VIH

Laboratorio
diagnóstico
INTEGRANTES
DÍAZ CACHAY, LADY DIANA
GARCIA MUÑOZ, EDWIN DAGOBERTO
HIDALGO CUEVA, BRIGGITT CORAYMA
 Origen del VIH

• Origen: 1930 en África central.

• Simios desarrollan SIV.
• Primer caso en Perú: paciente
homosexual de Lima en 1983.
Generalidades y clasificación

• FAMILIA: Retroviridae
• GÉNERO: Lentivirus
• TIPOS: 1 y 2
• GENOMA: ARN monocatenario
lineal positivo.
Estructura del VIH
• Forma esférica con un diámetro de 100 a 120 nm.
• Envoltura: bicapa lipídica.
• Proteínas del VIH 1:

PRECURSOR PROTEÍNAS MADURAS

Glicoproteína de gp120SU y gp41TM

envoltura (env)
Poliproteína gag p17MA, p24CA y p9NC

Poliproteína pol Proteasa (PR)

Transcriptasa inversa (RT) Integrasa
(IN).
Proteínas tat, rev, nef, vif, vpu y vpr
accesorias
Nombre  Tamaño  Función  Localización 
Gag (pr55)
MA  p17  Anclaje de la membrana, transporte al núcleo  Virión 
CA  p24  Cápside  Virión 
NC  p7  Nucleocápside, unión a ARN  Virión 
  p6  Unión a Vpr  Virión 
Pol (Pr160)
PR  p15  Corte de Gag/Pol y maduración  Virión 
RT  p66,p51  Retrotranscripción y actividad ARNsa H (p15)  Virión 
IN  p31  Integración del Provirus  Virión 
Glicoproteína de envoltura, unión a CD4 y
Env (gp160) gp120 + gp41 Membrana externa del virión 
correceptores 
Proteínas accesorias
Tat  p16/p14  Transactivador transcripcional  Núcleo y nucleolo 
Rev  p19  Transporte de ARN fuera del núcleo  Vehículo nucleolo-citoplasma 
Vif  p23  Infectividad (anula A3G)  Citoplasma y virión 
Vpr  p10-15  Transporte nuclear, estabiliza ciclo celular en G2/M  Virión 
Liberación de partículas en la membrana (anula
Vpu  p16  Membrana 
Tetherin) 
 VIH-1 VIH-2
Epidemiología Causante de la pandemia mundial del Endémico de África occidental (Senegal).
SIDA.
Infectividad y
Elevada Elevada
virulencia

Tres grupos: M, N y O.
Clasificación Ocho subtipos: A-H.
Subtipos del grupo M: A-K.

SIVcpz de chimpancé SIVsm de mangabeyes ahumados

Origen
Grupo M del VIH-1 alrededor de 1930

vpu vpx

Estructura
DESINFECCIÓN E INACTIVACIÓN
Queda inactivo al ser
tratado con
● Blanqueadores caseros al 10%
(cloro)
● etanol al 50%.
En la aguja ya sea en
sangre coagulada o sin
coagular para
inactivarlo se necesita
exponer al blanqueador
concentrado durante por
lo menos 30 segundos.

● Isopropanol al 35%.
● Nonidet P40 al 1%.
● Lysol al 0.5%. ph <1- y en ph >13
● Paraformaldeido al 0,5%
● Peróxido de hidrógeno al 0.3%
Evolución típica de la infeccion por
VIH
 Infección primaria
Lapso de 4 a 11 días entre infección de mucosa y viremia inicial Detectable por 8-12 sem
Se disemina en el organismo

Queda latente en órganos linfoides

Disminuye el número de linfocitos T CD4 circulantes

Disminuye el número de virus en plasma

1 a 3 meses: respuesta inmunitaria al Aumentan los niveles de linfocitos T

VIH CD4

No elimina del todo la infección

En ganglios linfáticos persiste células

con VIH
 Latencia clínica
Dura hasta 10 años

Intensa y constante replicación viral

Al día: se produce y destruye 10 mil millones de partículas de VIH

Vida media en el plasma: 6 h

Ciclo vital: 2.6 días

Linfocitos T CD4 con altas tasas de Células blanco de las que depende su replicación
recambio

Semivida de linfocitos infectados: 1.6

días
 Fase sintomática
Infecciones oportunistas o neoplasias
Detecta: plasma con cargas virales elevadas
Fase tardía: cepas de VIH son mas virulentas y citopaticas

Cambio del tropismo monocitotrópico o macrofagotrópico, al linfotrópico del VIH-1

Establece una nueva infección

Una única
Inicio: secuencias virales muy homogéneas
variante del VIH
Rápida proliferación y tasa de error de transcriptasa inversa del
VIH: acumulan cuasiespecies del virus

Cada nucleótido del genoma del VIH muta diariamente

 MANIFESTACIONES CLÍNICAS.
● Fatiga.
● Erupciones.
Los signos y síntomas son inespecíficos ● Cefalea
● Náuseas.
● Sudoración nocturna

En el SIDA encontramos una depresión del sistema inmunitario lo que provoca

diversas infecciones oportunistas o neoplasias poco comunes.

Las manifestaciones más graves suelen ser antecedidas de “diarrea y deterioro” que incluye
fatiga, malestar general, pérdida de peso, falta de aire, diarrea crónica
 Carga viral plasmática viremia

Es el número de partículas de VIH en sangre En cada paciente continuamente hay

ciclos de replicación viral y destrucción
tienen importancia con respecto al valor
celular
pronóstico.

● Los niveles reflejan el número total de células

infectadas en forma productiva y su tamaño cada 6 meses
promedio en el momento de la descarga o eclosión.

● Constituye un elemento decisivo para evaluar la Se puede predecir el riesgo

eficacia de los tratamientos antirretrovirales. de desarrollar sida más en
● El número de linfocitos CD4 predice el riesgo a corto varones que en mujeres.
plazo de desarrollar enfermedades oportunistas
 SIDA en niños El niño adquiere la enfermedad de
su madre infectada

Suelen tener síntomas clínicos a los dos años de vida y

sin tratamientos suelen morir dos años más tarde.
Replicación viral en los lactantes
Manifestaciones clínicas. Los niveles de la carga de ARN viral son
● Neumonitis intersticial linfoide pequeños en el nacimiento, lo que indica que el
● Neumonía contagio se dio en una fecha muy cercana
● Candidosis oral severa.
● Encefalopatía Estos niveles aumentan en los 2 meses de vida y
● Síndrome de desgaste luego disminuye hasta los 24 meses de edad,
● Linfadenopatía generalizada (sistema inmunitario inmaduro frenó la infección).
● Sepsis bacteriana
● Hepatoesplenomegalia
El 5% o menos presentan infecciones transitorias
● Diarrea
● Retraso del crecimiento. por VIH, lo cual sugiere que algunos de ellos
pueden eliminar el virus.
 Enfermedad del sistema nervioso
Disfunción del sistema nervioso SÍNDROMES Manifestación tardía:
● Encefalitis subaguda
entre el 40% al 90% 25% a 65% surge el
● Mielopatía vacuolar
● Meningitis aséptica síndrome neurológico
● Neuropatía más común que es el
periférica. complejo de
demencia por sida
Cáncer
Los cánceres como:
● Virus como cofactor e incluyen el linfoma no- hodking
● El sarcoma de Kaposi.
● El cáncer cervicouterino (causado por el virus del papiloma).
● Los de la zona anogenital ( por infecciones coexistentes por VPH)
● Mayoría de cáncer de células B (linfoma de Burkitt)
 Infecciones por oportunistas
Las causas más frecuentes de mortalidad y morbilidad
en la fase tardía de VIH

Protozoarios: toxoplasma gondii, isospora belli, cryptosporidium spp

Hongos: candida albicans, cryptococcus neoformans, coccidioides immitis,

histoplasma capsulatum, pneumocytis jiroveci.

Bacteria: mycobacterium avium-intracellulare, m.tuberculosis, listeria

monocytogenes, Nocardia asteroides, salmonella spp y streptococus spp.

Virus: citomegalovirus, virus del herpes simple, virus de varicela-zóster,

adenovirus, virus JC, virus de hepatitis B y C

Otras infecciones frecuentes: herpesvirus y retinitis por citomegalovirus

Diagnóstico de laboratorio

Aislamiento del virus

Determinación serologica
de anticuerpos contra el
virus
Detección de ácidos
nucleicos o antígenos del
virus
 Aislamiento del virus
Son pruebas lentas, laboriosas y se circunscriben a estudios de investigación

Las técnicas de amplificación por PCR se utilizan más a menudo para identificar el virus en muestras clínicas.

Número de linfocitos infectados varia según la

Linfocitos de sangre periférica
etapa
Cultivado
En pacientes con Sida hay títulos mas elevados del virus en plasma que en asintomáticos

Cultivar la muestra problema con células mononucleares no infectadas de sangre periférica,

Técnica más
estimuladas por un mitógeno
sensible
Proliferación menor en comparación con cepas adpatadas en laboratorio

La proliferación se detecta al estudiar los líquidos sobrenadantes del cultivo después de 7 a 14 días,

Aislamientos Para detectar la actividad de la transcriptasa inversa o los antígenos específicos del virus.
primarios
En sujetos con seropositividad se puede cultivar a partir de sus células sanguíneas.
La magnitud de la viremia al
parecer tiene una mejor
correlación con la etapa clínica de
la infección que la misma
presencia de anticuerpos
 Determinación serológica de
anticuerpos contra el virus
Sensibilidad y especificidad mayores de 98%.
Técnica de
enzimoinmunoan
álisis Poblaciones con péqueña prevalencia (donantes de sangre) con resultado reactivo en
suero se repite la prueba para confirmarlo.

Si es reactiva se realiza prueba confirmatoria (Western Blot)

Detectan anticuerpos dirigidos contra p24 del centro de la partícula

proteínas con pesos moleculares conocidos Las glucoproteínas gp41, gp120 o gp160 de la
cubierta
Western Blot
El resultado puede ser inespecífico o negativo en las etapas tempranas de la infección
la detección del RNA viral es una forma alterna para confirmar el diagnóstico
La infección por VIH-2 puede tener un resultado inespecífico por la prueba para VIH-1 y requiere un
Western blot por separado para el VIH-2 para confirmación
 Los patrones de respuestas contra antígenos específicos del virus cambian con el transcurso del tiempo y
la evolución clínica hasta llegar al SIDA

Se conserva el nivel de anticuerpos contra las glucoproteínas de la cubierta (gp41, gp120, gp160), pero
disminuyen las dirigidas contra las proteínas Gag (p17, p24, p55).

La disminución de los anticuerpos contra

p24 es un signo que anticipa el inicio de
las manifestaciones clínicas y otros
marcadores inmunitarios de progresión de
la enfermedad.
 Se realizan en muestras de sangre o fluido oral
Reacciones de aglutinación de partículas
Se basan en principios como
Métodos
Inmunodot.
sencillos y
rápidos Detectan anticuerpos contra el VIH en muestras de sangre completas en las que no se
necesita preparación

Se pueden realizar fuera de los laboratorios comunes.

● El tiempo promedio para la seroconversión después de la infección por el VIH es de tres a cuatro
semanas.
● Casi todas las personas mostrarán anticuerpos detectables en un plazo de seis a 12 semanas después de
la infección y todos serán seropositivos en 6 meses.
● Muy pocas veces la infección por el VIH dura más de seis meses sin que surja una respuesta detectable
de anticuerpos.
 Detección de ácidos nucleicos o
antígenos del virus
Método de RT-PCR Utiliza enzimas para amplificar el RNA del VIH
Técnicas de
Amplifica RNA del virus
amplificación Técnica de bDNA
Por métodos de hibridación seriada de oligonucleótidos
PCR de DNA Son muy sensibles
La heterogeneidad de las secuencias del VIH puede disminuir la sensibilidad de estas técnicas.

Marcadores de predicción
importantes
Diagnóstico temprano en
hijos de madres
infectadas
Niveles de RNA Señalan la evolución de la enfermedad y son útiles para vigilar
del VIH la eficacia de las terapias antirretrovirales
Técnicas de detección del RNA del VIH-1 plasmático
PCR para DNA sanguíneo para detectar DNA (proviral) integrado a los cromosomas
La presencia de anticuerpos de la madre hace que no sean útiles los estudios serológicos.
Se puede usar muestras de Para el monitoreo viral en entornos
Obtenidas en el
sangre seca en vez de plasma
momento con escasos recursos

Detectan por medio de EIA en plasma, niveles bajos del antígeno p24 del VIH-1
circulante
Poco después de la La proteína p24 forma complejos con
infección El antígeno no se detecta después de los anticuerpos contra ella
que aparecen los anticuerpos
Pero a veces reaparece en la etapa tardía y
conlleva un mal pronóstico
La detección de anticuerpos contra el VIH
Incluye
La detección de anticuerpos contra del antígeno p24
Pruebas de 4°
generación Detectan la infección en etapa temprana cuando la serología no lo detecta

Importancia ya que en esta eapa hay altos índices de viremia transmisibles

 REFERENCIAS
García, F., Álvarez, M., Bernal, C., Chueca, N., & Guillot, V. (2011). Diagnóstico de laboratorio de la infección por
el VIH, del tropismo viral y de las resistencias a los antirretrovirales. Enfermedades Infecciosas y
Microbiología Clínica. https://doi.org/10.1016/j.eimc.2010.12.006

Jawetz, E., Melnick, J.L. y Adelberg, E.A. (2020). Jawetz, Melnick & Adelberg Microbiología Médica. McGraw-Hill.

Justiz Vaillant, A. A., & Gulick, P. G. (2022). HIV Disease Current Practice. En StatPearls. StatPearls Publishing.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK534860/

Organización Mundial de la Salud. (2022). Infección por el VIH.

https://www.who.int/es/news-room/fact-sheets/detail/hiv-aids