INFORME DE LABORATORIO [4012421]

DE BIOTECNOLOGÍA
[4012134]
SEMESTRE: 2023-2

INFORME #: 4 GRUPO: 2 FECHA: 22/11/2023

PRESENTADO POR: Manuel Alejandro Audelo Tovar

Sara Valentina Martinez Gómez
Sara Valentina Gómez Orozco
Carlos Estiben Castaño Aristizabal

TÍTULO: Fermentación alcohólica

OBJETIVOS:
Obtener un metabolito primario (alcohol) a partir de una fermentación realizada
por la levadura de Saccharomyces cerevisiae .
Realizar dos tipos de fermentaciones, una a través de células libres y la otra con células inmovilizadas

RESULTADOS

Imagen 1: Sistema de Imagen 2: Toma de medidas de grados Brix Imagen 3: Mosto

fermentación

Imagen 4: Células inmovilizadas

 Imagen 5: Prueba de metanol Imagen 6: Destilación

Fruta pH 3.03 Grados °Brix 0.7 °Brix iniciales 10.5 °Brix iniciales 7
Brix iniciales
iniciales
cnt 12.01 °Brix finales 21.9 °Brix finales °Brix finales 11
levadura g

cnt 200 Cat Sacarosa 704.9 g Cat Sacarosa Cat Sacarosa 128.7
mosto mL g

Mora Datos 0.7 Dia del montaje Lunes 2 de Octubre, no Jueves 5 de Octubre
necesito sacarosa

Tabla 1: Datos para la alimentación del sistema

Grado alcohólico con fermentación con células Grado alcohólico con fermentación con células libres:
inmovilizadas:
 73.34 80.2

Tabla 2: Grado de alcohol

DISCUSIÓN DE RESULTADOS

las levaduras realizan como proceso biológico para obtener energía la fermentación , degradan carbohidratos
bajo condiciones anaerobias y producen como producto final CO2 y Etanol, el microorganismo utilizado en la
práctica fue Saccharomyces cerevisiae, primero se activó, luego junto con el mosto Ver imagen 3 (fuente de
carbohidratos de la levadura) se agregó al sistema de fermentación Ver imagen 1, luego se dejó fermentar. [1]

En la práctica realizada se evidenció la formación de estos subproductos durante el proceso de fermentación.

La formación de CO2 se evidenció gracias al montaje de la manguera dirigida hacia un recipiente con agua ya
que permitía observar al gas liberado del contenedor del mosto Ver imagen 1. La formación de etanol se
evidenció por medio de las mediciones de grados brix, puesto que se observó como la levadura añadida
(Saccharomyce cerevisiae) se alimentaba de los carbohidratos añadidos en este caso sacarosa, en el mosto.
Durante este proceso metabólico se produce etanol, se controla la producción de metanol buscando evitar que
el oxígeno ingrese al sistema para mantener las condiciones óptimas para la producción de etanol, el CO2 sale
por la manguera para evitar que crezcan microorganismos, además el bisulfito de sodio también controla el
crecimiento de microorganismos, por eso cuando se miden los grados brix se hace lo más rápido posible, para
que el sistema no entre en contacto con el ambiente, Ver imagen 2. [2]

Las levaduras fueron controladas en su alimentación, un suministro equilibrado de nutrientes es crucial para
mantener un entorno propicio para la actividad de las levaduras y evitar la inhibición por exceso de sustrato o
la falta del mismo, por eso utilizamos el mosto, Ver imagen 3, que es una fuente de carbohidratos para
alimentar la levadura sin embargo, se midió los grados brix que son una medida de la concentración de
azúcares en una solución. En el contexto de la fermentación alcohólica, los grados Brix se utilizan para evaluar
la cantidad de azúcares disponibles para ser convertidos en alcohol por las levaduras, nuestro mosto no tenía
suficiente cantidad de carbohidratos, por eso agregamos 704.9 g de sacarosa, Ver tabla 1, debido a que el
mosto estaba muy diluido y tenía poca cantidad de carbohidratos, a lo largo del proceso se midieron los grados
brix, estos permiten ajustar la concentración de azúcares según sea necesario. Si la concentración es demasiado
baja, puede ser necesario agregar más sustrato (sacarosa). Si es demasiado alta, no se alimentaba la levadura,
al final de este proceso se utilizaron 833.6 g de sacarosa para alimentar nuestro sistema. [3]

El final de nuestro sistema de fermentación se ve evidenciado porque la levadura no produce más burbujas
(CO2) lo cual significa que paraba la producción de etanol , la muerte es debida a muchos factores como
inhibición por sustrato, entre otros. Luego continuamos con el proceso de destilar el mosto Ver imagen 6, la
destilación permite separar el etanol del resto de los componentes presentes en la mezcla, incluyendo agua,
subproductos de la fermentación, y otros compuestos no deseados, para al final obtener etanol. [5]

Para la prueba de metanol, los resultados dieron negativos, es decir, no hay presencia de metanol en nuestra
muestra, Ver imagen 5, la imagen de nuestra muestra y el etanol positivo no se ven idénticas, esto es debido a
que por el tiempo nuestra muestra se pondrá del color del etanol positivo. [5]

En la producción de etanol de células libres y células inmovilizadas, produjo más grado de etanol las células
libres, Ver tabla 2, esto se debe al tiempo, debido a que si hubiéramos seguido con el sistema de células
inmovilizadas unos días más, tendríamos más grado de etanol para las inmovilizadas, debido a que estas
pueden durar más tiempo produciendo etanol. [4]
El etanol final ofrece matices y aromas únicos , esto se debe a la Mora.

Aunque usamos una fruta rica en carbohidratos naturalmente, le adicionamos una gran cantidad de azúcar,
esto se debió a que el mosto estaba demasiado diluido, es decir, había mucha cantidad de azúcar en una poca
cantidad de pulpa (mora). Además es una fruta que no tiene una cantidad considerable de Mucílago.

El sistema se dejó a temperatura ambiente, con el fin de producir etanol mayormente, y no compuestos
secundarios.

CONCLUSIONES

1- Demostramos que la fermentación alcohólica es una técnica útil para la obtención de etanol que a partir de
este podemos no solo determinar el grado de alcohol si no también la presencia de metanol.

2- Las células inmovilizadas pueden proporcionar una mayor estabilidad y productividad a largo plazo, pero
esto debe sopesar con los costos y la complejidad asociados con la inmovilización.

3- Se obtuvo de forma satisfactoria el metabolito de interés en la reacción de fermentación (etanol).

4- Controlar la alimentación de las levaduras es necesario.

5- La producción de metanol se da por el contacto con el ambiente.

6- la elección de la fruta se tiene que considerar que el contenido de carbohidratos naturales , glucosa y
fructosa sean considerablemente altos.

7- A mayor temperatura la fermentación transcurre mas rápidamente, sin embargo es menos pura, es decir, se
produce menos etanol y mas cantidad de compuestos secundarios.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Upm.es. [citado el 30 de noviembre de 2023]. Disponible en:
https://oa.upm.es/55235/1/FERMENTACIONES.pdf
2. De la contaminación microbiana en cervezas de fermentación espontánea
producidas en microcervecerías P. Trabajo Fin de Grado [Internet]. Ehu.es.
[citado el 30 de noviembre de 2023]. Disponible en:
https://addi.ehu.es/bitstream/handle/10810/54296/TFG_Mella.pdf?
sequence=1
3. Dalmau J. Todo sobre la fermentación [Internet]. Mun kombucha. 2023
[citado el 30 de noviembre de 2023]. Disponible en:
https://munkombucha.com/todo-sobre-la-fermentacion/
4. Hoyos M, Mauricio A. Evaluación del proceso fermentativo utilizando
células libres e inmovilizadas para obtener una bebida alcohólica tipo
vino a partir de miel. Universidad Nacional de Colombia; 2016. en:
https://munkombucha.com/todo-sobre-la-fermentacion/
5. Manual de laboratorio.