LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR

DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA

Hoja de respuestas Guía No. 8 Laboratorio Metabolismo I

Semana No. 11

Nombre de los integrantes del grupo:

Sara Sofía Archila

Sarah Valentina Garzón

Mariana Rocha Gómez

Para cada uno de los experimentos ustedes deberán describir las características de los medios de cultivo
que reciben el día de la práctica antes de realizar la inoculación o siembra de sus microorganismos (columna
Observación inicial).

Posteriormente, deberán registrar la descripción de las características de los medios después de 24 horas
de incubación (columna Observación Final).

Finalmente, el grupo de trabajo deberá analizar los resultados obtenidos y de acuerdo con la teoría vista en
la asignatura, a la consulta a fuentes fiables de información, a las consultas previas de prelaboratorios, dará
la explicación y/o interpretación de los resultados obtenidos.

Ésta deberá entregarla a sus docentes el día y hora indicado. Incluir representación gráfica de lo
observado o foto tomada a su experimento.

Experimento No 1. Evaluar la capacidad catabólica de un microorganismo como la levadura

Saccharomyces sp. sobre los azúcares
Escribir las observaciones y resultados obtenidos en la Tabla 1. Descripción de los resultados obtenidos en el
experimento No. 1

Experimento No 2. Determinar si las cepas bacterianas Stenotrophomonas maltophila y Escherichia coli

tienen la capacidad de utilizar los carbohidratos presentes en el agar TSI. Colocar las observaciones y
resultados obtenidos en la Tabla 2. Descripción de los resultados obtenidos en el experimento No. 2

Describa lo que observa inicialmente y finalizado el tiempo de incubación de los cultivos en agar TSI.
Interprete los resultados obtenidos, justificando y/o discutiendo lo observado. Para la interpretación, tenga
en cuenta las siguientes preguntas: ¿Qué tipo de metabolismo tiene cada uno de los organismos
evaluados? ¿Estos resultados están acorde a lo reportado por la literatura?
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Tabla No. 1 Descripción de los resultados obtenidos en el experimento No. 1

Observación final después de

Observación Inicial
Medios de cultivo
(Color del caldo, turbidez)
24 horas
(Color del caldo, turbidez,
Interpretación de resultados
presencia de burbuja en la
campana de Durham)

Caldo glucosa al 1%

Caldo lactosa al 1%

Tabla No. 2 Descripción de los resultados obtenidos en el experimento
Descripción de resultados
(cultivo 24 horas): cambio en el
Cepas Bacterianas Observación Inicial
El TSI tenía una coloración
rojiza con vicios naranjas, el
cual se encontraba inclinado
con sus respectivos
componentes como por
ejemplo el rojo fenol, el agar,
glucosa, sacarosa, lactosa
Stenotrophomonas entre otros.
maltophila Al añadir la muestra de la
bacteria, no hubo ningún
cambio de coloración, ni
cambio físico al instante ni
tampoco después de unos
minutos. Lo único que cambio
visualmente fue que en el
momento de inocular la
bacteria en el agar TSI se
debió realizar una estría en la
superficie del agar en forma
de S.
NOTA: Las estrías en el TSI
permiten diferenciar las
colonias que fermentan la
lactosa y la sacarosa.
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Observación final
color del indicador de pH del Interpretación de los resultados
medio de cultivo, presencia de
gas, producción de ácido
sulfhídrico
El TSI agar “es un medio de cultivo destinado a la identificación de
enterobacterias mediante la detección rápida de la fermentación de la
glucosa, lactosa y sacarosa” (Fernando, 2024). Teniendo claro la
función del TSI, encontramos que el Stenotrophomonas maltophila
“son bacilos Gram negativos aerobios, no fermentadores de
glucosa (pero oxidan glucosa y maltosa)” (Adegoke et al., 2017), y
que además hacen parte de la familia de los Xanthomonadaceae.
Según la información anterior sabemos que al no pertenecer a la
familia de las Enterobacterias y al ser aerobio se puede concluir
que este tipo de bacteria no es un fermentador de azúcares ya que
al ser aerobio no necesita realizar la fermentación como proceso
metabólico, por ende, no fermentara la glucosa para producir su
energía ni tampoco fermentará los otros azúcares (lactosa y
sacarosa); en las bacterias fermentadoras usan la glucosa para el
proceso de respiración anaerobia y cuando la glucosa se acaba o
agota en el proceso de fermentación usan los otros azúcares
disponibles, por eso no es posible fermentar la lactosa ni la
sacarosa sin que la glucosa haya fermentado.
Como se puede evidenciar en las imágenes de los resultados de la
prueba a las 20 horas aproximadamente, la práctica dio acorde a la
teoría, ya que, si no hay cambio de coloración o coloración rojiza
fucsia, es indicador de un organismo no fermentador. Cabe aclarar,
que como no hubo ruptura en el medio ni precipitación negra, la
bacteria no es productora de gas ni productora de ácido
Sulfhídrico.
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Ahora bien, la segunda cepa de bacterias que se investigó

Escherichia coli fue la E. coli, la cual se caracteriza por ser “bacilos Gram
negativos, no esporulante, producción de indol a partir de
triptófano, no utilización de citrato como fuente de
Comoya se explicó, se carbono y no producción de acetoína. Además, fermenta
utilizó el TSI para la la glucosa y la lactosa con producción de gas.” (Estornell,
identificación de 2023).
enterobacterias.
Inicialmente, cada tubo
Teniendo en cuenta que esta bacteria sí es una
tenía una coloración
rojiza por la presencia Enterobacteria (la cual suele habitar el intestino de
del rojo fenol. No algunos organismos), la prueba del TSI debía permitir la
obstante, pasado un identificación de esta frente a otras cepas bacterianas.
tiempo, se observó las Al observar las imágenes (pasado las 20 horas), se
muestras bacterianas encontró que los tubos de ambos grupos tenían las
para así relacionar su siguientes características: pico amarillo, fondo amarillo y
color, formación de presencia de ciertas burbujas en la parte inferior. Al
gases y precipitado indagar acerca de estos resultados se encontró que el
Escherichia coli
negro, según la pico amarillo significa que se produjo la fermentación de
especie.
la lactosa o sacarosa y el fondo amarillo la fermentación
de la glucosa, mientras que en la parte inferior del tubo
también se observó ciertas burbujas (gas).

Para entender el laboratorio se necesita conocer el

término de fermentación, su importancia radica en
que,“ Además de la respiración, existe otra forma
anaeróbica de degradar la glucosa y producir energía
utilizable, la fermentación, que algunos sistemas vivos
como ciertas bacterias y levaduras, obtienen energía
solamente de la fermentación sin necesitar oxígeno;
además algunas células humanas como las musculares
pueden producir energía mediante este proceso como
"medida de emergencia" cuando escasea el oxígeno.
 Un aspecto importante con respecto a estas bacterias es que “E.
coli puede respirar dependiendo de lo que hay a su alcance
produciendo las enzimas que requiere. Las enzimas, son
herramientas hechas de proteína que las células de los seres
vivos producen a partir de la información en su ADN.” (Estornell,
2023b); siendo un factor clave para su supervivencia, ya que al
estar presente en ubicaciones sin oxígeno pueden seguir
obteniendo energía. Como se mencionó en el inicio, estas
bacterias suelen ubicarse en el intestino, donde es fundamental
la fermentación para obtener la energía.
En este caso, dado al cambio de coloración, las bacterias
fermentaron la glucosa. También, la coloración del pico fue
debido a la fermentación de la lactosa, lo cual corresponde con
lo mencionado al inicio; es importante mencionar que estos
cambios de coloración aparecen dado que, al producir ácidos,
que son detectados por el indicador rojo fenol. Para confirma los
resultados obtenidos, se consultó una tabla que mencionara las
diferentes cepas bacterianas y su correspondiente reacción con
el agar. Lo cual se presenta a continuación:

Cuando se observa esta, los resultados de la práctica, dado a que

las coloraciones obtenidas experimentalmente coinciden con lo
planteado en la literatura y los presentado en la tabla. No hubo
presencia de ácido sulfhídrico, debido a que no se formó ningún
precipitado negro bajo la superficie. El comportamiento
presentado en la gráfica es coherente con los resultados
experimentales.

BIBLIOGRAFÍA
Adegoke, A. A., Stenström, T. A., & Okoh, A. I. (2017). Stenotrophomonas maltophilia as an emerging ubiquitous pathogen: Looking beyond contemporary antibiotic therapy.
In Frontiers in Microbiology (Vol. 8, Issue NOV). Frontiers Media S.A. https://doi.org/10.3389/fmicb.2017.02276
Fernando. (2024, 2 abril). TSI AGAR | Identificación de enterobacterias | Bioser. Bioser. https://www.bioser.com/productos/tsi-agar-1242p/#:~:text=El%20TSI
%20(Hierro%20de%20Triple,producci%C3%B3n%20de%20sulfuro%20de%20hidrogeno.

Estornell, J. (2023, 23 agosto). Escherichia Coli: características, patogenicidad y prevención (I). Christeyns. https://www.christeyns.com/es-

es/escherichia-coli-caracteristicas-patogenicidad-y-prevencion-i-2/

Estornell, J. (2023b, agosto 23). Escherichia Coli: características, patogenicidad y prevención (I). Christeyns.

https://www.christeyns.com/es-es/escherichia-coli-caracteristicas-patogenicidad-y-prevencion-i-2/