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OBSERVACIN DE MICROORGANISMOS EN AGUA ESTANCADA

OBJETIVO:
Observar los microorganismos de una charca o los de una infusin.
MATERIAL:
Microscopio. portaobjetos, cubreobjetos, infusin, papel de filtro, cuentagotas, pinzas, vaso de
precipitados y colorante rojo neutro.
INTRODUCCIN:
La obtencin de microorganismos (protozoos, algas unicelulares, etc.) se realiza de las
siguientes maneras:
1.- Obtencin de microorganismos de aguas estancadas.
Los microorganismos para la observacin se pueden extraer directamente de una charca o
agua estancada. O bien se puede preparar una infusin utilizando restos vegetales o estircol
que se dejar en agua durante varios das con el fin de que proliferen los suficientes
organismos para su observacin.
2.- Observacin
Una vez en el laboratorio se extrae, con un cuentagotas, un poco de lquido del fondo de los
frascos que se vierte en el centro de varios portaobjetos. Despus de cubrirlos con los
correspondientes cubreobjetos se observar cada preparacin al microscopio utilizando primero
pequeos aumentos y luego pasando a los de mayor aumento.
PROTOCOLO
1.- Observacin directa
1.1.- Con un cuentagotas tomar unas gotas de lquido de la infusin, procurando que sea de
las cercanas de residuos vegetales.
1.2.- Depositar dos o tres gotas en un portaobjetos limpio.
1.3.- Con unas pinzas finas coger una muestra muy pequea de algn residuo vegetal, en
avanzado estado de descomposicin, y depositarlo en el mismo portaobjetos utilizado
anteriormente.
1.4.- Colocar el cubreobjetos de tal manera que se evite la formacin de burbujas.
1.5.- Secar el exceso de agua con ayuda de un trozo de papel de filtro.
1.6.- Observar al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento.
2.- Coloracin vital
2.1.- Sobre un portaobjetos limpio realiza una nueva preparacin siguiendo las instrucciones
marcadas en el punto anterior.
2.2.- Aadir en el borde del cubre una gota de rojo neutro (disolucin al 1 x 10.000) esperando
que penetre en la preparacin muy lentamente. Puede facilitarse la difusin del colorante
colocando en el lado opesto del cubre, al que se puso la gota de rojo neutro, una tirita de
papel de filtro. Al embeber el papel de filtro algo de agua de la preparacin, se facilita la
penetracin del colorante. El rojo neutro, al impregnar muy ligeramente al microorganismo, da

mayor contraste a los elementos morfolgicos citoplasmticos.


2.3.- Observar al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento para luego
hacerlo con los de mayor aumento.

Observacin de la sangre

MATERIALES:
Microscopio
Portaobjetos
Mechero de alcohol
Lanceta estril
Cubeta de tincin
Frasco lavador
Alcohol absoluto
Solucin de wrigth
TCNICA
Con la lanceta estril realizar una puncin en un pulgar.Depositar una gota de sangre en la
parte central de un portaobjetos.Colocar un portaobjetos como indica el dibujo y deslizarlo
sobre toda la superficie del porta de manera que se pueda obtener una fina pelcula de
sangre.Colocar el frotis de sangre sobre la cubeta de tincin y aadir unas gotas de alcohol
absoluto y dejar que el alcohol se evapore para fijar la preparacin.Cubrir con unas gotas de
solucin de giemsa y dejar actuar durante 15 minutos. Evitar la desecacin del colorante
agregando ms lquido.Lavar la preparacin hasta que no queden restos de colorante.Dejar
secar aireando el porta o bien al calor muy lento de la llama del mechero.Observar al
microscopio.

OBSERVACIN MICROSCPICA
Al microscopio se vern con un dominio predominante los glbulos rojos, hemates o eritrocitos
teidos de color rojo. No tienen ncleo y son ms delgados por el centro que por los
bordes.Los glbulos blancos o leucocitos se identifican fcilmente por la presencia de ncleo,
teido en un tono ms oscuro. Hay varias clases de leucocitos:Linfocitos: de tamao
aproximado al de los glbulos rojos, tienen un solo ncleo que ocupa casi todo el
glbulo.Monocitos: son los leucocitos mayores, poco frecuentes normalmente, ncleo grande,
redondo, son los ms mviles y su funcin principal es la fagocitosis.Granulocitos o
Polimorfonucleares: ncleo fragmentado o arrosariado. Pueden ser eosinfilos, con abundantes
granulaciones teidas de rojo y ncleo bilobulado, neutrfilos de ncleo multilobulado y
basfilos.Las plaquetas no son visibles ya que precisan una tcnica especial de tincin

OBSERVACIN EPIDERMIS VEGETAL

OBJETIVO
Observar la morfologa tpica de las clulas vegetales y la presencia de estomas. Practicar las
tcnicas de tincin de preparaciones microscpicas.
MATERIAL DE TRABAJO
Microscopio. Portaobjetos. Cubreobjetos. Pinzas. Bistur. Tijeras. Colorante (verde de metilo
actico). Placa de Petri. Papel de filtro. Frasco lavador. Libro de texto. Lpices de colores.
MATERIAL DE ESTUDIO
Hojas de lirio, de tulipn, de gladiolo, de cebolla, de puerros, y en general hojas de plantas
monocotiledneas.
INTRODUCCIN
La EPIDERMIS es un tejido formado por una nica capa de clulas unidas entre s, sin dejar
espacios intercelulares. Se encuentra en las hojas, tallo y races de las plantas jvenes. Sus
clulas no poseen cloroplastos y pueden estar engrosadas exteriormente con materiales
lipdicos, formando una capa impermeable llamada cutina. Cuando esto es as, la capa de
cutina impide el necesario intercambio de agua y gases con la atmsfera, por lo que aparecen,
especialmente en el envs de las hojas, unas estructuras denominadas estomas que hacen

posible ese intercambio. Los estomas poseen un mecanismo que regula su apertura y cierre.
La epidermis es un tejido protector cuya funcin es la de proteger al vegetal de la desecacin y
de la agresin de los agentes externos. En la raz permite la absorcin de agua y sales
minerales.
PROTOCOLO
1.- Con ayuda del bistur y de las pinzas arranca un pequeo trozo de la epidermis de la hoja
de lirio, procurando que sea lo ms transparente posible, recuerda que las clulas de la
epidermis carecen de cloroplastos. Ten cuidado de no arrancar tambin parte del parnquima,
tejido de color verde, ya que sus clulas si tienen cloroplastos y que se encuentra por debajo
de la epidermis. Si el trozo arrancado es muy grande corta un pequeo cuadrado de 5 mm de
lado, que ser suficiente.
2.- Deposita el fragmento en un portaobjetos en el que previamente has echado una gota de
agua. Procura que el fragmento de epidermis no se arrugue.
3.- Con el portaobjetos situado encima de la placa de Petri, aade a la muestra unas gotas de
colorante verde de metilo actico y espera, ms o menos 5 minutos, para que este ejerza su
accin.Verde metilo actico: 1 gramo de colorante en polvo, 100 ml de alcohol etlico y 1 ml de
cido actico glacial.
4.- Transcurrido los cinco minutos, elimina el colorante vertiendo agua sobre la muestra, que
habrs sujetado al porta con ayuda de unas pinzas. El exceso de agua o de colorante que
queda en los alrededores de la muestra se seca con un trozo de papel de filtro.
5.- Aade unas 2 3 gotas de agua y con cuidado coloca el cubreobjetos sobre el fragmento
de epidermis, cuidando de que no queden burbujas de aire entre el cubre y el portaobjetos.
6.- Observa al microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento, para luego ir
pasando a otros de mayor aumento.
La forma de las clulas epidrmicas y la de los estomas depende del tipo de planta que
estemos estudiando. En ocasiones el ostiolo no se ve por encontrarse cerrado; en estos casos
se debe preparar otra muestra utilizando una hoja que est recin cortada, ya que los ostiolos
suelen estar cerrados en las hojas marchitas o bien que llevan mucho tiempo cortadas.

PRCTICA 4: Observacin de bacterias del yogur

OBJETIVOS

Realizar una tincin simple de bacterias procedentes de de un yogur.


Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en qu casos se recomienda una u otra.
Observar la morfologa bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de agrupaciones
que existen.
Practicar con el microscopio al mximo aumento y con el correcto empleo del aceite de
inmersin.

MATERIAL
Mechero Bunsen o de alcohol
Asa de siembra o aguja enmangada
Pinzas
Portaobjetos
Muestras bacterianas de origen natural: yogur, vinagre, sarro dental, suelo, etc.
Colorantes para tincin: Azul de metileno al 1%
Microscopio y aceite de inmersin.

BACTERIAS DEL YOGUR

El yogur es un producto lcteo producido por la fermentacin natural de la leche. A escala


industrial se realiza la fermentacin aadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociacin de
dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de cido, pero muy
aromtico, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparacin se podrn, por
tanto, observar dos morfologas bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupacin
(estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas). Adems, el tamao del lactobacilo (unos
30m de longitud) facilita la observacin aunque no se tenga mucha prctica con el enfoque
del microscopio.
PROCEDIMIENTO
Realizar el frotis disolviendo una mnima porcin de yogur en una pequea gota de agua.
Secar suavemente a la llama de un mechero.
Fijar con metanol para eliminar parte de la grasa.
Teir con azul de metileno durante 1-2 minutos.
Observar al mximo aumento del microscopio.