UNIVERSIDAD VERACRUZANA

Facultad De Química Farmacéutica

Laboratorio de Análisis Instrumental

Docente de la E.E. M.C. Araceli Reyes Téllez.

Examen Final de la E.E. Laboratorio de Análisis Instrumental

I.-Contesta las siguientes preguntas, considera que tu respuesta sea de lo más completa
posible.
1. Explique el fundamento de la espectrometría de absorción atómica.
Este método consiste en transformar la muestra problema (que puede encontrarse en disolución o
sólida) en átomos en estado de vapor y medir la radiación electromagnética absorbida por dichos
átomos.
2. Menciona los tipos de espectrofotometría de absorción atómica y a la vez describe cual es
la más empleada por ser más económica.

Espectrometría de absorción atómica con llama (F-AAS), AAS con calentamiento electrotérmico,
AAS con tecnología de vapor frío y HR-CS-AAS.
La más económico es F-AAS, que emplea una fuente de radiación externa que emite rayas de
radiación de la misma longitud de onda que las de absorción del analito y se debe seleccionar una
de estas rayas que se hace pasar a través de la llama donde están los átomos de analito que
absorben la radiación.
3. ¿Cuáles son las aplicaciones (que se analiza) con esta técnica?

La principal aplicación de este método es la determinación de más de 60 elementos en las más

variadas muestras: rocas, suelos, aguas, vegetales, muestras biológicas, productos petrolíferos,
metales y aleaciones.

4. Explique el fundamento de la espectroscopia infrarroja.

Se fundamenta en la absorción de la radiación infrarroja por las moléculas en vibración. La molécula
sólo absorberá la energía cuando esta sea igual a la necesaria para una transición vibracional.
5. Realice un esquema de los componentes básicos de un espectrofotómetro de luz
infrarroja.
6. ¿Cuál es el fundamento del análisis instrumental por RMN? 
En la propiedad de los átomos de absorber energía cuando son sometidos a frecuencias
electromagnéticas. Los núcleos que se encuentran en estado de baja energía y son irradiados,
absorben energía y pasan a un estado de alta energía, lo que conlleva a que inviertan su spin,
cuando dejan de irradiar vuelve a su estado normal y pierden energía.
Este proceso de absorción de energía de los núcleos se llama resonancia y en un espectro se
interpreta por medio de un pico. Cada pico este asociado a un pico diferente de núcleo.
7. ¿Cuál es el propósito de utilizar disolventes deuterados en RMN? 
Se usan porque no se logran leer en el análisis y crean interferencias despreciables al momento de
leer los picos. Sus porcentajes no llegan al 100, sino al 98-99%
8. ¿Qué información nos proporciona un espectro de RMN 1H? 
El número de señales: Nos dice cuantos tipos diferentes de hidrógenos existen en una molécula; el
desplazamiento químico: Da una idea del ambiente químico que rodea a cada tipo de hidrógeno;
multiplicidad: Dice cuántos hidrógenos son vecinos a cada tipo de hidrógeno y la integración: dice
cuántos hidrógenos de cada tipo existen en la molécula.
9. ¿Qué información nos proporciona un espectro de RMN 13C? 
Determina el entorno magnético de los átomos de carbono.
10. Describe el fundamento del análisis instrumental por Cromatografía de gases
Se fundamenta en que los componentes de una muestra suelen ser moléculas orgánicas
térmicamente estables o gases y estos se disuelven en un disolvente y se vaporizan para separar los
analitos distribuyendo la muestra en dos fases: una fase estacionaria y una móvil.
11. Describa las partes que conforman un equipo de GC
o Gas portador: Transporta los componentes de la muestra, debe ser inerte y se encuentra en un
tanque.
o Puerto de inyección: Permite la introducción de la muestra en la corriente del gas portador.
o Horno de la columna: En su interior se sitúa la columna, debe mantener contacto con las paredes,
su temperatura se debe mantener regulada.
o Columnas: En este tipo de cromatografías se emplean principalmente dos tipos, las columnas
empacadas y las capilares. Las columnas empacadas tienen una capacidad de carga grande,
mientras que las capilares una capacidad de carga pequeña pequeña.
o Detector. Mide el cambio de voltaje, ya que cuando sale de la columna un analito disminuye la
conductividad de la corriente del gas, el filamento se calienta, aumenta su resistencia eléctrica, y
varía el voltaje a lo largo del mismo.
12. ¿Cuáles son los requerimientos de los componentes (analitos) para un análisis por
cromatografía de gases?
Los componentes de las muestras deben ser volátiles a temperaturas y condiciones de operación del
instrumento (hasta 400 -500 ºC) y ser estables a temperatura de inyección.
13. ¿Dónde aplica la cromatografía de gases? Da un ejemplo de una muestra sólida, en un
líquido, en un gas y en un coloide.
o En una muestra sólida, la cromatografía de gases aplica en alimento.
o En una muestra liquida, aplica en aceites esenciales
o En un gas, la cromatografía puede aplicar en gases medicinales
o En una muestra de un coloide, aplica para la leche.
14. Dentro de la cromatografía de gases tenemos dos modos de inyección: Split y Splitless,
describe cada uno y menciona cual es el más utilizado.
Split: Permite inyectar una muestra grande, para después vaporizarla y a continuación, transferir solo
una parte de ella a la columna, el resto se desecha. Es el más utilizado.
Splitless: Es un método para muestras de concentración baja, la válvula de Split se mantiene cerrada
y se inyecta la muestra, el disolvente y analitos se concentran en la cabeza de la columna y
comienzan a entrar a través de esta.
15. Menciona que tipos de columnas se utilizan en el análisis instrumental por cromatografía
de gases.
Hay dos tipos: Las columnas empacadas y las capilares.
16. ¿Cómo elijo mi columna para mi análisis por cromatografía de gases?
Se tienen que considerar que factores son los que afectan la eficiencia de una columna:
o Longitud
o Diámetro
o Tamaño de partículas de relleno
o Material del que está hecha, temperatura
o Velocidad del gas
o Cantidad de muestra inyectada
o Naturaleza de las fases.
17. Menciona los detectores que se usan en un análisis por cromatografía de gases y ¿Cuál es
el detector más usado?
o Detector de ionización de llama (FID) MÁS UTILIZADO
 o Detector de conductividad térmica (TCD)
o Detector termoiónico de llama (FTD)
o Detector de captura de electrones (ECD)
o Detector de emisión atómica (AED)
18. ¿Qué información nos proporciona un espectro masas? 
Da información sobre los diferentes tipos de iones en la muestra según la relación masa-carga de
cada uno.
19. Explica el fundamento de la Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC).
Es una técnica física que separa nuestro analito de interés empleando 2 fases: Una móvil y una
estacionaria, el compuesto pasa por la columna cromatográfica a través de ambas fases por la
bomba de alta presión. Es el resultado de las interacciones específicas entre las moléculas de la
muestra en ambas fases genera su separación.
20. Describe los componentes de un cromatógrafo de líquidos y la función de cada uno de
ellos.
o Dispositivo de suministro de eluyentes (bomba y dispositivo de mezclado de eluyentes): La
misión de la bomba es la de suministrar un caudal constante y libre de pulsos de la fase móvil
a través de la columna, sin que el flujo sea influido por la presión en cabeza de columna, ya
que ésta puede variar por obstrucción de las líneas de conducción, del filtro de la cabeza de la
columna, etc
o Dispositivo de inyección: Un inyector ideal debe tener las siguientes características: -
Introducir la muestra en la columna como una banda lo más estrecha posible. - Ser de fácil
manejo. - Dar lugar a resultados reproducibles, tanto en la cantidad de muestra inyectada
como en el ensanchamiento que origina en la banda cromatográfica. (inyectores de jeringa, de
válvula)
o Conducciones y conexiones: Dos modalidades; isocrático: La fase móvil mantiene la misma
composición durante la elución, y en gradiente, cuando la composición de la fase móvil
cambia según una función dependiente del tiempo. (mezclado a alta presión y mezclado a
baja presión)
o Detector y registrador: Permite medir, a la salida de la columna, una propiedad física del
eluyente, que deberá depender de la composición de este.
o Columna: Elemento fundamental de un cromatógrafo, ya que en ella sucede la separación.
21. ¿Cuál es la función del sistema de bombeo en la técnica instrumental de cromatografía
líquida?
Suministrar un flujo constante de la fase móvil a través de la columna, de esta depende la
reproducibilidad de los tiempos de retención.
22. En la cromatografía líquida (HPLC) existen diferentes tipos de detectores y se utilizan
según la muestra a identificar; menciona los tipos de detectores que hay y cuál es el más
común.
o Detector de absorción UV-Visible
o Detector de absorción infrarroja
o Detector de fluorescencia
 o Detector de índice de refracción
o Detector de dispersión de luz
o Detector electroquímico
o Detector de conductividad
o Detector acoplado a espectrómetro de masas
23. Menciona los mecanismos de separación en HPLC
o Cromatografía de absorción (solido-liquido)
o Cromatografía de reparto/absorción
o Cromatografía de intercambio iónico
o Cromatografía de exclusión molecular
24. En la separación de Fase reversa; ¿Qué polaridad debe tener la fase estacionaria? ¿Qué
polaridad debe tener la fase móvil?
La fase estacionaria debe tener la característica de ser apolar y la móvil debe ser polar.
25. Uno de los parámetros cromatográficos es el número de platos teóricos (N), ¿Cómo lo
podemos calcular? ¿Para qué nos sirve obtener este valor?
Sirve para expresar el poder de separación de la columna y con este se puede comparar el
rendimiento entre diferentes columnas. Se calcula por: N= 16(t R/W)2
26. ¿Qué factores cromatográficos contribuyen a una buena resolución en los picos (señales)
en un cromatograma?
o La selectividad
o Anchura de la banda
o Características de la columna
o La retención de la columna
o La eficiencia
27. ¿Qué aspectos deben considerarse al seleccionar una columna en la cromatografía
líquida?
La polaridad del analito y la del disolvente
28. Menciona algunas aplicaciones (áreas de aplicación) de la técnica analítica instrumental
de HPLC
o En la química (Poliestireno, colorantes, ftalatos)
o Ambiental (Hidrocarburos poliaromáticos, iones inorgánicos)
o Farmacéuticos (Tetraciclinas, corticoesteroides, antidepresivos, barbitúricos)
o Biociencia (Proteínas, péptidos, nucleótidos)
o Productos de consumos (Lípidos, antioxidantes, azúcares)
29. Argumenta lo que está sucediendo en el siguiente cromatograma:
 Se está analizando una muestra de ácido salicílico con la misma fase estacionaria y la misma fase
móvil, pero en cada muestra se modifica la temperatura, aunque con mismo gradiente, modifica en
qu momento se registran cada pico.

30. Se realizo el análisis de Tiamina (B1) y Riboflavina (B2) bajo las siguientes condiciones
cromatográficas:

Se está llevando una cromatografía de fase reversa. El orden de elución se da por su afininidad
polar al solvente y peso molecular y por la composición de la fase móvil. EL tiempo de retención se
acortaría más si se hiciera una cromatografía por fase normal.