RETROVIRUS: HIV y HTLV

MSc. Q.F. Cristhopher Cruz Malpica

U n i v e rs i d a d Pe r u a n a C ay eta n o H e re d i a
E s c u e l a D e Te c n o l o g í a M é d i c a
L i m a - Pe r ú
Generalidades
Propiedades y características
generales de los Retrovirus
Virus Animales
Inversión del dogma central de la biología
molecular
Retrovirus exógenos: HIV, HTLV
Retrovirus endógenos: Los retrovirus endógenos
humanos (HERVs)

Human Endogenous Retroviruses (HERVs) and Autoimmune

Rheumatic Disease: Is There a Link?. Nicola Tugnet.
doi: 10.2174/1874312901307010013
Estructura típica de un
Retrovirus
Ribonucleoproteína helicoidal dentro de una cápside icosaédrica
rodeada por una envoltura que contiene glucoproteínas y
lípidos. Las glucoproteínas son antígenos específicos para cada
tipo o subgrupo y son codificadas por el gen env.

Genoma diploide, posibilidad de recombinación

Únicos con ARN+ que no sirve como RNA mensajero

Únicos que requieren ARNt para replicar

2 Géneros de Importancia Médica

Simples - Complejos
Estructura genómica de retrovirus
representativos
• Retrovirus humanos (Deltarretrovirus y
Lentivirus) contienen otros genes después del
gen env.
• Uno es un gen regulador transactivador (tax o
tat) que codifica una proteína no estructural que
altera la eficacia de la transcripción o traducción
de otros genes virales.
• Los lentivirus, incluido el VIH, poseen un genoma
más complejo y contienen varios genes
accesorios adicionales
Relación Filogenética Usando el Gen Pol
VIH
Miembros del género Lentivirus
Los Lentivirus Humanos tienen su origen en primates no humanos
•Transferencia de los virus de monos a
monos mangabey
(SIVsmm) los humanos.
•Los Tiznados mangabey residen donde
la infección por VIH-2 es más
prevalente.
•Evidencia de otras transferencias
aisladas de simios a monos (cepas
genéticamente distantes de VIH-1)
(O = Outgroup, fuera del grupo)

chimpancés
(SIVcpz)
Transmisión primate - personas en múltiples ocasiones
• El VIH humano producto del cruzamiento de
virus de simios en zonas rurales de África, tal
vez por contacto directo de personas con
sangre infectada de primates.
• “VIH-1 y VIH-2” de primates fueron
transmitidos a personas en múltiples
ocasiones distintas (7 como mínimo).
• Los análisis de evolución de secuencias sitúan
por 1930 la introducción de VIScpz, a las
personas, lo cual dio origen al VIH-1 del
grupo M. Es probable que se produjeran
repetidas veces a través de los decenios
• Cambios sociales, económicos y conductuales
particulares permitieron la expansión, el
establecimiento definitivo en seres humanos
en proporciones epidémicas.
Virus de la
Inmunodeficiencia
Humana (VIH)
Familia: Retroviridae.
Genero: Lentivirus
Miembros: VIH-1, VIH-2.
Tamaño: 80 a 130nm.
Simetría de la cápside: Icosaédrica.
Envoltura: Presente
Genoma: Linear diploide sentido + ssARN de
10Kb.
Lugar de replicación: Núcleo.
Lugar de ensamblaje: Citoplasma.
Características: Evolución lenta.
Enfermedades: SIDA, Encefalitis, Neumonía.
 VIH-2
VIH-2 permanece bastante restringido al África Occidental.

•No hay pandemia de VIH-2.

•Restringida al África Occidental (Camerún, Costa de Marfil, y Senegal).

•El VIH-2 es menos patogénico que el VIH-1.

•Las personas infectadas con el VIH-2 permanecen mucho más tiempo asintomáticas
antes de desarrollar la enfermedad.

•Hay evidencia de que las personas infectadas con el VIH-2 pueden tener un riesgo
menor para adquirir el VIH-1. Este hallazgo tiene importantes implicaciones para el
diseño de las vacunas contra el VIH-1, posiblemente basadas en cepas atenuadas ó
debilitadas del VIH-2. http://www.biologia.edu.ar/virologia/lentiviruspatogenesis.htm
Genoma del VIH-1

El VIH-2 y VIS no tienen el gen vpu pero contienen el gen vpx

 El genóma del VIH-1 se divide en tres partes
Genes estructurales
Gag.- CA, MA, NC.
Pol.- RT, RNasa H, PR, IN.
Env.- SU, TM
Genes de transactivación
(esenciales para la replicación in Vitro)
Tat
Rev
Genes accesorios
(no esenciales para la replicación in Vitro)
Nef
Vpu
Vif
Vpr
Ciclo de Replicación Viral
https://www.youtube.com/watch?v=r8j-AoZlBzs

Células blanco:
Linfocitos T CD4
Monocitos
Macrófagos
Cél de Langherans
Cél dendríticas
Mecanismo de Fusión
2 Fenotipos Biológicos
 Receptores y Fenotipos Biológicos

a) Cepas que se aíslan de pacientes y solo utilizan CCR5 ( macrófago trópicos )

b) Cepas que se aíslan de pacientes que utilizan CCR5 y CXCR4 (tropismo dual o pantrópico)
c) Cepas adaptadas en cultivo de TCL solo utilizan CXCR4 (TCL trópicas)
TODAS PUEDEN REPLICAR EN CULTIVOS PRIMARIOS DE LT.

TROPISMO PATOGENICIDAD
 Polimorfismo Poblacional
Etapa temprana de la infección: Etapa tardía de la infección:
• Macrófago trópico • tropismo por células T
• No formadores de sincitios • Formadoras de sincitios
• Replicación lenta • Alto título viral

• La proteína gp120 es la más variable

•Secuencia de aa en un paciente varía entre 1-6
• Glicosilación enmascara sitios conservados
• Co-infección puede dar lugar a recombinación
El primer transcripto es convertido en varios mARN
Genes Transactivadores Incrementan la Expresión de Proteínas Virales

REV se une al Revresponsive RNA element (RRE)

TAT Se une a una estructura en horquilla
Favorece proteínas estructurales exportando
en la región LTR del ARN naciente ARN sin splicing
 Genes Accesorios
NEF: Importante para la replicación in vivo

VPU: Desprendimiento de los viriones en células infectadas, degradación de CD4 en RE

VIF: Incremento en infectividad y protección del genoma viral (inhibición de enzimas APOBEC (edición de
mARN) y AID)
VPR Facilita la importación del complejo de reintegración (Vpr-matriz-integrasa) al núcleo en Mo. Secuestra
activadores proinflamatorios (inmunosupresivo). Induce G2
 Variación Viral
alta tasa de error 1:2,000-10,000
El HIV que infecta a un paciente es muy distinto del que está presente
en el momento de SIDA

Evolución a cuasiespecies
Infección por
Heterogeneidad de variantes
pocas partículas
genéticamente relacionadas

Alta producción de virus y alta tasa de mutación y recombinación

Mutantes con ventaja selectiva
1) Potencial replicativo
2) Mutantes de escape a la respuesta inmune
3) Variantes resistentes a las drogas antivirales
Espectro de Mutantes
Grupos y Genotipos de HIV-1

• África todos los subtipos y

recombinantes
• EEUU subtipo B
• Los subtipos no se
corresponden con
inmunotipos (reactividad
cruzada a nivel de Ac y de
CTL.
Formas Circulantes Recombinantes (CRF)
Distribución Global de Genotipos de HIV-1
 Evolución de la
infección por VIH
Las etapas:
• Infección primaria
• Diseminación del virus a órganos linfoides
• Fase de latencia clínica
• Alta expresión de VIH
• Enfermedad clínica y la muerte (no tratados suelen morir
a dos años de haber comenzado los síntomas clínicos)
Se producen y destruyen cada día diez mil millones de
virus. La semivida en el plasma es de unas 6 h y el ciclo
vital del virus es de 2.6 días
La semivida de los linfocitos una vez infectados es de 1.6
días
Respuesta Inmune
•Rta CD4 anti HIV-1: se mide por
estimulación linfocitaria.
Se detecta un aumento durante la fase
aguda y luego decae.
•Rta CD8:  1-4 meses coincidente con la 
pico virus (viremia).
Se induce contra múltiples epitopes (gag, pol,
nef) según haplotipo HLA y secuencia viral.
Rol ---  pico viral y mantener el valor de
set point durante la latencia.
CTL, LT CD4+ h y LB controlan la
replicación viral.
 LT CD8+ y baja carga viral y lenta progresión
al SIDA.
Etapa final de la enfermedad ---    de
niveles de CD8+.
 Respuesta Inmune humoral
Respuesta inmune humoral: Ac anti p24 (CA), gp
120, gp41, gp160.
NK
•Anticuerpos neutralizantes: bajos niveles
(probablemente por alta glicosilación de la SU y
estructura intermediaria de fusión).
- Especificidad de Ac neutralizantes: V3 loop
de gp120 y múltiples epitopes de SU y TM.
Mono
• Anticuerpos interferentes
• Anticuerpos aumentadores de la infectividad
(epítopes de SU y TM)
 Infectividad complejos Ag-Ac in vivo -----
receptor Fc
Principles of Virology S.J Flint
https://www.huesped.org.ar/informacion/vih/que-es-y-como-se-detecta/
Riesgo de progresión a SIDA
Transmisión
Alrededor de 40 millones de infectados con VIH
Datos Epidemiológicos en Perú
Pruebas rápidas
Generaciones de ELISAs
 Prueba Confirmatoria Western Blot
Interpretación
1, VIH + suero (control positivo )
2, VIH - suero (control negativo )
A, Paciente A
B, Paciente B
C, Paciente C

FDA: por lo menos de tres bandas: p24, p31 y gp41 u otra glucoproteína
ARC (American Red Cross): al menos 3 bandas de los 3 genes estructurales
CDC: Al menos dos bandas: p24, gp41 y gp160/120
CRSS (The Consortium for Retrovirus Serology Standardization)
Al menos una banda del core (gag/pol) y otra de envoltura (env)
OMS: Al menos dos bandas de envoltura
Aplicación de técnicas moleculares en la
infección por HIV
 Optimismo en la lucha contra el VIH:
Prevención, diagnóstico y tratamiento
Si queremos acabar con el SIDA el objetivo para los próximos años se resume en
90-90-90:

• conseguir que el 90% de las personas que viven con el VIH conozcan su estado
serológico,
• que el 90% de las personas seropositivas tengan acceso al tratamiento,
• que el 90% que tengan acceso al tratamiento logren una represión viral
efectiva.

mejorar el acceso al diagnóstico, a los tratamientos y al

seguimiento de los enfermos

CERO discriminación
 Estructura del HTLV
Blanco principal: Linfocitos T CD4 h, CD8, B
Genes estructurales gag, pol y env
Genes reguladores tax y rex y LTR
La proteína tax regula la transcripción viral
◦ Inducen la transcripción de genes celulares para interleuquinas
(IL-1, IL-2) y para receptores de células T (CD 25)
◦ Regula negativamente el gen de la β-polimerasa (enzima
reparadora de ADN)
◦ inactivar la función del gen p53 (gen supresor de tumores)
factores que influirían en la patogénesis de ATLL.
◦ Gen tax: transforma las células T inhibiendo la apoptosis y
promueve la proliferación celular, desregula la expresión celular
de los genes
Genomas del HTLV
Origin of HTLV-1 and HTLV-2
in the Americas

Galvão-Castro B, Alcântara LCJ, Grassi MFR, Mota-Miranda ACA, Queiroz ATL, Rego FFA, et al. Epidemiologia e origem do HTLV-1 em
Salvador Estado da Bahia: a cidade com a mais elevada prevalência desta infecção no Brasil. Gaz Med Bahia. 2009;79:3-10.
Distribución Mundial del HTLV-1
Grupos y Subgrupos de HTLV-1
Variabilidad Genética
HTLV muestran un alto grado de conservación
genética
Aislados de Japón, india, América y África
tienen un 97 % de homología
Las variantes mas divergentes muestran un
92% de homología comparado con el
prototipo japonés y melanesia
 Replicación viral
Las células T infectadas no liberan virus
y la carga viral es casi indetectable
◦ Sinapsis viral: es la unión de una célula infectada
con una sana, utilizando proteínas virales (Tax, Gag) y
celulares (LFA1 e ICAM)
◦ En estadio inicial : propagación célula a
célula (multiplicación policlonal)
◦ En estadio tardío: división celular
(multiplicación clonal)
Estabilidad del genoma
Mecanismo mantenido por Tax (HBZ?)
Infección no citopática
Curso natural de la infección por HTLV-1
Transmisión
La transmisión de HTLV-1 ocurre a través de tres
vías:
◦ sexual
◦ madre – hijo
◦ transfusión de sangre
◦ Drogas intravenosas

La concentración de formas libres del virus en

plasma es sumamente baja
Relación de duración de
lactancia vs
seroprevalencia en niños
 Enfermedades Asociadas con HTLV-1

En la mayoría de casos produce una infección crónica asintomática (90%)

10% restante desarrolla enfermedades asociadas
◦ Linfoma/leucemia de células T del adulto (ATLL)
◦ La mielopatía paraparesia espástica tropical (PET)
◦ Oportunistas: estrongiloidiasis, sarna, tuberculosis y dermatitis infectiva

Aspectos de la respuesta inmune y genética del huésped serían

determinantes en que se desarrollen o no las enfermedades asociadas a
HTLV-1

En América latina 1 de 10 linfomas no Hodgkin están relacionados a HTLV-1

La Leucemia o Linfoma a células T del adulto (ATLL)
Solo desarrollan algunas personas infectadas por HTLV-1
El virus puede integrar su propio genoma viral (ADN) en el ADN de la
célula linfocitos T CD4+.
Los linfocitos T CD4+ infectados pueden multiplicarse
descontroladamente. Esto puede ocurrir en la médula ósea, nódulos
(ganglios) linfáticos, piel y en la sangre.

Las células ATLL remplazan al tejido sano y alteran su funcionamiento

normal. La ATLL puede progresar muy lenta o muy rápidamente.
Se puede medir la cantidad de virus (carga proviral: CPV) por qPCR.
Extracción de sangre, separar los linfocitos, el ADN y medir el virus.
 4 diferentes tipos de ATLL
•ATLL Aguda: Desarrollan la patología rápidamente y la vida está en riesgo si no se inicia un tratamiento.
•Rash en la piel, grandes nódulos en el cuello, ingle y axilas, que pueden frecuentemente infectarse. Los
pacientes están cansados, pierden peso y pueden tener transpiración nocturna. Estos se llaman síntomas B.
En el examen clínico se puede encontrar agrandamiento del hígado y bazo. Los análisis de sangre: aumento
de leucocitos, células atípicas llamadas “en flor” y altos niveles de calcio y LDH. Los estudios por imágenes
pueden mostrar lesiones en los huesos.
•ATLL Linfomatosa: se caracteriza por grandes nódulos (llamados nódulos linfáticos) en cualquier parte del
cuerpo, por ejemplo, cuello, axila, estómago, ingle. Síntomas B. Muy frecuentemente, el análisis de sangre es
normal y se encuentran pocas o ninguna célula “en flor”. Por alguna razón desconocida, casi todos los
linfocitos cancerosos permanecen en los nódulos linfáticos (ganglios).
•ATTL Crónica: los síntomas más comunes son rash en piel y síntomas B. El hígado, bazo y nódulos linfáticos
pueden estar aumentados. Este tipo de ATLL empeora de manera mucho más lenta que la aguda o la
linfomatosa. Leucocitos puede estar aumentado y se pueden ver células atípicas pero el nivel de calcio es
normal en sangre. Hay una forma favorable y otra desfavorable.
•ATLL Latente: esta enfermedad se presenta de manera muy leve y solo se encuentra en un análisis de sangre
de rutina donde se ven células atípicas “en flor” pero la cantidad de células es normal. Puede haber alguna
lesión de piel pero los nódulos linfáticos, hígado y bazo son normales.
El Doctor pedirá muchos análisis como: Análisis de sangre para conocer cantidad de células, tipo
de linfocitos T (CD4/CD25/DR), clonalidad de células T, presencia de anticuerpos anti-HTLV-1,
carga proviral de HTLV-1.
•Biopsia de nódulos, médula ósea y/o piel
•Estudios de imagen (como una Tomografía) de abdomen y tórax para buscar nódulos
agrandados y ver tamaño del hígado y bazo.
•Punción lumbar para estudiar si hay afectación del cerebro.
Afortunadamente, sólo 3 a 5 de cada 100 personas infectadas En consecuencia, la mayoría de las personas que
por HTLV-1 pueden desarrollar una ATLL y generalmente hay desarrollan una ATLL, han sido infectadas de
antecedente de enfermedades asociada al HTLV-1 en la familia bebés mediante el amamantamiento si bien se
El intervalo entre la infección del HTLV-1 y el inicio de la ATLL es reportaron casos pos-transfusión.
generalmente, mayor a los 40 años (si el contagio no fue por
una transfusión)
 La Mielopatía asociada al HTLV-1/Paraparesia
Espástica Tropical
•Sin anticuerpos contra el HTLV-1, Ud. no puede tener HAM/TSP
•Linfocito T infectados en médula espinal del SNC y causa inflamación,
crónica a nivel dorsal (nervios) permanentemente.
•Rigidez y debilidad en las piernas, dolor en la espalda (lumbar),
dificultad al orinar, constipación y disfunción eréctil. No todos tienen
todos los síntomas y no todos los problemas empiezan al mismo
tiempo.
•Es difícil diagnosticar, los problemas avanzan muy lentamente durante
meses y años. Es importante recordar que la HAM/TSP no afecta a los
brazos o la visión y por lo tanto es muy diferente de otras
enfermedades como el Parkinson o la esclerosis múltiple.
•Todos tienen los anticuerpos contra HTLV-1 y una carga pro viral (CPV)
mensurable, que usualmente es ~14%
•Detectar los anticuerpos contra HTLV-1 en la sangre.
•Medir carga proviral (CPV) del HTLV-1 en sangre y/o LCR.
Evolución de la HAM/TSP

Los pacientes con HAM/TSP se dividen en “Rápidos”,

“Lentos” y “No Progresores”.
El nivel de discapacidad variable.
Algunos presentan alteraciones tan leves que apenas
interfieren con sus vidas.
Sin embargo, la mitad eventualmente pueden llegar a
necesitar usar una silla de ruedas, aunque puede llevar
muchos años antes que esto sea necesario.
Salvo que la persona se haya contagiado por recibir sangre
contaminada a través de una transfusión; entonces la
HAM/TSP puede desarrollarse a los pocos meses o algunos
años después de la misma.
Epidemiología
En el Perú, se estima que 10% de los casos de linfoma no
Hodgkin están asociados con HTLV-1
PET (1-4%) asociada a HTLV-1 con más frecuencia en mujeres.
La edad promedio es de 45 años y más de la mitad de los
pacientes han nacido o vivido en regiones andinas
No todos los cuadros de PET (definidos de acuerdo con los
criterios diagnósticos propuestos por la Organización Mundial
de la Salud) se asocian a HTLV-1, en el Perú entre 55 a 65% de
estos casos
En un estudio peruano, 86% de los pacientes con
hiperinfestación por S. stercoralis tuvieron infección por HTLV-1
 Diagnóstico
Hay diferentes tipos de ensayos para estudiar al HTLV:
1) Test de tamizaje: ELISA o CMIA (quimioluminiscencia)
2) Test confirmatorio serológico: INNOLIA o WB
3) Test confirmatorio molecular: PCR

CPV (carga proviral) de 1%, significa que 1 de 100 CMSPs tienen

una copia del ADN del HTLV incorporada en el ADN de la célula.
La CPV varía de persona a persona y en el tiempo.
Diagnóstico por Western Blot

•OMS, una muestra es positiva si presenta alguna banda

específica correspondiente a las proteínas de los genes
env, gp46 o gp62/68, y alguna de las bandas de las
proteínas específicas de los genes gag, p19, p24 o p53.
•Red Europea de Investigación es positiva si presenta
bandas correspondientes a p19 y p24 del gen gag, como
así también las bandas correspondientes a las proteínas
de la envoltura viral rgp21 y rgp46-I
Enzimas de
Restricción
Resumen
La infección por HTLV-1 es endémica en el Perú
transfusiones de sangre, lactancia materna y relaciones sexuales
La infección por HTLV-1 cursa asintomática en la mayoría de casos.
Enfermedades linfoproliferativas (ATLL), enfermedades inflamatorias
(PET) e infecciones oportunistas (estrongiloidiasis, sarna noruega).
Realizar la prueba diagnóstica de HTLV-1 e insistir en la evaluación de
los familiares directos independientemente de la presencia de
síntomas.
Despistaje en donantes de sangre, uso de condón y la suspensión de
lactancia materna
El diagnostico temprano de infección por VIH en hijos de madres infectadas se
practica por medio de técnicas de detección del RNA del VIH-1 plasmático

La presencia de anticuerpos de la madre hace que no sean útiles los estudios

serológicos

Marcadores de predicción importantes son los niveles de RNA del VIH, que señalan la
evolución de la enfermedad y constituyen medios útiles para vigilar la eficacia de las
terapias antivirales

La obtención de la vacuna es difícil, porque el VIH muestra mutación rápida, no se

expresa en todas las células infectadas y no es eliminado del todo por la respuesta
inmunitaria del hospedador después de infección primaria
Comparación entre HIV-1 y HTLV-1/2
Células blanco
Viremia
Enfermedades asociadas
Diversidad genética
Relación con familiares
Formas de evasión a la respuesta inmunológica
Kits diagnósticos usados en Perú
Muchas Gracias
https://www.elsevier.es/es-revista-enfermedades-infecciosas-
microbiologia-clinica-28-pdf-S0213005X11000073

Human T-cell lymphotropic virus type 1 and its oncogenesis

•Lan-lan Zhang, Jing-yun Wei, Long Wang, Shi-le Huang & Ji-long Chen

HTLV-1-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis

•Charles R. M. Bangham, Abelardo Araujo, Yoshihisa Yamano & Graham P. Taylor