Técnicas de análisis modernas

Métodos electroquímicos

 Polarografía

La polarografía es una técnica que sirve para identificar sustancias reducibles u oxidables,
utilizando el electrodo de gotas de mercurio como indicador, este es un método en el cual el
potencial eléctrico se varia de manera regular entre dos conjuntos de electrodos mientras se
controla la corriente.

La solución a analizar se coloca en una celda de vidrio que contiene dos electrodos; un
electrodo consiste en un tubo capilar de vidrio desde el cual el mercurio fluirá lentamente en
gotas y el otro es un contenedor de mercurio, la celda esta conectada a un galvanómetro, el
electrodo de mercurio esta generalmente conectado al lado negativo del voltaje de
polarización, el voltaje aumentara en pequeños incrementos y la corriente correspondiente se
observa en el galvanómetro, la corriente es muy pequeña hasta que el voltaje incremente al
punto que reduzca la muestra de mercurio que cae.

El voltaje critico requerido para causar el rápido aumento de la corriente sirve para identificar
la sustancia que se está reduciendo dándose así un análisis cualitativo.

La polarografía puede detectar y determinar varias sustancias, así mismo la mayoría de los
elementos químicos pueden identificarse mediante polarografía, también se usa para
identificar numerosos tipos de compuestos orgánicos.

Métodos Espectroscópicos

 Espectrofotometría de absorción en el infrarrojo IR

La espectrometría infrarroja se basa en el hecho de que los enlaces químicos de las sustancias
tienen frecuencias de vibración específicas, que corresponden a los niveles de energía de la
molécula. Estas frecuencias dependen de la forma de la superficie de energía potencial de la
molécula, la geometría molecular, las masas atómicas.

Para la identificación de sustancias, se prepara una muestra de la sustancia que se quiere

examinar y una muestra de una sustancia de referencia, siendo ambas preparadas según el
mismo procedimiento. Para la identificación de la sustancia se recurre con mucha frecuencia a
la utilización de espectros de referencia. En conclusión, se compara el espectro obtenido con el
espectro de una sustancia patrón o con espectros procedentes de una base de datos aceptada
por la FE.

Espectrómetros con transformadora de Fourier:

El espectrofotómetro proporciona el espectro IR de una molécula mediante el cual se obtiene

información de los grupos funcionales que contiene el analito. Para realizar el análisis se toma
se toma una muestra de la sustancia a analizar junto con bromuro de potasio y se las muele
hasta formar un polvo muy fino, esta muestra se colocará en una celda metálica y
posteriormente será cristalizada. Se colocará el cristal en la transformadora de Fourier y
posteriormente se podrá observar el espectro del analito.

 Espectrofotometría de absorción en el ultravioleta UV

La utilización del espectro de absorción en las regiones UV visible puede ser de utilidad para la
detección de ciertos grupos funcionales, cuando una molécula absorbe energía radiante en la
región visible o ultravioleta, la valencia o los enlaces electrónicos en la molécula se elevan a
órbitas de más alta energía. Aunque siempre deben confirmarse los datos en combinación otra
información analítica de la que se disponga. Tiene como principio de medición la absorción y la
transmisión de la energía radiante que atraviesa una sustancia, el método es espectroscopio
porque se basa en la medida de la intensidad y de la longitud de onda de la energía radiante, la
región del espectro que aplica es la del ultravioleta visible que va desde los 10 hasta 780nm. La
absorción molecular en la región ultravioleta y visible del espectro depende de la estructura
electrónica de una molécula.

Para realizar un análisis se debe determinar el espectro de emisión del analito a interés, el
espectrofotómetro se configurará la longitud de onda deseada y velocidad de la toma de
datos, para realizar un análisis primero se debe enserar el equipo posteriormente se colocará
cuidadosamente la muestra en el equipo para obtener su espectro de absorción. El espectro
de absorción indica en que región del espectro ultravioleta visible de una molécula es capaz de
absorber energía.

Las moléculas que pueden realizar el proceso de absorción son los grupos funcionales:

Cromóforos: Grupos que permiten absorción de energía y tienen en su estructura dobles

enlaces, triples enlaces, anillos bencénicos o el grupo carbonilo

Auxocromo: No permiten la absorción de energía, dentro de esta categoría tenemos ácidos

carboxílicos, alcoholes y amidas.

Si la muestra tiene uno de estos grupos, el espectro mostrara uno o varios picos a una longitud
de onda determinada.

Métodos cromatográficos

 Cromatografía de gases

La cromatografía de gases (GC) es una técnica analítica empleada para determinar la

composición de una muestra, esta muestra debe ser volátil y tener estabilidad térmica, un
cromatógrafo de gases utiliza diversos gases en su operación en función del analizador y del
tipo de detector concretos.

Primero se debe estabilizar el equipo encendiendo el gas portador que puede ser nitrógeno,
hidrogeno o helio, este gas pasará al interior del equipo a través del inyector pasará a la
columna y posteriormente pasará al detector, una vez estabilizado se procederá con la
muestra a analizar. La muestra ingresara al inyector donde volatizara, una vez volatilizado la
muestra pasara a la columna, la columna se encarga de separar los componentes de la
muestra y estos pasaran al detector, una vez analizado el detector enviara al software del
equipo un cromatograma donde se apreciará los picos de las distintas muestras, el pico
dependerá de la cantidad de componente en la muestra, así podremos identificar los
compuestos bajo la longitud de onda que muestre el cromatograma, para ello es importante
observar el pico de una muestra ya conocida y relacionarla con el cromatograma obtenido.

La sensibilidad del detector depende de la ionizacion del compuesto que se trate siendo el
siguiente orden la respuesta del detector frente a los compuestos organicos:

Compuestos aromaticos > alquenos > alcanos > alcoholes > esteres > aldehidos > cetonas

Debido a la sensibilidad del aparato se pueden determinar aceites escenciales, aromas, acidos
grasos o incluso pesticidas.
  Cromatografía de líquidos

La cromatografía líquida (HPLC), es una técnica utilizada para identificar, cuantificar y purificar
muestras complejas en sus distintos componentes. Consiste en una fase estacionaria no polar
(columna) y una fase móvil. La fase estacionaria es sílica que se ha tratado con RMe2SiCl . La
fase móvil actúa de portador de la muestra. La muestra en solución es inyectada en la fase
móvil. Los componentes de la solución emigran de acuerdo a las interacciones no-covalentes
de los compuestos con la columna. Estas interacciones químicas, determinan la separación de
los contenidos en la muestra.

Primero se suministrara un caudal constante de agua y un modificador orgánico (fase móvil)

mediante una bomba que atravesaran todo el sistema hasta llegar al inyector donde se
colocara un vial con la muestra a analizar, posteriormente el agua y la muestra pasaran a una
columna cromatográfica (fase estacionaria) así pues si el contenido de la muestra es mas afín
al contenido de la fase estacionaria quedara mas tiempo retenido en la columna, por el
contrario si es mas afín al contenido de la fase móvil, pasara más rápido por la columna
cromatográfica hacia el detector, el método de detección es más variable en cromatografía
liquida, se debe aprovechar una propiedad física del compuesto, el detector es diodo array ya
que es un detector universal, una vez la muestra a pasado a través del detector se observara
un cromatograma y para determinar el componente se procederá igual que en la
cromatografía de gases, observar el área con muestras ya conocidas y relacionarlas con el área
que se ha obtenido.

Con este método se pueden determinar proteínas, vitaminas B o C, aditivos, antibióticos

debido a la sensibilidad muy eficiente del aparato.
Objetivo: Conocer y comprender los distintos métodos modernos que se usan en el laboratorio
para identificar y caracterizar una sustancia desconocida.

Conclusión: Se logro interiorizar acerca de los distintos métodos modernos e instrumentos que
se usan para identificar las distintas sustancias desconocidas en el laboratorio siendo estas por
métodos espectroscópicos como espectrofotometría en el infrarrojo y ultravioleta-visible,
métodos electroquímicos como la polarografía, métodos cromatográficos tanto de líquidos
como de gases; los cuales son muy útiles para identificar determinados elementos de la tabla
periódica, grupos funcionales, biomoléculas, moléculas grandes y complejas como son las
proteínas, aceites esenciales, por lo tanto estos son aparatos muy sensibles que se deben
manipular de manera consciente y con mucho cuidado.

Referencias bibliográficas:

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España: McGraw-Hill
 Quiroz, S. & Antunes, S. (2017). Métodos analíticos aplicados a la identificación de
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file:///C:/Users/HP/Downloads/m%C3%A9todos%20espectroc%C3%B3picos%20de
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