PRIONES

Carleton Gajdusek (1957)

Kuru ¿Encefalitis viral epidémica?
Vincent Zigas

Degeneración del Cerebro

William Hadlow (1959) Scrapie (Sc) – Encefalitis espongiforme

ovejas y cabras

Igor Klatzo Enfermedad Creutzfeldt-Jakob (ECJ)

«hereditaria»

Stanley Prusiner Agente mas pequeño que un virus

1985 gen de las propias 27 – 30 KDa y solo proteína

células=254 aa PrPC - PrPSc
Núcleo

Karp, 2009 (Cap. 12)

 Núcleo
10 µm de diámetro
200000 X - longitud de DNA

ADN (1) Hebra simple de ADN (2) Hebra de

cromatina (ADN con histonas) (3) Cromatina
durante la interfase con centrómero (4)
Cromatina condensada durante la profase
(Dos copias de ADN están presentes).
(5) Cromosoma durante la metafase.
Núcleo
Morfológicamente se distinguen dos tipos de cromatina en el nucleoplasma: 

La eucromatina (EC) tiene un aspecto claro y está poco condensada, se cree que se

produce una mayor expresión génica. 

La heterocromatina (HC) tiene un aspecto oscuro y está muy condensada, se supone que
hay una menor expresión génica (silenciamiento de genes, organización nucleolar). 
Nucléolo ARN ribosómico (ARNr)

Captación

5S- RNAr -45 + Proteínas

Subunidades ribosómicas
 Poros nucleares

1. Abertura del poro – diámetro (10-25 nm) disponibles 9 nm

2. Carga de la molécula (peso – 50KDa ó 50.000 Da)
3. Capacidad de deformación
4. Segmentos de secuencias ( señales de localización nuclear – SLN), que son
reconocidas por las proteínas del borde de los poros)
5. Capacidad de dilatación de los poros
Modelo del complejo del poro nuclear
Exportación de mRNP desde el núcleo
Transporte de proteínas a través de los
poros nucleares
GAP:
GTPasa
activating
protein

GEF:
Exchange
factor
Ensamblaje y Estructuración de los Ribosomas
ARN ribosomal
 Nucleosoma
-146 -200 pb de longitud (depende del organismo)
-Octámero de histonas
-Diámetro de 11 nm
-Lisina - Arginina

*Fosforilación (Ser)
Acetilación
Metilación

* H1 23 kD
H2A 14 kD
H2B 13,8 kD
H3 15,3 kD
H4 11,3 kD

Octámero: un núcleo proteico, alrededor del cual se enrolla la hélice de ADN (1,8 vueltas). Entre cada
una de las asociaciones de ADN e histonas existe un ADN libre «ADN espaciador», de longitud variable
aprox. Hasta 80 pares de nucleótidos que garantiza flexibilidad a la fibra de cromatina. 
Variantes histónicas

Karp, 2009 p. 493

 1,8 Vueltas cargas
Flexibilidad Puentes de H
Heterocromatina (HC) - HP1 - ADN metilado ( C) constitutiva – facultativa (regulación
expresión).

ARN interferente Suprime la expresión de Genes específicos

Histonas acetiladas N-terminal Lisinas

Hipoacetilación Cromatina inactiva Factores de transcripción

Metilación Represión transcripcional Unión ADN-H fuerte

Levadura: metilación en lisina 9 de la histona 3 represión de la transcripción en la

heterocromatina; metilación en lisina 4 promueve la expresión de genes.
Complejos SAGA Reposicionamiento de nucleosomas

-CH3

X Factores de transcripción
 ¿Un gen se extiende a lo largo de varios
nucleosomas?

Topoisomerasa Superenrrollamientos

Lazos
 Organización

TTAGGG

12-15 nt

Telomerasa
(Trans. Inv.)

H1

Nucleosomas – mecanismo de condensación Acortamiento 10-4 veces

Modificaciones histónicas y “código histónico”

Lis

Ser

Karp, 2009 p. 497

Fosforilación y desfosforilación
Láminas Fosforilación – desfosforilación
cinasa / fosfatasa (Mg2+, Mn2+)

9 moléculas de histonas por cada 200 pb ADN

Célula humana con 6000 millones de pb ADN

300 millones de moléculas de histona

Número repetido de genes de histona

 Genomas eucarióticos

Secuencias de ADN altamente repetidas - tándem

105 - 106 copias 10% ADNt en vertebrados

Cortas

Secuencia repetida sin interrupción

No son genes

- ADN satélite
- ADN minisatélite
- ADN microsatélite
- ADN satélite

Centrómeros

5 – 100 pb longitud 100 millones pb

- ADN minisatélite
- TTAGGG -
Telómeros - AATCCC -
15 pb longitud 1000 – 3000 repeticiones

- ADN microsatélite

Disperso

2 – 5 pb longitud 100 copias repetidas

Secuencias de ADN moderadamente repetidas

103- 105 copias 20% - 80% ADNt en vertebrados

ARNr – ARNt - proteínas o sin función

-Secuencias de ADN repetidas con función codificadora

Secuencias repetidas idénticas en serie. ARNr – ARNt - proteínas

- ADN repetido que carece de función codificadora

Dispersos – transponibles 1951 - 1957 por  Barbara McClintock

SINE- ECIN (elementos cortos interpuestos) < 500 pb Alu - 11%

LINE- ELIN (Elementos largos interpuestos) > 1000 pb L1 – 17%

Secuencias no repetidas Genoma humano

Una – pocas copias

Familias – superfamilias de genes

 Superhélice ADN

2 ADN circulares, peso molecular idéntico con velocidad de

sedimentación diferente

Superhélice + y -

Topoisomerasas

relajación

desanudar

desencadenar
 Complejidad del Genoma

1. Desnaturalización del ADN:

Solución salina - °T

Enlaces

°T – fusión del ADN

La temperatura de fusión (Tm) se define como la temperatura a la que se

ha desnaturalizado la mitad del ADN de la muestra.

Incremento de la absorbancia

°T – mitad del cambio de absorbancia Temperatura de Fusión

(Tf)

> G-C (%G+%C) ADN > Tf

 Complejidad del Genoma

2. Renaturalización del ADN (1960):

Ácido - °T

Reconocimiento

Enlaces

°T

Disminución de la absorbancia
Características del ADNmt y ADNr
ADNmt Cadena pesada (Heavy) - ligera (Light)

Proporción de C - G muy diferente

peso molecular muy distinto

bases púricas - H

16.569 bp pirimidinas - L
Fosforilación oxidativa
  37 genes:
· 2 rRNA (12S, 16S)
· 22 tRNA
· 13 genes estructurales:

• Información compacta 7 subunidades (Complejo I),

• 3% de secuencias no codificantes 1 cyt b (Complejo III),
• La región control polimórfica 3 subunidades (Complejo IV),
Región hipervariable (HV): HVI; HVII 2 de ATPasa (Complejo V)
16024 - 16569 y 1 - 576 http://mitomap.org/MITOMAP
 u
b
i
- El ADN mitocondrial está en replicación constante. q
-   u
i
- Transferencia sucesiva de muchos genes. t
i
n
- Pequeño en tamaño vs 3200 millones pb. a
c
i
- Porcentaje muy elevado de ADN codificante. ó
n

- Falta generalizada de secuencias repetidas y genes de ARNr

comparativamente pequeños, parecidos a los de procariotas.

Producción de energía celular y procesos de fosforilación oxidativa

Radicales libres Daño oxidativo + falta de histonas

Mecanismos de reparación de daños el ADN eficientes

tasa de mutación
ADNr

ETS
 ITS; IGS
Se transcriben pero no se traducen; no se transcriben y no se traducen

ETS: Espaciador transcribible externo
Plantas: 25S
Karp - cap. 11, p 442