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PRÁCTICA 03

- Tinción de Gram
- Tinción de Zhiel NEELSEN
 OBJETIVOS
• Realizar la tinción compuesta de Gram
• Observar y describir la morfología, agrupación y reacción tintorial de las
bacterias con tinción de Gram
• Realizar la tinción compuesta de ZHiel NEELSEN
• Observar y describir la morfología, agrupación y reacción tintorial de las
bacterias acido alcohol resistentes con tinción de Zhiel Neelsen
- Tinción de Gram
BACTERIAS GRAM POSTIVAS
Se tiñen de color purpura, el
colorante queda atrapado en la
capa de peptidoglucano (estructura
Entrecruzada y gruesa, forma de
malla rodea la célula)

BACTERIAS GRAM NEGATIVAS

Delgado capa de peptidoglucano
Incapaz de tener el colorante cristal de
violeta, por lo que las células se tiñe
con el colorante de contraste y
adquieren color rojo
Coloración GRAM
Patólogo Danés Christian Gram, 1880

Solución Tiempo de aplicación Bacterias grampositivas Bacterias gramnegativas

Colorante: cristal violeta 30s Violeta Violeta

Mordiente: solución lugol I2KI a 1min Violeta Violeta

3%

Decolorante: alcohol acetona 10-15seg Violeta Incolora

Colorante de contraste: 1min Violeta Rosada

safranina
Coloración GRAM
 MORFOLOGÍA
- Bacilos: bastoncillos
- Cocos: esferas
- Espiroquetas: espiral
- Cocobacillos: cortos y gruesos, casi no
pueden distinguirse de los cocos
- Vibrios: hélices truncas
- Estreptobacilos: cuando los bacilos forman
cadena
- Estreptococos: cuando los cocos forman
cadenas, del griego : streptos: cadena
torcida
- Diplococos: pares de cocos
COCOS (Diplococos)

Neisseria gonorrehae
• Morfología: Diplococo
• Tinción de Gram: Negativo
COCOS (Diplococo)

Neumonococo (Streptococcus pneumoniae)

• Morfología: Diplococo
• Tinción de Gram: Positivo
COCOS (Estreptococo)

• Streptococcus pyogenes
• Morfología: estreptococo
• Tinción de Gram: Positivo
COCOS (Estafilococo)

Staphilococcus aureus
• Morfología: Estafilococo
• Tinción de Gram: Positiva
BACILOS

Escherichia coli
• Morfología: Bacilo
• Tinción de Gram: Negativo
 BACILOS
Bacillus anthracis
• Morfología: Bacilo
• Tinción Gram: Positivo
VIBRION

Vibrium cholerae
• Morfología: Vibrion
• Tinción de Gram: Negativo
ESPIROQUETAS
• Leptospira interrogans
• Morfología: espiroqueta
• Tinción Gram: Negativo (las
espiroquetas son débiles a la tinción
de Gram)
Es por eso que se usa La Tinción de
FONTANA-TRIBONDEAU
- Tinción de ZHIEL NEELSEN
• COLORACIÓN DE ZIEHL
NEELSEN: PROPIEDAD
ALCOHOL ACIDO RESISTENTE
• PROCEDIMIENTO:
• FIJACIÓN: con calor
• COLORACIÓN FUCSINA BASICA
FENICADA: TRES VAPORES
• DECOLORACIÓN: ALCOHOL
ACIDO 3%.
• COLORACIÓN AZUL DE
METILENO
• OBSERVACIÓN MICROSCOPICA