Estructura y

Replicación del ADN

El estudio de la naturaleza genética de los organismos tiene su base en el siglo
19 con los estudios del monje austriaco Gregorio Mendel.

A finales del siglo 19 y principios del 20, múltiples científicos describieron los
cromosomas y los genes como unidades de herencia así como los procesos de
mitosis y meiosis, importantes para la multiplicación de las células y la
propagación de las características genéticas respectivamente.
Se sabía que la información genética estaba contenida en los cromosomas.

¿Qué son los cromosomas?

¿Qué molécula es la responsable?

¿DNA o proteínas?
Fig. 16-21a

DNA en eucariotas existe en forma de cromatina

Nucleosome
(10 nm in diameter)
DNA
double helix
(2 nm in diameter)
H1
Histone tail
Histones

DNA, the double helix Histones Nucleosomes, or “beads

on a string” (10-nm fiber)
Fig. 16-21b

Chromatid
(700 nm)

30-nm fiber

Loops Scaffold

300-nm fiber

Replicated
chromosome
(1,400 nm)

30-nm fiber Looped domains Metaphase

(300-nm fiber) chromosome
Transformación (1928)
Avery: aisló distintos componentes de la bacteria
muerta y trató de transformar bacterias vivas no
patogénicas. Lo único que funcionó fue el DNA.
Virus: Tiene que infectar una célula y usar su maquinaria para reproducirse

Virus de bacterias: bacteriofagos (fagos)

Virus T2: *compuesto primordialmente de DNA y proteínas.

*infecta E. coli y la convierte rápidamente en una fábrica de T2 que

se liberan cuando la bacteria se rompe.

De alguna manera tiene que reprogramar la célula para que genere virus.

¿Qué componente viral es el responsable?

Nucleótido Amino ácido- Metionina

El DNA viral puede programar células Experimento Hershey-Chase (1952)
Evidencia adicional:

Antes de entrar a mitosis las células duplican a perfección solo su DNA.

El DNA se distribuye igualmente a las dos células generadas.

Grupos de cromosomas diploides contienen exactamente el doble de DNA que

grupos haploides

Regla de Chargaff (1949)

Los organismos contienen aproximadamente

igual cantidad de adeninas y timinas e igual
cantidad de guaninas y citosinas.
 Sugar–phosphate Nitrogenous
backbone bases Se conocía la estructura de un polinucleótido
5 end

Thymine (T)

Adenine (A)

Cytosine (C)

Phosphate DNA nucleotide

Sugar (deoxyribose)
3 end
Guanine (G)
 Patrón de difracción del DNA

Rosalind Franklin

El patrón de difracción:

Watson y Crick (1953)

Estructura helicoidal
El ancho sugiere una estructura de doble cadena
• 1953, James Watson y Francis Crick describieron la estructura del DNA
utilizando data de cristalografía de rayos X recolectada por Rosalind Franklin y
descubrimientos anteriores de Erwin Chargaff.

• Su modelo describe la estructura de la molécula y provee una explicación de la

forma en que la molécula de ADN se duplica con cada evento de división-
multiplicación celular.
 Cada vuelta lleva 10 bases y mide 3.4 nm
Mantiene las bases nitrogenadas hacia
adentro del espiral (son hidrofóbicas)

espiral

Diámetro uniforme
Fig. 16-7

5 end
Hydrogen bond 3 end

1 nm

3.4 nm

3 end
0.34 nm
5 end
(a) Key features of DNA structure (b) Partial chemical structure (c) Space-filling model
Purina + Purina: muy ancho

Pirimidina + Pirimidina: muy corto

Pirimidina + Purina: consistente

Con la data de los rayos X
 El modelo explica la regla de Chargaff
Puentes de hidrógeno

Aunque las reglas de pareo de bases determinan la combinación de bases nitrogenadas

que forman la hélice, no restringen la secuencia de nucleótidos de cada cadena de DNA.
Modelo de la doble hélice o hebra
 Mecanismos de replicación
Origen de replicación: secuencias de DNA especializadas en donde comienza la
replicación.

Reconocido por proteínas necesarias en el proceso de la replicación que se unen

al DNA y abren la cadena desenrrollando las dos hebras.

La replicación procede en ambas direcciones (bidireccional)

Procariota
Eucariota
DNA polimerasas: catalizan la extensión de la nueva cadena de DNA.(50 bases/min)
¿De dónde proviene la energía?
¿Cómo afecta la replicación?
Las polimerasas solamente
añaden nucleótidos al carbono 3’
El DNA solamente puede crecer
en dirección 5’→ 3’

El fosfato de un nucleótido se une al azúcar en el carbono 5’

El fosfato de un nucleótido se une al carbono 3’ del azúcar del nucleótido adyacente
Las polimerasas solo pueden añadir
nucleótidos a una cadena pre existente.

En la replicación, el primer (cebador)

no es DNA, sino una molécula corta
de RNA (10nt).

Primasa: une los nucleótidos de RNA

para formar el primer.

El RNA se puede comenzar a formar

sin necesidad de una cadena pre
existente.

Cada fragmento de Okazaki necesita

un primer. Estos se reemplazan luego
con nucleótidos de DNA por una
polimerasa
Fig. 16-13

Single-strand binding Primase

proteins

Topoisomerase 3
5 RNA 3
primer

5
5
3
Helicase
Proteínas importantes en la replicación

Helicasas: separan las hebras

SSBP: proteínas que se unen a las hebras sencillas y las mantienen separadas
Fig. 16-17

Overview
Origin of replication
Leading strand Lagging strand

Leading strand
Lagging strand
Single-strand
Overall directions
binding protein
of replication
Helicase
Leading strand

5 DNA pol III

3
3
Primer Primase
5
Parental DNA 3
DNA pol III Lagging strand
5
4
DNA pol I DNA ligase
3 5
3 2 1
3
5
https://www.youtube.com/watch?v=2_-jSoSaaTA
Nucleasa: remueve la porción que no va

Nucleotide excision repair

Reparación de nucleótidos por excisión
100-1000 nt