MÉTODOS

MÉTODOS
GENERALES
GENERALES DE
DE
ANÁLISIS
EQUIPO
EQUIPO44 Patricia G. Sima Naal
Patricia G. Sima Naal
Saúl E. Sonda Gómez
Saúl E. Sonda Gómez
Heyner J. Torres Xiu
Heyner J. Torres Xiu
Andrea Estefanía Uc Quijano
Andrea Estefanía Uc Quijano
Gaspar F. Urtecho Pacheco
Gaspar F. Urtecho Pacheco
César D. Vázquez Arcique
César D. Vázquez Arcique
1
Métodos
Métodos
Electroquímicos
Electroquímicos
La aplicación de técnicas electroquímicas en el análisis de fármacos y productos
farmacéuticos ha aumentado considerablemente en los últimos años. El renovado
interés en las técnicas electroquímicas se puede atribuir en parte a una
instrumentación más sofisticada y al aumento de la comprensión de la técnica en sí.

● Electrónicos
● Iónicos
 POLAROGRAFÍA
Es el método en el cual se utiliza el electrodo de gotas de
mercurio (Hg) como un indicador. La representación gráfica de la
intensidad de corriente en función del potencial aplicado a una
celda, se le denomina polarograma.

En este método se mide la corriente que circula en la celda en

función del potencial del electrodo de trabajo ya que esta
corriente suele ser proporcional a la concentración del
analito.

La instrumentación necesaria requiere de tres electrodos en la

celda sumergidos en una disolución que contiene el analito,
siendo el electrodo de trabajo una gota de mercurio suspendida
del extremo del tubo capilar del vidrio y en cuya superficie (gota
de Hg) el analito puede ser oxidado o reducido
Usos
Determinación de metales pesados en la
gama de ppt, ppb y ppm (As, Bi, Cd, Cr,
Co, Cu, Fe, Pb, Hg, Mo, Ni, Pt, Rh, Sb, Se,
Tl, W, U y Zn; siendo posible diferenciar
entre diferentes estados de oxidación (por Análisis de aniones como
ej. Cr3+ / Cr6+)). cianuros, sulfuros, nitritos
y nitratos
Aplicaciones
Análisis polarográfico orgánicos: se basa en la
oxidación o reducción de los diferentes grupos
funcionales con el electrodo de gotas de mercurio. Son
utilizados, por lo tanto, en la identificación cualitativa de
compuestos determinación de estructuras, etc.

Determinación del contenido de un medicamento “X”

(por ejemplo la acetazolamida)
Procedimiento

1) Preparación del estándar de acetazolamida

Pesar exactamente alrededor de 50 mg de

estándar de acetazolamida y colocar en un
vaso de precipitados de 100 mL. Adicionar
alrededor de 40 mL de agua hirviendo y
calentar en baño de vapor 15 minutos
aproximadamente. Enfriar y transferir a un
matraz volumétrico de 100 mL y diluir con
agua destilada hasta la marca. Pipetear 6 ml
de la solución a un matraz volumétrico de
50 mL, adicionar 4 mL de HCl 1 N, diluir con
agua destilada hasta el aforo y mezclar.
2) Determinar polarográficamente el contenido de acetazolamida en tabletas.

Pese y pulverice finamente 20 tabletas de acetazolamida. Adicionar alrededor de 40 mL de

agua hirviendo y calentar en baño de vapor 15 minutos aproximadamente. Enfriar, transferir y
diluir con agua destilada.

Pipetear 6 ml de líquido claro sobrenadante a un matraz volumétrico de 50 mL, adicionar 4

mL de HCl 1 N, diluir con agua destilada hasta el aforo y mezclar.

Transferir todo el contenido a una celda polarográfica.

Inserte el EGM y el electrodo de referencia de calomel saturado. Registrar el polarograma en

un intervalo de -0.20 volts a -0.75 volts. Determinar la corriente de difusión (id) a -0.70 volts.
3) Determinación de la corriente residual (i
residual) del medio. Con una probeta, colocar
en un vaso de precipitados de 100 mL
alrededor de 46 mL de agua destilada,
adicionar 4 mL de HCl 1 N. Transferir todo el
contenido a una celda polarográfica y
eliminar el oxígeno en la solución
burbujeando con nitrógeno por 10 minutos.
Insertar el EGM y el electrodo de referencia
de calomel saturado. Registrar el
polarograma en un intervalo de-0.20 volts a
-0.75 volts. Determinar la corriente de
difusión (id) a -0.70 volts.
Formula
Formulade
demedicion:
medicion:
2
Métodos
Métodos
Cinéticos
Cinéticos
 Método de análisis cinético.

Se denomina de esta manera a aquellos

métodos en los cuales se mezclan
manualmente los reactivos y luego se
monitorea alguna propiedad del sistema en
función del tiempo.
El uso de catalizadores para acelerar
las reacciones analíticas es factible
con estimaciones tanto de la
velocidad de reacción como del
equilibrio.
Las técnicas automáticas para los métodos cinéticos generalmente se basan en
sistemas abiertos, entre las técnicas populares se encuentran:

Sistema de
flujo detenido Técnica de
adición
continua de
reactivo (ACR)
 Sistema de flujo detenido.
Esta técnica logra una muy buena mezcla de pequeñas cantidades de las

soluciones de los reactivos en un tiempo muy breve.

Dispositivo que mezcla dos soluciones muy rápidamente inyectándose en

una cavidad

Se hacen medidas en función del tiempo, generalmente

espectroscópicas, sobre el material mezclado.
 Esquema básico de un equipo de
flujo detenido.

R:Jeringas reservorios
J: Jeringas de vidrio O: Celda de observación
V: Conjunto de válvulas D: Émbolo de frenado
A: Martillo F: Fuente
C: Compresor B: Monocromador
M: Mezcladora Lo: Haz de luz
Generalmente, estos equipos poseen un
dispositivo espectrofotométrico asociado.
El haz de luz, proveniente de una fuente
(F) es enviado a un monocromador (B).

El haz de luz (Lo) cuya longitud de onda se

elige de acuerdo con el sistema bajo
observación, pasa a través de la celda de
observación (O).
El haz emergente (L) incide en un sistema de detección (P), la señal
resultante es registrada, y, por último, es digitalizada y analizada.
Técnica de adición continua de reactivo (ACR)

Indicada para reacciones rápidas, presenta la ventaja de requerir una

instrumentación considerablemente más simple.

Control de parámetros clínicos y farmacológicos como:

■ Sulfonamidas
■ Vitaminas b12
■ Mercurio en suero y orina.
Las estimaciones cinéticas multicomponente, también están recibiendo
una amplia aceptación en el campo de la investigación farmacéutica.

Nuevos enfoques:

■ El método de par de longitudes de onda cinéticas

■ El método de adición estándar del punto H.
Método de par de longitudes de
onda cinéticas.
El método se basa en la utilización de la diferencia
de velocidades iniciales entre pares de longitudes
de onda de mezclas de concentración conocida.
Método de adición estándar del
punto H.
Método de calibración general que incide en una de las características
básicas de la quimica analitica, la exactitud, mejorando la precisión de los
resultados obtenidos.
Las bases teóricas del método quedan demostradas para la resolucion de
problemas analiticos en las que un interferente, conocido o desconocido,
solapa la señal espectroscópica de interés del analito.
 3
Métodos
Métodos
Electroforéticos
Electroforéticos
 MGA 0312.
ELECTROFORESIS
CAPILAR
Keywords
Keywordsarearegreat
greatfor
for
getting attention
getting attention
Fundamento teórico

La técnica de Electroforesis, realizada ahora

en tubos capilares, mejora la modalidad
clásica de electroforesis hasta el punto de
convertirla en una técnica de separación
comparable a la Cromatografía de Líquidos
de Alta Resolución con diferentes
fundamentos fisicoquímicos, ventajas,
desventajas y procedimientos distintivos
durante la operación del equipo
MODALIDADES DE SEPARACIÓN

Electroforesis Capilar de Zona Cromatografía Electrocinética

(ECZ). Micelar (CEM)

Electroforesis Capilar en Gel, Enfoque Isoeléctrico Capilar (ElC)

(ECG)
 PARTES BÁSICAS DEL EQUIPO

● Capilar.
● Viales o depósitos para soluciones.
● Sistema de introducción de muestra.
● Detector.
● Sistema de enfriamiento
● Electrodos
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Consiste en llenar el capilar con el electrolito soporte, introducir la
muestra, ya sea por presión o por la aplicación de un pequeño voltaje,
sustituyendo un vial con electrolito soporte por un vial con muestra
durante este proceso.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Después se aplica una cierta

cantidad de potencial (o de
corriente) para realizar la
separación
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Las especies iónicas en la muestra

migran con dirección y velocidad
determinadas por su carga y masa.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Eventualmente pasan por un detector y la señal obtenida entonces se conoce como
electroferograma
 4
Análisis
Análisis de
de
Inyección
Inyección de
de
Flujo
Flujo
La base del análisis de inyección
de flujo (FIA) es la inyección de
una muestra líquida en una
corriente portadora ininterrumpida,
no segmentada y en movimiento
de un líquido adecuado. La
muestra inyectada forma una zona,
que luego se transporta hacia un
detector.

● Cambios en la Absorbancia
● Potencial del electrodo
● Otros.
Antecedentes en el Análisis por Flujo
Segmentado (SFA)

Análisis por Inyección en flujo

Flujo NO segmentado
Muestra inyectada
Detección sin equilibrio físico o
químico
 MOVIMIENTO DE FLUIDOS

La existencia de un régimen de flujo

laminar proporciona importantes ventajas
Movimiento ordenado, estratificado, suave al FIA:

a) Zona de muestra bien definida

b) Caudales reducidos
c) Alta frecuencia de muestreo

Movimiento caótico, desordenado con

remolinos

Número de Reynolds: Su valor indica si el flujo sigue un modelo laminar o turbulento

 ● El bolo de muestra inyectado no
alcanza el equilibrio químico ni
físico
● El bolo se diluye en la
disolución portadora o en el
reactivo

Dispersión del bolo

● El transporte por convección

desarrollado en condiciones de
flujo laminar
● El transporte por difusión
debido a la formación de
gradientes de concentración.
 Coeficiente de dispersión Ruzicka

Dispersión global del sistema:

● Dispersión originada por el

Co: Concentración de Define el grado de volumen de muestra como
dilución que ha sufrido por aspectos geométricos
la muestra de antes
una muestra en
del sistema de inyección
diferentes momentos del
C: Concentración de la transporte. ● Dispersión por la geometría
muestra después del reactor y el caudal
establecido
● Dilución provocada por la
geometría de la celda de
flujo.

D = Co / C
Alteraciones por Reacción Química

● Medición de la propiedad del producto de la reacción que se produce

en el flujo.

● Medición de la propiedad de uno de los componentes de la reacción

que desaparece en el flujo con el tiempo
La tendencia de las metodologías por análisis por inyección en flujo es disminuir los pasos de
pretratamiento de muestras y miniaturizar las metodologías de forma automatizada para que
los errores de manipulación sean menores y aumente la precisión de los resultados, ya que
es posible llevar a cabo varias determinaciones de una misma muestra en un tiempo menor
de análisis lo que conlleva a una gran disminución de reactivos y por lo tanto de desechos,
claves para mejorar el control de calidad de las mediciones analíticas.
 Bibliografía
Secretaría de Salud, Comisión permanente de la Farmacopea de
los Estados Unidos Mexicanos. Farmacopea de los Estados Unidos
Mexicanos (FEUM) 10 ed. México; 2011.

Mario Chopin Doroteo*.Principios básicos de electroforesis capilar:

técnica analítica de separación de analitos. Tecnología de la Salud.
Investigación en discapacidad. Vol. 1, Núm. 2 Septiembre-
Diciembre 2012 pp 86-89

http://sedici.unlp.edu.ar/. (s.f.). http://sedici.unlp.edu.ar/. Obtenido

de http://sedici.unlp.edu.ar/:
http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/2215/8_-
_Estudios_complementarios.pdf?
sequence=11&isAllowed=y#:~:text=Los%20aparatos%20de
%20flujo%20detenido,medida%20que%20los%20fluidos
%20entran.

Verdú-Andrés, J. (s.f.). Dialnet. Obtenido de

https://dialnet.unirioja.es/:
https://dialnet.unirioja.es/servlet/tesis?
codigo=95733#:~:text=LAS%20BASES%20TEORICAS%20DEL