Universidad Técnica de Ambato

Facultad de Ciencia e Ingeniería en Alimentos

Análisis Instrumental

INTEGRANTES:

 Caspi Thalia
 Peñafiel Vanessa
 Romero Edgar
 Solís Vanessa
 Toapanta Elisa
 CROMATOGRAFÍA
La cromatografía líquida puede llevarse a cabo por cuatro técnicas analíticas:
 C. En papel
 C. En capa fina
 C. en columna
 Análisis cuantitativos

CROMATOGRAFÍA EN
PAPEL
La fase estacionaria se
representa por un papel
filtro y la móvil por un
disolvente
 CROMATOGRAFÍA
EN CAPA FINA

Es un procedimiento rápido
y sencillo para separar
mezclas de sustancias.
Aparatos y materiales
• Cubeta cromatografía
• Placas de cromatografía: preparadas por uno mismo
o ya fabricadas.
• Pipetas de microlitro- Recipiente de vidrio con
pulverizador
• Probeta o matraz Erlenmeyer con tapón 
• Plantilla para TLC o regla
CROMATOGRAFÍA
EN COLUMNA
 Principio de la cromatografía en papel
Papel hacia arriba Papel invertido
Las sustancias problema pueden tener Radial ,separación
diferentes coeficientes de reparto en dos de zonas y sectores
disolventes de inmiscibilidad limitada

Descendente
Ascendente
Fase estacionaria.-permanece fijo en la
superficie del papel (hoja de celulosa).

Fase móvil.-constituido por una mezcla de

disolventes parcialmente miscibles en ella
(disolventes).
 La separación se realiza en función de la afinidad de los solutos con las dos fases

Menos solubles en
agua y mas solubles
Solubles en agua en disolvente
Se mantendrán cerca del Llegaran mas lejos del punto
punto donde se aplico la donde se ubico la muestra
muestra

Rf (Retention factor)

𝑅𝑓 = )
x= Distancia entre el
origen y el centro

S=Distancia medida
desde el origen hasta el
frente
Principio de la cromatografía en capa fina
Fases de la cromatografía
Fase estacionaria
Es solida Los componentes que se
Fase móvil Componente polar desplacen con mayor velocidad
Es liquida Eluyente menor que el componente serán los menos polares
polar

ELUYENTE
Polaridad de los compuestos orgánicos en orden creciente:
hidrocarburos < olefinas < flúor < cloro < nitro < aldehído
aldehído < ester < alcohol < cetonas < aminas < ácidos < Precio No utilizar
amidas Pureza compuestos muy
volátiles
No utilizar
mezclas eluyentes Evitar que cntenga
(reproducibilidad) trazas de metales
(catalizadores)

FACTORES
Reactivos reveladores

Acido Sulfúrico.- reacciona con

los componentes orgánicos
produciendo manchas negras.

YODO.- forma complejos

coloreados en componentes
orgánicos (tonos amarillo-
marron)
Principio de Cromatografía en Columnas
La polaridad del eluyente
afecta las velocidades
relativas con las que los
diferentes componentes de
la mezcla se mueven en la
columna.  Por lo tanto, un
disolvente polar
desplazará las
moléculas,
incluyendo las más
polares, rápidamente
a través de la
Los disolventes polares columna. 
compiten más
eficientemente con las
moléculas polares de una
mezcla por los lugares
polares del adsorbente.

Disolvente muy Disolvente

polar(elusión apolar no
rápida) eluiran

Componentes
Análisis de datos
Cromatografía de papel

 Técnica cualitativa.
 Agua (disolvente).
 Papel filtro (medio
poroso).
Cromatografía en columna

Análisis cualitativo: tiempo

de retención. No se puede
afirmar la presencia de un
componente en una mezcla
pero se puede afirmar la
ausencia.
Análisis cuantitativo:
comparación del área o altura
del pico del componente de
interés con estándares de esta
sustancia con concentración
conocida.
Cromatografía en capa fina

 Adsorbentes (fase
estacionaria): gel de sílice
(SiO2) y alúmina (Al203).
 Elegir un eluyente (fase móvil)
en el que los componentes de la
mezcla presenten un Rf medio
de 0,3-0,5.

Indicador fluorescente
permite visualización de
compuestos activos a luz UV
(254nm).
Aplicaciones
Técnicas cualitativa que se utiliza para los siguientes fines:

Para la separación y purificación de Comprobación de la pureza del

compuestos orgánicos, tanto sólidos como compuesto, comprando la muestra con
líquidos. el producto puro.

Propiedades de un producto terminado como: proteínas, sabores, sustancias que dan el olor
Separación e identificación de colorantes b-caroteno y clorofila

Capa fina Papel

BIBLIOGRAFÍA

Dean, J. A., Merritt, L. L., Settle, F. A., & Willard, H. H. (1990). Métodos
instrumentales de análisis. Compañía Editorial Continental,.ti

Beyer, H., & Wolfgang, W. (2017). Manual de química orgánica. New York: Limusa.

Hernández, L. H., & Pérez, C. G. (2002). Análisis instrumental. Ariel.

Skoog, D. A., Holler, F. J., Nieman, T. A., & Mar¡ a del Carmen (trad.) Mart¡ n G"
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