PRE-INFORME ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA:

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIERRO EN UN ALIMENTO

POR ADICIÓN DE ESTÁNDARES. 
 

Oswaldo Olarte Muñoz

Juan Camilo Gutiérrez Casso

Saira Alejandra Diaz Leal
Laura Katherine Bermudez Buitrago
Mayo 2023.

Universidad Nacional de Colombia

Facultad de Ingeniería y Arquitectura
Laboratorio de Química Analítica 
 Tabla de contenido

1. Objetivos

2. Marco teórico 

3. Reactivos

4. Preparación de soluciones

5. Materiales

6. Procedimiento

7. Tabla de datos

8. Referencias

 
 ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIÓN ATÓMICA

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA DE HIERRO EN UN ALIMENTO

POR ADICIÓN DE ESTÁNDARES.

  

1. OBJETIVOS   

  

 Familiarizar al estudiante con la técnica de espectroscopia por

absorción atómica para el análisis de metales   

 Determinar la cantidad hierro presente en un alimento aplicando la

calibración por adición de estándares.   

  

2. MARCO TEORICO  

La espectroscopía atómica se basa en la absorción, emisión o fluorescencia por

átomos o iones elementales. Hay dos regiones del espectro que dan información

atómica, así: la ultravioleta visible y la de rayos X.   

La absorción atómica comprende el estudio de absorción de energía radiante

(generalmente en las regiones ultravioletas y visible) por átomos neutros en

estado gaseoso.   

El elemento que se determina debe ser reducido al estado elemental, vaporizado e

introducido en un haz de radiación procedente de la fuente. Este proceso es

conocido como atomización, La muestra puede ser llevada a estos estados

electrónicos de excitación por uno de dos métodos absorción de energía térmica

por llama o absorción de energía radiante por una fuente externa por radiación. En

la primera conocida como Espectrofotometría Atómica de Llama, la energía de

la llama también suministra energía para llevar los átomos libres en estado basal

al estado de excitación y así obtener los datos analíticos   

  

ENERGIA + ENERGIA 

    Estado estable      

Estado Excitado 

  

El átomo en estado basal" absorbe energía luminosa a una longitud de onda

específica y llega al "estado excitado". Como el número de átomos en el paso de

luz aumenta, la cantidad de luz absorbida también aumenta. Midiendo la cantidad

de luz absorbida, se puede hacer una determinación cuantitativa del analito. El uso

de fuentes de luz especiales y la selección cuidadosa de las longitudes de onda

permite la determinación específica de los elementos individuales.   

La cantidad de energía absorbida en la llama a una longitud de onda característica

es proporcional a la concentración del elemento en la muestra en un intervalo de

concentraciones limitadas.  

 
 TRANSMITANCIA:   =   T  =  I/Io  

Figura 13. Proceso de la llama. 

Cuando se cambia la llama por un horno eléctrico el cual amplia la detección en

muchos elementos, la técnica es conocida como EAAS (Espectroscopía de

absorción atómica electrotérmica).   

Los componentes básicos de un espectrofotómetro de absorción atómica se

muestran en la figura 14.   

  

  

Figura 14. Componentes de un espectrofotómetro de absorción atómica   

  

1. Fuentes de radiación o luz 

  

a. Lámparas de cátodo hueco   

  
Es la fuente más común para las medidas de absorción atómica. Este tipo de

lámpara consiste en un ánodo de tungsteno y un cátodo cilíndrico, cerrados

herméticamente en un tubo de vidrio lleno con Neón o Argón a una presión de 1 a

5 Torr. El cátodo está construido con el metal cuyo espectro se desea obtener, o

bien sirve de soporte para una capa de dicho metal. La eficacia de la lámpara

depende de su geometría y del potencial aplicado. Los potenciales elevados y, por

consiguiente, las corrientes altas, originan intensidades de radiación mayores.   

  

b. Lámpara de descarga sin electrodos   

  

Son buenas fuentes de espectros atómicos de línea y por lo general producen

intensidades radiantes que son 1 ó 2 órdenes de magnitud superiores que las

correspondientes de cátodo hueco. Una lámpara de estas características se

construye con un tubo de cuarzo herméticamente cerrado que contiene una

pequeña cantidad del metal (o de su sal) cuyo espectro se desea obtener, y unos

pocos Torr de un gas inerte como el Argón. La lámpara no contiene electrodos y,

en su lugar, para su activación se utiliza un campo intenso de radiofrecuencias o

radiación de microondas.   

  

2. La celda   

En estos equipos está formada por el nebulizador, la cámara de mezcla y la

cabeza del quemador.   

   
  

  

Figura 15. Partes del quemador   

3. El monocromador   

  

Es el dispositivo utilizado para escoger la longitud de onda requerida para el

análisis.   

  

 
ANÁLISIS POR ADICIÓN DE ESTÁNDARES   

  

Las determinaciones analíticas basada en construir la recta de calibración con

patrones, e interpolar para tener el resultado de la muestra problema, solo son

útiles cuando no existen interferencias de matriz; en caso contrario los resultados

no son confiables. Para evitar los efectos de matriz, se emplea el método de

adición de estándares.   

El método de cuantificación conocido como adición de estándares se basa en el

incremento en la medida de la señal provocado por la adición de cantidades

exactamente conocidas del analito a un volumen de muestra también exactamente

conocida.   

  

Para calibrar un método por esta técnica, se puede seguir uno de los siguientes

procedimientos:   

a. Adicionar diferentes cantidades del patrón a una serie de alícuotas

idénticas de la muestra.   

b. Realizar diferentes adiciones del patrón a una alícuota única.   

Para hacer la curva, como en el caso anterior, se hace un gráfico en el cual la

señal corresponde al eje y y la cantidad adicionada al eje x. Ésta se expresa como

peso absoluto o como concentración. La línea de regresión se calcula de manera

usual, el valor de la muestra se obtiene por extrapolación al punto del eje x en el

cual y=0. Este valor negativo sobre el eje x, corresponde a la cantidad del analito

en la muestra problema.   
    

Figura 16 Curva de calibración por adición de estándares   

  

Del análisis de la figura 16, se tiene que el valor de la muestra viene dado por:    

  

Donde a corresponde a la ordenada en el origen y b a la pendiente.   

  

El error estándar de la medida se calcula con la siguiente expresión:   

 
 

Donde 𝑠𝑦 es el parámetro que estima los errores aleatorios en la dirección y y se

calcula con la siguiente expresión:   

donde yi corresponde a los valores estimados de y, y n al número de

observaciones.  

3. REACTIVOS   

 HCl 2,0 M   

 Solución estándar de hierro de 50 µg /ml   

  

4. PREPARACIÓN DE SOLUCIONES: 

HCl: Se pesan 7,0902 g de HCl, se diluyen en 50 mL de agua destilada, luego se

afora hasta 100 mL. 

g∗1mol
∗1
35,451 g
7,0902 ∗1000 mL 1 L=2 M
100 mL

Sln estándar Fe: Se pesan 50 mg por cada litro de sln.(50ppm) 

g 1mg
∗
1 mL 1000 µ g 50 mg1
50 µ =  
1L L
1000 mL

5. MATERIALES: 
  Capsula de porcelana

 Probeta 100 mL

 Pipeta volumétrica 10 mL

 Pipeta graduada 10 mL

 Pipeta graduada 5 mL

 Pera

 Erlenmeyer

 Beaker 100 mL

 Balón volumétrico 50 mL

 Balón volumétrico 25 mL. 

6. PROCEDIMIENTO   

Preparación de la muestra  

a. Macerar o picar finamente una muestra de hígado 

b. Determinar la humedad y las cenizas   

o Secar una cápsula de porcelana a 102+/‐2ºC durante 30 minutos     

o Pasar la cápsula al desecador, dejar enfriar a temperatura ambiente y pesar

(P1)   

o Colocar una cantidad de muestra en la cápsula (Esta depende del tipo de

material, para muestras con alto contenido de humedad, pesar alrededor de

40 gramos, muestras con bajo contenido de humedad por ejemplo leche en

 polvo, pesar alrededor de 5 gramos), pesar el conjunto de la cápsula con la

muestra húmeda    

o Llevar de nuevo el conjunto a la estufa y dejarlo durante una hora, pasar al

desecador, enfriar hasta temperatura ambiente y pesar de nuevo. Repetir

este procedimiento hasta que la diferencia entre los pesos no exceda de

0.05 g (P2)   

o Colocar la cápsula con la muestra en la estufa durante 4-5 horas,   

o Pasar el conjunto al desecador, dejar enfriar y pesar (P3)   

o Determinar el contenido de humedad de la muestra   

o Calcinar el material seco por 4 horas a 550ºC o hasta que las cenizas

tengan un aspecto blanco    

o Enfriar el material a temperatura ambiente y pesar la cápsula con las

cenizas (P4) 

c. Adicionar 40 mL de HCl 2.0 M para disolver las cenizas.  

d. Filtrar la mezcla y aforar la solución a 50 mL.   

e. Tomar 5 balones de 25 mL y en cada uno de ellos adiciones 5.0 mL de la

muestra y el volumen de solución patrón que se indica en la siguiente tabla:   

   

Solución mL de solución patrón de  μg Fe

No    hierro    adicionados   

1    0.00    0   

2    0.50    25   

 3    1.00    50   

4    2.00    100   

5    3.00    150  

f. Aforar con agua destilada hasta la marca.   

g. Establecer las condiciones óptimas de operación del equipo   

h. Para cada una de las soluciones determinar la absorbancia en el

espectrofotómetro de absorción atómica.    

i. Hacer una curva de calibración de μg Fe adicionados vs la absorbancia   

j. Ajuste los datos de la curva por mínimos cuadrados y con los parámetros

estadísticos de la curva determine la concentración de Fe en la muestra y el

error en la determinación.   

7. TABLA DE DATOS   

Tabla 1. Humedad y ceniza. 

Peso Cápsula vacía (P1)       

Peso cápsula con la muestra húmeda
   
(P2)   
Peso cápsula con muestra seca (P3)     
   
102°C 
Peso cápsula con Ceniza (P4)  550°C     
   

  

Tabla 2. Análisis de la muestra. 

N° µg Fe  
Absorbancia   
solución   adicionados   
 1    0       

2    25       

3    50       

4    100       

5    150       

   

CÁLCULOS   

Humedad   

P 2−P 3
Humedad ( % ) = ∗100
P 2−P 1

  

 Cenizas   

P 4−P 1
Cenizas ( % ) = ∗100
P 3−P1

Contenido de hierro en ppm expresado en base seca (bs)   

Elaborar una gráfica de Absorbancia Vs concentración. Con los parámetros de la

curva determinar los 𝜇𝑔 de hierro adicionado y calcular el contenido de hierro con

la siguiente expresión:   

μg Fe ( calculados de lacurva de calibración )

Fe ppm ( bs ) = ∗f
g muestra seca
 

50 ml
f=
5 ml

   

Determinar el error en la concentración.   

NOTA: Hacer los cálculos de la regresión en Excel (Ver anexo1)   

 
Bibliografía 

1. Guia Laboratorio/ Practica espectroscopia de absorción atómica