la
velocidad inicial para
cada concentración
E1
de enzima.
• La condición para
E2 obtener esta gráfica,
es que la enzima esté
E3 saturada por el
sustrato.
• A mayor cantidad de
enzima para un
tiempo mismo t,la variación
de velocidad es
mayor.
Valores de Km de algunas enzimas

• El valor deKm
depende del
sustrato, como
puede verse
por ejemplo
para la enzima
hexoquinasa.
 Otra forma de representar la cinética
enzimática. Ecuación de Linneweaver-Burke
 ¿Qué factores afectan la actividad de una
enzima?

• Los factores que afectan la actividad de las

enzimas en general son:
• pH
• temperatura
• concentración salina ( osmolaridad)
• concentración de sustrato y producto
• Sustancias inhibidoras
• a) reversibles: competitivas y no competitivas.
• b) irreversibles como muchos frámacos y
agroquímicos
Efecto del pH en la actividad enzimática

• La gráfica muestra la
respuesta de una enzima
digestiva en respuesta al
pH.
• La Pepsina es una hidrolas
de proteínas ( proteasa), y
su acción ocurre fuera de
las células que la
producen ( es una enzima
extracelular).
Otro caso de respuesta de la actividad
enzimática frente al pH
• Esta enzima es una
esterasa ( hidroliza
enlaces éster).
• La reacción que cataliza es
la siguiente:

• Glucosa-6-P + H2O

• Glucosa + fosfato

Glucosa 6-fosfatasa
Los inhibidores competitivos de las enzimas, son
estructuralmente semejantes a los sustratos

Inhibición competitiva
Los inhibidores no competitivos de las enzimas,
no se parecen estructuralmente a los sustratos

Inhibición no competitiva
Representación gráfica de la acción de inhibidores reversibles
competitivos y no competitivos

Competitiva, cambia la Km No competitiva, cambia la Vmax

 La pareja Enzima-Coenzima o Enzima-
Cofactor.
• En algunos tipos de Enzimas, no basta el
componente proteico para que sean reactivas.
Necesitan la ayuda de otras especies que deben
actuar junto con la enzima, y que pueden ser:
• Orgánicas: como el NAD, FAD, CoA,
ATP.Generalmente contienen vitaminas en su
estructura, o son vitaminas.
• Organometálicas: grupo Hemo ( porfirina más Fe)
• Iones: Fe, K+, Mg2+, Ca2+, Mo ,Zn, Cu.

• La interacción E-coenzima y E-cofactor es de tipo

Reversible y No covalente.
 Enzimas reguladoras
Estas enzimas pueden ser reguladas por:

• Concentración del producto final de una vía

metabólica.
• Concentracíon inicial del sustrato
• Concentración de algún intermediario de la vía
metabólica en la que participa.
• Por hormonas
• Por todos los factores mencionados

• Entre las enzimas reguladoras, el grupo de las

Enzimas alostéricas, es el de las que son
modificadas por la acción reversible y no covalente
de una molécula señal, que actúa en el Sitio
Alostérico.
Las enzimas alostéricas responden a la acción de
efectores positivos y negativos, respondiendo a
modelos cinéticos No-Michaelianos como el del
siguiente gráfico:
• Las curvas tienen forma
sigmoidal que indican un
efecto cooperativo del
sustrato.
• La respuesta al efector
positivo, acerca la cinética al
modelo Michaeliano.
• El modelo sigmoidal permite
que la enzima sea activa en
un rango de [S] más acotado
que en el modelo
Michaeliano.
• Para cada efector, debe
existir un sitio alostérico.
 Ejemplo de regulación alostérica por la
Carga Energética del sistema
• Algunas enzimas
alostéricas del
metabolismo
% de Vmax
responden a la Carga
Energética (CE) del
Catabólicas
Sistema.
• Las del Catabolismo se
inhiben con CE por
Anabólicas
encima de 0,8.
• Las del Anabolismo se
0 0 ,8 0,9 1,0
activan con CE por
Carga encima de 0,8.
energética • En estado de
homeostasis las
enzimas operan a un
50% de su Vmax
 REGULACION CELULAR DE LAS ENZIMAS

• Modificación covalente de las enzimas reguladoras: la

actividad de las enzimas se modifica por cambios covalente
reversibles en las cadenas laterales de determinados
aminoácidos de la enzima. Por ejemplo: a) fosforilación
defosforilación de grupos hidroxilo; b) reducción de grupos
disulfuro.

• Activación por ruptura proteolítica: algunas enzimas son

sintetizadas inicialmente en forma inactiva y deben ser
modificadas para adquirir actividad. Las formas inactivas se
denominan Zimógenos.

• Regulación por isoenzimas: son diferentes formas

moleculares de enzimas que catalizan la misma reacción, y
poseen diferentes patrones cinéticos.
La actividad enzimática no se expresa en todos
los tejidos por igual

• El patrón proteico de cada célula, e incluso de cada

compartimiento celular, depende de la expresión de los
genes.
• Las enzimas son proteínas, y la expresión de los genes que
las codifican está regulada a nivel de la transcripción.
• La forma más efectiva de modificar la actividad de una
enzima, es provocando su síntesis o inhibiéndola, de modo
de hacer que esté presente o no, en el sistema.
• Otra forma de modificar la actividad la actividad es
mediante la regulación del proceso de degradación de la
enzima ( aumentar la velocidad de recambio).